原代 🐘 干细胞提取方法(原 🐠 代干细胞提取方法有哪些)
- 作者: 朱清妤
- 来源: 投稿
- 2025-09-09
1、原代干细胞 🐶 提取方法
原代 🐴 干 🦉 细胞提取 🌳 方法
1. 组织消 🌺 化法
步骤:将组 🐺 织 🦟 切成小 🌴 块。
将组织块消化酶(例如胰酶或胶原 🐼 酶)中,以分解细胞外基质。
用离 🐎 心分离释放的细胞 🐳 。
洗涤 🌾 并浓缩细胞。
2. 免疫磁珠分离法 🐋
原理:利用抗体标记特定 🐈 表面标记,通过磁珠分离靶细 🌹 胞。
步骤:将 🌹 组织解离 🦄 为细胞悬液。
加入标记特定表面标 🐶 记的抗体 🌺 。
加 🐛 入免疫 🦈 磁珠并与抗体细胞复合物结合。
将磁珠细 🐬 胞复合物吸附在磁性柱上。
洗涤柱 🦈 子以去除未结合的细胞。
离心以洗 🐳 脱靶细胞 🌹 。
3. 荧光激 🕸 活 🐯 细胞 🦉 分选 (FACS)
原理:基于细 🕸 胞表面标记、大小和颗粒性等特征,使用荧光标记和激光分选技术对 🦈 细胞进行分 🌿 选。
步骤:将组 🦢 织解离为细 🦉 胞 🐕 悬液。
标记感 🕸 兴趣的细胞亚群(例如,使用 🦢 抗体或染料)。
使用 FACS 分选仪根据荧 🐝 光信号分选细胞。
4. 层析法 🐦
原理:利用 🐋 细胞的物理性质,如,大小和密度在梯度介质中分 🦢 离细胞。
步骤:将组织解离为 🍀 细 🌲 胞 🐈 悬液。
将细胞悬液分层在 🦢 梯 🐒 度介质上。
离 ☘ 心 🐧 梯度介质。
收集位于不同密度 🐠 的 🦊 细胞。
具体方法选 🐬 择取决 🐋 于 🐞 :
组 🍀 织的类型 🌾
目标干 🌴 细胞 🦟 的特性 🌷
所需的纯度和产 🐯 量
2、原代干细 🐶 胞 🐡 提取方法有哪些
原代干细 🍁 胞提 🐒 取 🐡 方法
机 🕊 械 🐯 分离法:
组织切碎:将组织切成小块,然后使用手术刀或剪刀进一步切碎成单细胞 🐝 悬液。
酶解法:使用蛋白酶或胶原酶等酶消化组织,将细胞从细胞外基质中释放出来 🐒 。
离心法:基于细胞密度差的 🐧 离心分离方法,将干细胞从其他细胞类型中分离出来。
免疫磁 🐬 珠分 🐡 离法 🦉 :
利用干细胞表面特异性抗 🐺 原,将免疫磁珠与干细胞结合。
通过磁场作用,将结合免疫磁 🍁 珠的干细 🦍 胞与其他细胞 🦢 分离。
流式 🌻 细胞术分 🦄 选:
使用流式细胞仪,基,于细胞表 🌲 面标记或其他特性将干细胞从异质细胞群中分离出来。
其 🐘 他方法 💐 :
激光捕获微切割:使用激 🐳 光在显 🍀 微镜下 🌷 精确分离单个细胞。
细胞培养:在适 🐦 当的培养条件下,干细胞可能从组 🕸 织中生长出来。
转基因技术:利用转基因小鼠,可,以产生表 🐧 达特定标记基因的干细胞 🐴 从而易于分离。
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3、原代干细胞提取方法是 🦅 什么
原代 🌳 干 🦟 细 🌼 胞提取方法
1. 组织 🐠 块法 🦁
将新鲜组织切成小 🦍 块(12mm3)。
将组织块消化成单细胞悬液 🌷 ,通常使用酶(如胶 🐛 原酶)处理。
离心并洗 🕷 涤细 🌼 胞沉 🐈 淀。
2. 组织消 💮 化法 🐧
将新鲜组织 🐞 切成小片或剪 🐯 成碎末。
将组织与酶 🐕 溶液混合消 🐛 化,释放出细胞。
离心并洗涤细胞沉 🌷 淀。
3. 层粘连 🐯 分离 🦟 法 🐘
将组织接 🐈 种在培养皿中,允许细胞附着形成单层。
用胰 🐟 蛋白酶或其他酶处理,将细胞从培养基 🦟 质中剥离。
离心并洗涤 🌺 细胞沉淀。
4. 流式细 🌲 胞 🐒 术分选
通过 🦅 使用特异性抗体,对细胞悬液进行流式细胞术分选。
分选出 🐺 具有感兴趣的细 🐠 胞表面标志的细胞。
5. 免 🌲 疫磁珠分离
使用与感兴 🌼 趣细胞表面标志结合的免疫 🐡 磁珠。
将免疫磁珠与细胞悬液混合,并将其通 💐 过磁场捕获。
洗 🌳 涤并回收 🐼 捕 🦢 获的细胞。
提 🌸 取后 🌲 处 🌲 理
离心并洗涤细胞 🐡 沉 🐬 淀。
重悬细胞于 💐 培养基 🕸 中 🐋 。
培养细胞以去除污染物(如成纤维细 🐟 胞)。
将干细胞 🐠 用于 🐦 进一 🐟 步的扩增或分化研究。
注意事项原代干细胞的 🐴 提取方法取 🐒 决于组织类型和研究目的 🐘 是什么。
提取过程必须 🕸 仔细执行,以最大程度地减少细胞损伤和污染。
原代干细胞具有有限的增殖潜能,因此重要的是要使用合 🌷 适的方法来扩增和保存它们。
4、原代干细胞提取 🌷 方法视 🕷 频
抱歉,我不方 🌿 便提供原代干细胞 🌷 提取方 🐠 法的视频。该。过程需要由经过培训的专业人员在受控的实验室环境中进行