牙髓 🐈 干细胞培养方法（牙髓干细胞可以治疗哪些疾病）
- 作者: 朱奕南
- 来源: 投稿
- 2025-06-07
1、牙髓干细 🐱 胞培 🌺 养方法
牙髓干细胞培 🌷 养 🌼 方 🌺 法
材料拔除的健康牙 🐎 齿，无龋齿或牙周病 💐
无 🕷 血清培养基 🍁 （如DMEM/F12）
胎 🐴 牛 🐦 血 🌻 清（FBS）
胰蛋 🌵 白 🐒 酶
胶原 🐬 酶 🐕 IV
细胞分离培养基（如骨髓 🦢 小球培养基）
抗 🍁 生素（如青霉素、链 🐺 霉素 🐈 ）
细 🕸 胞培养 🦊 皿或培养 🐶 板
步骤1. 牙 🍀 髓 🦋 分离 🌸
消 🐋 毒牙齿 🦉 表面。
打开 🐧 牙髓腔，移除牙髓组织。
将牙 🦉 髓组织置于无血清培养基中。
2. 单核细胞分 🌲 离 🐋
将牙髓组织切成小块 🕊 。
在含胰蛋白酶和胶 🦉 原酶 IV 的培养基 🐳 中消化 3060 分钟（温度：37°C，CO2：5%）。
通过 70 μm 细胞 🐧 滤网分离单 🐳 核细 🌴 胞。
3. 细 🐵 胞培 🐼 养 🕷
将 🦅 单核细胞悬浮在细胞分离培养基中，并加入 FBS（1020%）。
在含 🐵 37°C、5% CO2 的 🌿 培养 🌿 箱中培养。
定期更换培养 🐧 基（每 23 天一次）。
4. 干 🌷 细胞克隆筛选
当细胞汇合度达到 7080% 时，将 🐞 细胞传代到新的培养皿 💮 中。
使用干细胞标记物（如 CD73、CD90、CD105）进行标 🍀 记。
通过流式细 🌿 胞分选或 🍀 免疫磁珠分离纯化 💐 干细胞克隆。
5. 细胞扩增 🐘 和分化诱导 🐟
将纯化的干细胞克隆转移到新的 🍁 培养 🐡 皿中进 🐒 行扩增。
根据需要，可以通过添加特定生 🐯 长因子（如成骨生长因子成、脂生长因子）诱导干细胞分化为不同类型的细胞。
培养条件温 🍀 度 🐅 ：37°C
CO2 浓度 🌿 ：5%
培 🌾 养基：无 🐎 血清培养基 + FBS（1020%）
抗生素 💮 ：青霉素（100 U/mL）、链霉 🌺 素（100 μg/mL）
培养间隔 🕊 ：每 23 天更换 🐯 一次培养基
注意事项使用新鲜的拔除牙齿，以获得最佳的干细胞存 🦊 活率。
严 🐦 格遵守无菌操作，以防止污染。
定期监测细 🍁 胞形 🐬 态和生长情 🕷 况。
培养过 🦟 程中避免使用含动物成分的培养基，以避免免疫排 🐈 斥反应。
2、牙髓干细胞 🕷 可以治疗哪些疾病
牙髓干细胞具 🦅 有广泛的治疗潜 🐯 力，可，以治疗多种疾病包括：
神经 🦅 系统疾病：
脑卒中 🌻
阿尔茨 🐛 海 🦁 默病 🕸
帕金森 🐴 病 🕊
多 🌺 发性 🐵 硬化症
心血管疾病 🐬 ：
心肌 🐒 梗死
心力 🌲 衰竭 ☘
骨 🐯 骼疾病 🦈 ：
骨质 🌳 疏松症
骨 🍀 折 🐅
骨 🦈 髓 🐶 瘤
皮 🌴 肤 🐠 疾 🐬 病：
烧 🦢 伤 🐴
溃 🐺 疡 🐧
银 ☘ 屑 🌾 病 🐳
牙科 🌸 疾病：
牙 🐛 髓炎
根尖 🦍 周 💮 炎
牙周病 🦁
再生医学 🐺 应用：
角 🌼 膜再生
神经再生 🐅
肝 🌾 脏再 🌸 生 🐕
其他 🌿 疾 🌵 病 🐘 ：
糖 🕊 尿病 🐬
慢性肾病 🐘
癌症（辅 🦆 助治疗）
3、牙髓 🐈 干细胞培养方法有哪些
牙髓干细胞培养方 🦋 法
1. 酶促消 🐡 化 🐦 法 🐬
优点：效 🐎 率 🍀 高，产量 🐳 高。
缺 🍁 点：酶处理可能会损伤细胞。
步骤：1. 去除牙冠和牙 🌼 根，获 🐠 取牙髓组织。
2. 将牙髓组织 🐋 用蛋白酶（如胰蛋白酶 🌴 或胶原酶）消化。
3. 离心收 🌷 集细胞悬液 🦈 。
4. 悬浮于含生 🪴 长因子 🐵 的培养 🐱 基中进行培养。
2. 组织块 🌹 培养 🦈 法
优点：保持 🐧 细胞的 🌳 微环境，避免酶损伤。
缺点 🌴 ：产 🌷 量低 🌼 ，效率低。
步骤：1. 切取小块牙髓组织 🐧 。
2. 将 🌷 组织块放置于含生长因子 🌸 的培 🐬 养基中。
3. 随着时间的推移，组织块中 🐯 会形成干细胞克 💐 隆。
4. 挑选并分 🦢 离干细胞克隆 🐛 进行进 🌷 一步培养。
3. 干细胞磁 🐘 珠分离法
优点 🐴 ：高特异性，纯度高。
缺点 🦄 ：昂贵，细胞可 🦊 能会 🌸 被磁珠激活。
步骤：1. 使用带有特定抗体的 🐟 磁珠将牙髓干细胞与其他细胞 🦆 分离 🌳 。
2. 将悬浮液通过磁柱，抗体 🌵 结合 🕸 的干细胞将被磁珠吸附。
3. 冲洗磁柱 🌴 除去未结 🦟 合的细胞 🐋 。
4. 释放吸附的 🍁 干细胞并 🐱 进行 🐟 培养。
4. 微载体培养 🦊 法
优点：提供较大 🐺 的生长表面积，促进细胞增 🦟 殖和 🐡 分化。
缺点：需要优化微载体基质和 🐳 培养条件。
步骤：1. 将牙髓干细胞悬浮 🦋 在含有微载体的培养 🌷 基中。
2. 微载体沉 🌼 降，干 🐠 细胞附着在微载体表面。
3. 微载体在培 🐝 养基中振荡，促进细胞增殖和分化。
5. 三 🐴 维培养 🕸 法 🕊
优点：模 🌼 拟牙髓的天然微环境，促 🌷 进干细胞的自我更新和分化。
缺点：技术要求高 🐳 ，成本 🕷 高。
步骤：1. 将牙 🐼 髓干细胞悬浮于含水凝胶或支架材料的溶液中 🍁 。
2. 溶液 🌻 凝固 🌻 ，形 🌺 成三维培养物。
3. 三维培养物在特定的培养条件下培养，促进干细胞 🌷 的生长 🌷 和分化。
4、牙 🌼 髓干细胞 🐯 培养方法有几种
牙髓 🌸 干细胞培养方法主要有两种：
贴壁培养：牙髓干细胞被贴附到 🐦 培 🦅 养皿或细胞 🐋 培养板的表面，并与细胞培养基接触。
悬浮培养：牙髓干细胞 🦅 在培养基中悬浮生长，不 🐝 与培养皿表面接触。
