肿瘤干细胞 🐯 培养技 🌳 术（肿瘤干细胞培养技术有哪些）
- 作者: 李司柠
- 来源: 投稿
- 2025-04-20
1、肿 🌳 瘤干细胞培养技术
肿瘤干 🐟 细胞培养技术
定义：肿瘤干细胞培养技术是一种允许分离培养、和扩增肿瘤干 🐵 细胞 (CSC) 的技术是一。CSC 小。群具有自我 💮 更新和分化成不同癌细胞类型潜力的细 🐘 胞
目的：研究 CSC 的生物学特 🌻 征和致瘤机制
开 🐳 发针对 CSC 的治疗策略
筛选和鉴定具有抗 CSC 活性 🌺 的 🐛 药物
技术：1. CSC 分 🐈 离 🌺 ：
基于表面标 🌴 记：使用荧 🐯 光激活细胞分选 (FACS) 捕获表达特定表面标记的 CSC。
基于功能 🦅 ：使用细胞功能测试（如侧群体分析分）离具有干细胞特征的细胞。
2. CSC 培养 🌹 ：
血清培养 🌳 基：CSC 通常在含有血清的培养基中培养。
无血清培养基：使用无血清 🐝 培养基培养 CSC 以避免血清中存在的生长因子和激素。
基质细胞：模拟肿瘤微环境，将 🦋 CSC 与 🌴 基质细胞（如成纤维细胞）共培 🐦 养。
3. CSC 扩 🦁 增 💮 ：
生长因子：添加 🐡 生长因子（如 EGF 和 FGF）促进 CSC 扩增。
干细胞因 🌾 子 🐱 ：添加干细胞因子（如 Oct4 和 🌴 Sox2）维持 CSC 的干细胞状态。
培养基优化优化培养基：成分 🐞 和培养条件以支持 🍀 CSC 扩增。
验证：培养的 CSC 通过以下 🦉 方法进行 🕊 验证：
表面标记表达：检 🌹 测特定表面标记 CSC 的表达。
功能试验：评估 CSC 的自我更 🐡 新、分化和致瘤 🍀 潜力 🕸 。
基因表达分析分析：中 CSC 相 CSC 关基因和 🌺 信号通路的表达。
应用：CSC 生物学研究研究：的 CSC 致 🐋 瘤机制、耐药性机制和治疗靶标。
药物筛选筛选：和鉴定抑制 🐡 CSC 生 🌾 长的药物。
个性化治疗：培养患 🐎 者来源 🍁 的 CSC 以预测治疗反应 🐒 并制定个性化治疗方案。
再生医学：CSC 有 🐞 潜力用于再生医学应用，例如组织工程和细胞治 🐼 疗。
2、肿瘤 🐼 干细胞培养技术有哪些
肿瘤干细 🌿 胞培 🐠 养 🌸 技术
1. 球 🌹 体培 💮 养 🌹
将肿瘤 🌷 细胞悬浮在培养基中，形成独立的球体。
球体富含肿 🐧 瘤干细 🦈 胞，因为它们具有自我更新和分化的能力。
2. 悬浮 🌵 培养 🌸
将肿瘤细胞保持在悬浮状 🦄 态，而不是 🌴 贴壁 🐅 培养。
悬浮培 🦅 养条件有利于肿 🌳 瘤干细胞增殖和维持干 🐱 性。
3. 培养基补充 🌿 因素
添 🐛 加生长因子、细胞因子和其他补充因素到培养基中，以促 🌷 进肿瘤干细胞增殖和存活。
例如，EGF、bFGF、胰岛素和 🌵 血清。
4. 基 🍁 质 🐠 凝胶培 🐬 养
在基质凝胶 🐝 上培养肿瘤 🕷 细 🦍 胞，如Matrigel。
基质凝胶模拟肿瘤微环境，有利于肿瘤干细胞 🐧 的生长。
5. 共培 🕸 养系 🌵 统
将肿瘤细胞与基质细胞 🐳 或免疫 🐞 细胞共培养。
共培 🦋 养系统提供与肿瘤微环境类似的条件，促进肿瘤干细胞 🐡 增殖和存活。
6. 药物筛选平台 🦁
建立 🐼 肿瘤干细胞培养平台，用于筛选抗肿瘤药物。
靶向肿瘤干细胞的药物可以 🍀 提高治疗效果和减少复发。
7. 异种移 🐘 植 🐼 模 🌲 型
将肿瘤干细胞异种移植到小鼠 🐛 等免疫缺陷动物中，形成肿瘤。
异种 🐳 移植模 🐅 型用于研究肿瘤干细胞在肿瘤发生和转移中的 🐋 作用。
8. 器官仿生培养 🦢
将肿瘤干细胞与其他细胞类型在器官芯片 🐱 或微流体装置中共同培养。
