分离骨髓造血干细胞(从骨髓中分 🐞 离造血干细胞须用什么技术)
- 作者: 杨艺澄
- 来源: 投稿
- 2025-08-04
1、分离 🐡 骨髓造血干细胞
分离骨髓 🐅 造 🐼 血干细胞的过程 🦢
1. 骨髓 🐡 采 🐛 集:
从 🦢 受者的髂骨(髋骨)或胸 🐵 骨 🌴 中抽取骨髓。
2. 骨 🦢 髓 🐟 处 🐬 理:
将采集到 💮 的骨髓与抗凝剂混合,以防止凝结。
过滤骨髓 🐛 以 💮 去除碎骨和细胞 ☘ 碎片。
3. 单 🌴 核细胞分 🕊 离 🐘 :
使用离心机或密度梯度分离方法从骨髓中分离出单核细胞,其中包含 🌹 造血干细胞。
4. 造 🍀 血干 ☘ 细胞富 🪴 集:
使用标记 🐯 抗体(如 CD34)识别和富集造血干细胞。
这些抗体 🦋 附着在造血干细胞的表面,使它们可 🐅 以被磁力激活的细胞分选法(MACS)或流式 🌴 细胞术分选出来。
5. 收 🦋 获:
富集后的造血干细胞从磁珠或 🌿 分选缓冲液中收获 🪴 。
6. 质 🐟 量 🦉 控制:
对收获的造血干细胞进行质 🦉 量控制测试,包括细胞活性 🦅 和 CD34 表 🕷 达水平。
分 🌲 离 🦁 方 🕸 法:
密 🐵 度梯 🦄 度离心法 🌿 :
骨髓与高密度离心介质(如 FicollPaque)混 🌲 合。
单核细胞在介质层界面形成一 🌻 个 🪴 带。
磁力激 🐺 活 🌼 的细胞分 🦅 选(MACS):
造 🐼 血干 🦅 细胞特异性抗体与磁 🐠 性颗粒偶联。
骨 🌳 髓与抗体磁性颗 🐞 粒复合 🦆 物孵育。
磁性颗粒吸附到造血干细胞上,并通过磁场 ☘ 进行分选。
流 🌸 式细 🐝 胞术分选 🦁 :
骨髓用荧光标记的造 🌿 血干细胞特 🐕 异性抗体染色。
细胞 🐟 被流式细胞术仪分选,基于荧 🕊 光标记 🐋 区分造血干细胞。
2、从骨髓中分离造血干细胞须用什么技 🐟 术
密度梯度离 🌷 心 🐴
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3、骨髓中造血 🦆 干细胞分化出各种血细胞
错。“骨髓中造血干细胞分化 🌴 出各种血细胞的祖细胞祖细胞,进而分化为各种血细胞。”
4、分离 🌷 骨 🐝 髓造血干细胞的原理
分离 🐋 骨髓造血干 🐋 细胞的原理 🌿
分离 🕸 骨髓造血干 🌼 细胞 (HSC) 的过程依赖于细胞表面标 🐛 记物,这些标记物区分 HSC 与其他骨髓细胞分离的。原理如下:
1. 单核细 🐳 胞 🐬 分离 🐱 :
骨髓被抽取并用密度梯度离心法 🐡 分离,该方法去除红 🌼 细胞和成熟的粒细胞。
单核 🦈 细 🌾 胞(包含 🐴 HSC)通过梯度收集。
2. 磁性激活 ☘ 细胞 ☘ 分 🕷 选 (MACS):
单核细胞与与 🐟 特定细胞表面标记物(如 CD34)结合的磁性珠子孵育。
磁性珠子结合的细胞被磁性柱吸引 🐋 ,而未结合的细胞流出。
3. 流式 🐋 细 🦋 胞术:
结合磁性珠的细胞被进 🌼 一步分析,以区分 HSC。
使用抗体标记其 🌴 他标记 HSC 物(如 CD38、CD45RA),并将标记的细胞通过流式细胞术分类。
4. 分选策 🕸 略:
通 🕸 常使用以下 🦊 分选策略 🐺 :
CD34+CD38CD123+CD45RA: HSC 的富集群体 🐼
CD34+CD38+CD123+CD45RA: 祖 🐟 细胞 🐘 的 🌿 群体
CD34+CD38+CD123+CD45RA+: 已分化祖细胞 💮 的群 🌵 体 🕸
通过这些步骤,可以从骨髓中有效分 🐴 离分离 HSC。的可以 HSC 用于以下目的:
骨髓移植: 治疗白血病和淋巴瘤 🌸 等恶 🦊 性血液疾病。
再生医学: 修复受 🦢 损组织并治 🐬 疗疾病 🕸 。
研究: 了 🦆 解 HSC 的生 🍀 物学和发挥作用的机制 🌹 。