分离干细胞用移液器（分离干细胞 💐 用移液器 🕊 的原理）
- 作者: 刘晚卿
- 来源: 投稿
- 2025-09-26
1、分 🐯 离干细胞用移液器
材料：无菌 🐬 移液器
移 🐡 液器 🐠 吸 🌸 头
无菌离心管 🌷 （50 mL）
含 🦅 EDTA 的 PBS（磷 ☘ 酸盐缓 🐛 冲液）或无缓冲液
分离培养 💮 基
步骤：1. 准备细胞 🐡 悬液：
收集细胞 🐱 并将其稀释在含 EDTA 的 PBS 或无缓冲液中，浓度约为 100200 万个细胞/mL。
2. 移液细胞悬 🦊 液 🦟 ：
使用无菌 🦍 移液器吸取 12 mL 的细胞悬液。
确 🐼 保吸取 🌼 量在移液器吸头容量的 2080% 之间。
3. 轻 🦁 轻吹 🦉 出细胞 🐅 悬液：
将移液器轻 🌴 轻插入无菌离心管中，位于管壁附近。
缓慢而小心地吹出细胞悬液 💮 ，避免形成气泡。
4. 重复 🦁 吹 🦋 出：
重复步骤 3，直到所有细胞悬液都被移液至离心管 🦊 中。
5. 离 🦄 心细 🕸 胞 🕊 ：
将离 🦅 心管 🐼 在 300 x g 下 🐠 离心 5 分钟。
这 ☘ 将沉 🐧 淀 🦆 细胞。
6. 去 🌿 除上清液 🕷 ：
小心吸除 🌳 上清液，注意不要扰动细胞沉淀。
7. 重悬 🐠 细胞 🐡 ：
用分离培养 🐋 基重悬细胞沉淀。
轻轻吹打细胞悬液 🐘 以使其 🦉 均匀分布。
提示：在整 🌼 个过程 🐧 中保持无菌操作。
使用干净的移液 🐋 器吸头，防 🐎 止交叉污染。
避免用力吸 🦢 取 🌾 或吹 🕸 出细胞，以免损坏细胞。
对于较大的 🐅 细胞悬液 🦉 量，可以 🦅 分批移液。
2、分离干细胞用移液器 🌼 的原理
移 🕷 液器分离干 🌷 细胞的原理
移液器分离干细胞是一种基于体积测量和精 🐟 密液体操作的技术。其原 🐡 理如下：
1. 悬 🐈 浮 🐵 细胞 🐘 ：
要分离的细胞 🐳 样本悬浮在培 🦟 养液 🐅 中。
2. 移液特定体 🦆 积：
使用移液器，将特定体积的悬浮细胞液吸入移液器吸头中吸头。容。量因所需的细 🐕 胞分离目的而异
3. 层析 🐒 分 🌸 离 🦅 ：
将 🌳 吸取的细胞液移到分层密度的梯度培养液（如 FicollPaque）中梯度培养液。由不同密度的液体层组成，每层。有不同的细胞类型亲和力
4. 离 🦊 心 🐯 ：
分层培养液被离心，这会根据其密度将细胞分离成不同的层。干，细胞。通常具有中间 🌲 密度在特定层中富集
5. 回收 🐝 干 🦈 细胞：
离 🕊 心后，通过移液器小心地回收富含干细胞的层。该层。可以进一步纯化或用于其他实验
优点：隔离特定细胞 🦍 亚群的高精度。
可 🦉 扩展性可 🐒 ，用于分 ☘ 离大量细胞。
相对于其他分离方法 🦈 成 🌾 本 🌵 较低。
局限性：可能需要优化参数（如梯度培养液密度 🌻 、离心速度和时间 🐡 ）以 🌷 获得最佳分离。
细胞 🐡 污染 🌲 风险，需要使用无菌技术。
可能无法分离某些具 🐋 有相近密度或特征的细胞类型。
3、分离干细胞用移液器可以 🐘 吗
通常不建 🐦 议使用移液器分离干细 🐞 胞。
移液器是精确测量和 🌺 移取液体体 🍀 积的仪器。由于干细胞是脆弱的细胞，使。用移液器，可。能会损坏它们移 🪴 液器的吸力和排出过程可能会使干细胞受到剪切力这也会损坏细胞
通常 ☘ ，分离干细胞的推 🌸 荐方法包括：
密度梯度离心：利用干细胞和杂 🪴 质的密度差异进行分 🪴 离。
磁性激活细胞 🦈 分选 🐘 (MACS)：使用磁珠结合特定抗原的细胞表面 🌺 标记，然后通过磁场分离靶细胞。
流式细胞术：利 🍀 用 🌴 荧光标记区分和分离具有特定特征的细胞。
4、干细胞分 🐱 离 🌸 机多少钱一台
干细胞分离机的价格因型号、功能和制造商而异。根据特 🐅 定需求 🌼 和预算价格，范围从：
基本 🐛 型号：约 🦍 50,000 美元至美元 🐺 100,000
中级型号：约 150,000 美元至美元 🐼 250,000
高级型号：约 300,000 美元至美元 500,000 或 🦅 更高
需要 🐴 注意的是，这，些只是估计值实际价格可能会有所不同。建。议直接联系制造商或供应商以获取准确的报价