器官仿生培养系统模拟复杂的人体微环境，用于研究肿瘤干细胞与周围环境的相互作 🦆 用。
3、肿瘤干细胞培养技术 🐒 是什么
肿瘤干 🐠 细胞培 🐞 养技 🐎 术
肿瘤干细胞培养技术是一系列用于在大体外培养肿瘤干细胞的方法肿瘤干细胞是。具。有自我更新能力和致瘤 🦋 潜能的癌症细胞亚群开发这些技术对于理解肿瘤生物学、筛。选抗癌药物和开发癌症治疗至关重要
主要 🐞 技术：
1. 球 🌷 状 🦁 培养 🦋 ：
将肿瘤细胞接 🕊 种到含生长因子的培养基中。
细胞形成非贴壁的三 🍀 维聚集体，称为球状。
球状包含富含肿瘤干细 🕸 胞的亚 🦋 群。
2. 悬浮 🐞 培养 🦆 ：
将肿瘤细胞 🌺 接种 🦈 到 🌻 低附着培养皿中。
细胞悬 🐝 浮在培养基中，形成聚集体或团块。
团块富 🐱 含肿瘤干细胞和 🐈 具有侵袭性特征的细胞 🐛 。
3. 荧光激 🍀 活细 🌺 胞分选 (FACS)：
使用 🦁 荧光标记 🌲 的抗体靶向肿瘤干细胞特异性表面标 🐼 记。
通过 FACS 分选出带有目标标 🍀 记的细胞。
4. 免 🕊 疫磁珠分选：
使用包被有 🌵 针对肿瘤干细胞 🪴 标 🐺 记的抗体的磁珠。
将细胞 🌴 与磁珠混合，然后用 🐬 磁铁捕获带有标记的 🌹 细胞。
5. 小鼠 ☘ 异 🐺 种移植 🐅 模型：
将肿瘤细胞接种到免疫缺陷小 ☘ 鼠中。
肿瘤形成后，从肿瘤中分离出肿 🐋 瘤干细胞。
该方 🦈 法允许在体内研究肿瘤干 🕊 细胞特 🍁 性。
好处：能够研究肿瘤干细胞 🐞 的生物 🐶 学和行 🐶 为。
可用 🐎 于 🌹 筛选靶向肿瘤 🌷 干细胞的药物。
为开发针对该特定细胞亚群的新型癌症治疗铺平了 🦢 道路。
限制：肿瘤干细胞 🐡 培养技术具 🐟 有技术要 🐵 求。
体外培养可能会改变肿瘤干细 💮 胞 🦊 的特性 🕷 。
并非所有肿瘤类型都具有可培养的肿瘤干细 🌲 胞。
4、肿瘤干细 🌹 胞培养技术原理
肿瘤干细胞培 🌷 养技术原理
肿瘤干细胞 (CSC) 是肿瘤中具有自我更新和分化能力的一类细胞。培养有 CSC 助于研究 🌴 肿瘤的起源、发生和发展，以。及探索新的治疗靶点
1. 肿瘤切除组织 🦈 获 🐼 取 🐟
从肿瘤患者的新鲜肿瘤组织中获 🐛 取单细胞悬液。
2. CSC 表 🌲 面标记富 💐 集
使 🐛 用特异 🐟 性表面标记抗 🌼 体对 CSC 进行荧光激活细胞分选 (FACS)。
常见 🐺 的 🦈 标记包括 CD44、CD133、CD24 和 ALDH1。
3. 球 🦋 状培养 🐴
富集的 CSC 细胞置于悬浮培养基中，形，成小球状结 🦊 构称为肿瘤球体。
球体培养基含有生长因子和抑制剂 🌿 ，促进 CSC 的自 🐡 我更新和抑制分化。
4. 肿瘤 🐘 形成实验
将 🐶 球体注射到 🐠 免 🐛 疫缺陷小鼠体内。
如果球体形成肿瘤，则，表明培 🐳 养的细胞具有肿瘤形成能力且符合的 CSC 特征。
5. 分化 🌼 诱导
通过加入诱 🐬 导剂或改变培养条件，可以诱导 CSC 分化为不同 🌾 的 🍀 肿瘤细胞类型。
这种分化能力进一步证实 🐧 了 CSC 的多能性。
6. 特 🐠 征验 🐶 证
培养的 CSC 细胞需要通过多种方法进 🐵 行验证，包括：
表面标 🌷 记 🐕 分析 🐼
自我 🐡 更新能力检 🦉 测
分化 🐯 潜能 🐴 评估 💐
肿瘤 🕸 形 🕸 成 🦟 实验
优势：提供 🦍 纯化的 CSC 细胞群，便于 🐴 研究。
有 🦅 助于了解 CSC 在肿瘤发生和进展中的作用。
为 🐈 探 💐 索 CSC 靶向治疗提供平台。
局限性：不同肿瘤类型的 🐧 CSC 表面标记可能 🐒 存在差异。
体外培养 🐶 条件可能影响 🦈 CSC 的特性。
球体培养可能富集非 🌷 CSC 细胞。
