大鼠骨髓基质干细胞(骨髓基质干细胞和 🦅 间充质干细胞)
- 作者: 李鸣岐
- 来源: 投稿
- 2025-09-22
1、大鼠骨髓 🐎 基质干细 🐠 胞
大 🌿 鼠骨髓基质干细胞 (BMSCs)
定义:BMSCs 是一种多能干细胞,存,在于大鼠骨髓基质中具有分化为多种组织类型的潜 🐦 能。
来源:BMSCs 主要来源于大鼠骨 🌼 髓中骨髓基质,其中包括干细 🐼 胞龛、脂肪细胞和成纤维细胞。
特征:附着于培 🐺 养 🕷 皿并呈梭形 🐱
表达特 🐯 定的 🦆 表面标记,例如 CD29、CD44、CD90 和 CD105
具有自我更 🐬 新和多能分化能力
能够分化 🌻 为骨、软骨、脂肪和肌腱等各种组织类型
应用:BMSCs 在再 🌷 生医学和基础 🐡 研究中具有广泛的应 🌺 用:
组织工程:用于修复受损组织 🐦 和器官,例如骨 🐺 缺损和软骨损 🐬 伤。
细胞疗法:作为干细胞移植治疗各种疾病 🐺 ,例如心肌梗塞和神经 🌺 退行性疾 🐱 病。
药 🦢 物研发:作为体外模型来评估新 🐡 药物的疗效 🐡 和毒性。
研究疾病机制:用于研究骨骼发育、衰老和 🐵 疾病,例如骨质疏 🐺 松症 🦁 。
分 🐠 离和 🦅 培 🦆 养:
BMSCs 通常通过 🕊 以下步骤分离和培养:
1. 从大鼠骨髓中提取 🕊 骨髓
2. 离心分离出单核细 🌵 胞
3. 培养单核细胞,使其贴壁并形成 🦅 集落
4. 扩 🦉 增并纯 🐛 化 🌺 BMSC 集落
限制:尽管具有强大的分化能 🦆 力,但 BMSCs 也有一些局限性:
免 🐠 疫原性:异种移植的 BMSCs 可能会引起免疫排 🐶 斥反 🐳 应。
衰老:BMSCs 随着时间 🐱 的推移会失去分化能 🐋 力 🦆 。
肿瘤形 🌺 成:如果未适当控制,BMSCs 可能会形成肿瘤。
2、骨髓 🌷 基质干细胞和间充质干细胞
骨 🐋 髓基 🌸 质干细胞 🍁 (BMSC)
定义:存在于骨髓中的一种多能干细胞,具有分 🐛 化为多种组织类型的潜力。
来源 🌷 :骨髓基 🐼 质,一种支持 🌷 骨髓细胞的结构。
分化能力 🐛 :
骨细胞 🐳
软骨 🐟 细胞
脂肪 🐈 细胞 🐯
成 🦁 肌细胞 🌹
特性:贴壁生长 🐟
表达 🌸 表面 🌸 标记 CD73、CD90、CD105,而不表 🐡 达 CD34、CD45
具有 🦢 免疫调 🦉 节特性 🦉
间充质干细胞 🌻 (MSC)
定义:存在于各 🦟 种组织 🐯 和器官中的多能干细胞,包括骨髓、脂肪组织和脐带血。
来 🐵 源:间充质,一种连接支持组织 🐵 的组织。
分化 🐬 能力:
骨细胞 🐳
软骨 🐬 细 🦍 胞 🌹
脂肪细 🦄 胞
神 🐋 经细胞 🕸
肌 🐳 细 🐦 胞 🐘
特性:贴壁 🦢 生 🌹 长 🕊
表达表面 🦅 标记 CD73、CD90、CD105,而不表达 CD34、CD45
具有 🐬 免 🐎 疫调节特性
分泌多种生长因 🐡 子和细 🦉 胞因子
BMSC 和 MSC 之间 🐅 的 🐅 差 🦊 异
虽然 BMSC 和 MSC 具有相似 🐅 的分化能力和表面标记,但它们之间存在一些关键差异:
来源:BMSC 仅存在于骨 🌾 髓中,而存在于 🐈 MSC 多种组织中。
丰度:骨髓中 BMSC 的数量比其他 🌷 组织中的 💮 MSC 更丰富。
培 🐦 养:BMSC 比 MSC 更容易 🐧 分离和培养。
应 🐬 用:BMSC 主要用于骨组织再生,而用于 MSC 更,广泛的治疗应用包括软骨损伤 🐱 、神经损伤和免疫调节。
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3、大鼠骨髓间充质干细胞流式 🌸 鉴定
大鼠骨髓间充质干细胞 🐳 流式鉴定
试 🐡 剂和 ☘ 设备 🌾 :
骨 🌹 髓提取仪 🌵
密度梯度离心 💮 液(富 🦟 血小板血浆)
流式 🐼 细胞术 🐠 单克隆抗 🌿 体(CD29、CD34、CD45、CD73、CD90、CD105)
流式细 🐴 胞 🐵 术仪
分 🐈 析软件
实 ☘ 验步 🦈 骤 🍀 :
1. 骨髓 🦋 提取:
处 🐱 死大鼠,取出股骨和胫 🌻 骨。
用骨髓提取 ☘ 仪将骨髓冲洗出来,收集在含乙二 🐈 胺四乙酸二钾盐(EDTA)的培养基 🐵 中。
2. 密度 💮 梯度离心:
将骨髓悬液与密度梯 🐈 度离心液分层离心分 🐛 ,400×g 钟 30 。
收集 🐝 位于梯度界面的 🌳 单核细胞层。
3. 流式 🐼 细胞术 🐵 标记 🦉 :
将单 🕷 核细胞重悬于含 1% 牛血清白蛋白 (BSA) 的 💮 培养基中 🌼 。
加入流式细胞 🦊 术抗体,4°C 孵育 🐅 30 分钟。
洗涤 🌲 细胞,并用适当的同种型对照染色。
4. 流式细胞 🐡 术检测:
使用流式细胞术仪 🍁 分析细 🐯 胞,设置门以选择单核细胞群。
分 🐶 别采集 CD29、CD34、CD45、CD73、CD90 和 CD105 的荧光强 🌼 度。
数据 🐋 分 🦟 析 🐋 :
根据同种型 🐴 对照设置门,排 🕊 除背景荧光。
分析 🐒 细胞群的 🐶 表面标记分 🐠 布,计算其百分比。
根据 🍀 国际间充质干细胞协会 (ISCT) 的标准,确定间充质干细胞 💐 为:
CD29+
CD34、CD45
CD73+、CD90+、CD105+
注 🌿 意 🌷 事 🦉 项:
使用高 ☘ 品质的抗体以确保准确 🦄 的结果。
严格控制温度和 🍀 孵 🦆 育时间,避免抗体非特异性结合。
使用适当的对照进行背景校正 ☘ 。
至少进行三个独立实验 🐳 以确保结 🐶 果的鲁棒 🐠 性。
4、大鼠骨髓间充质 🦍 干细胞形态图
[图片]注释:
A: 未经诱导的间充质干细胞。纺锤 🍀 形或多边形,具 🐧 。有大的桃心形细胞核和丰富的胞质 🐞
B: 向成软骨细胞诱导的间充质干细胞细胞。呈 🐝 圆形或卵圆形胞质,内,含。有空泡表明有软骨基质的形成
C: 向成骨细胞诱导的间充质干细胞细胞。呈 🦢 星形或多 🐯 边 🌳 形胞质,内。形成许多矿化结节
D: 向成脂肪细胞诱导的间充 🌷 质干细胞细胞。呈圆形或多边形胞质,内。含有大 🕊 量脂滴