牙周膜干细胞 🦁 细胞株(牙周 🐋 膜干细胞原代提取)
- 作者: 李皙宁
- 来源: 投稿
- 2025-09-17
1、牙周膜干细胞细 🦢 胞株
牙周膜干 🦍 细胞细胞株
牙周膜干细胞 (PDLC) 是从牙周膜组织中分离的间充质干细胞。它们具有自我更新和分化成牙周组织细胞(如 🐟 牙周韧带成纤维细胞牙、骨质成骨细胞和牙龈上皮细胞的)能。力
特性:多能性:可分化 🕸 为多种牙 🐱 周组织细胞类型。
自我更 🐟 新 🦁 :可长期增殖,保持 🕷 干细胞特性。
免疫调控 🐘 :可抑制免疫反应,促进组织再生。
创伤愈合:参与牙周组 🐴 织的修 🐱 复和再生。
应用:PDLC 细胞株在牙周再生、骨修复和组织工程领域具有广泛 🐼 的应用潜力:
牙周再生:治疗牙周炎造成的组织破坏,促进新的牙周组织形 🍀 成。
骨修复修复:牙槽嵴 🐶 骨缺损,促进 🌿 植入物骨整合。
组织工程:构建牙周组织三维支架,用于替代受损或缺失 🌵 的组织。
药物筛选:用 🐯 于研究牙周疾病的药物治疗策略。
研究挑 🌲 战:
虽然 PDLC 细胞株在再生医学领 🐦 域具有巨大的潜力,但,仍面临一些研究挑战例如:
细胞外基质工程:需要优 🐶 化细 🐱 胞外基质支架的 🐎 设计,以促进细胞的生长和分化。
血管生成:需要发展策略来促进 PDLC 细胞 🐘 株移植部位的血管生成,确保细胞的存活和功能。
免疫排斥:异体 🐴 移植的 PDLC 细胞株可能会引起免疫排斥反应,需要开发免疫抑 🐝 制策略。
“牙周膜干细胞细胞株”代表了 🪴 牙周再生和组织工程领域的宝 🐞 贵工具,为治疗牙周疾病和其他牙科疾病提供了新的治疗选择。
2、牙 🌷 周膜干细胞原 🌹 代提取
牙 🪴 周 🐟 膜 🌼 干细胞原代提取
原理:牙周膜干细胞(PDLSCs)是从牙周膜组织中提取的多能干细胞。原代提取是指从机体中直接分离和培养 🕊 细胞,以。建立新的细胞系
步骤:1. 组 🐒 织获取:
从健康供体或患 🌾 者 🦉 处获得牙周膜 🪴 组织。
牙周膜 🍁 位于牙齿根部和牙槽骨之间。
2. 组 🐒 织 🕸 消化:
使用胶原酶或其他 🐺 消化酶将牙周膜组织分解成单细胞悬液。
3. 单细胞 🪴 培养:
将单细胞悬液转移到含生长因子的培 🐵 养基中,如 α最小必需培养基(αMEM)或杜尔 🌲 伯科氏改良鹰氏 🦍 培养基(DMEM)。
培养基中加入血清,为细 🪴 胞提供营养。
4. 细胞贴 🌷 壁筛 🦊 选:
将细胞培养在组织培 🌷 养皿中 🐡 。
干细胞具有贴壁生长 ☘ 的能 🐈 力 🌲 。
非贴壁细胞(如红细胞)会 🐘 被 🐬 洗掉。
5. 克隆形 🌷 成 🌸 :
将贴壁细胞 🦈 稀释,接种到培养皿中。
细 🐳 胞会增殖并形成克 🐺 隆 🍀 。
克隆包含来 🐠 自单个干 🦢 细胞后代 🌵 的细胞。
6. 克 🦋 隆扩增:
选 🌷 择 🐕 生长快速、形 🍀 态健康的克隆。
将克 🌷 隆细胞转移到新的培养基中,继续 🦁 扩 🦈 增。
7. 表 🐝 型鉴定:
使用 🐦 流式细胞术或免疫荧光染色鉴 🐴 定 🐟 PDLSCs 表型。
PDLSCs 通常表达 MSCA1、CD90 和 🐠 CD105 等 🐵 标志物。
应用:牙周膜干细 🌼 胞原代提取在以下领域 🦁 具有 🦋 应用:
牙周 🐈 组织 🦄 再 🌴 生
骨组织再 🐱 生
神经再 🦋 生
抗衰 🍀 老 🦋 研 🐶 究
药 🍀 物筛 🌴 选 🐎
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3、牙周膜干细 🐱 胞提取方 🌿 法
牙 🌹 周膜干细胞提取 🌸 方 🦋 法
1. 牙龈 🌿 切开 🌷 术 🌲
局部麻醉下切开牙 🐼 龈边缘。
用刮匙取出牙龈 🐘 下 🌸 的牙周膜组织 🦁 。
2. 冠周瓣 🌳 术 🐎
局部麻醉下将 🐞 牙龈从牙齿周围翻转成瓣状。
移开冠 💐 周瓣 🐘 ,暴露出牙周膜组织。
用刮匙收集牙 🕸 周 🌾 膜组织。
3. 经牙 🐕 根尖孔 🕸
通过 🐞 根尖孔 🕷 进入 🌾 牙髓腔。
用刮匙或微针 🐵 采集牙周膜组织。
4. 微 🍀 创 🌸 技术
使用微型仪器通过 🐡 小切口进入牙 💮 周膜区域。
收集少量 🐛 的牙周膜 🌼 组织。
5. 牙齿拔除 🦉
拔 🌺 除牙齿后,从牙 🌺 根表面刮取牙周膜组织。
组织处理收集的牙周膜组织在酶溶 🐕 液中消化以分离细胞。
然后使用细胞表面标记或流式细胞 🐧 仪分选牙周膜干 🪴 细胞。
培养 ☘ 和 🌻 扩增 💮
分选 🦋 出的牙周膜干细胞在特定的培养基中培养。
细胞可以 🦊 在体外扩增以获 🐝 得足够数量用于研究或治疗。
注意:具体提取方法可 🐦 能会根据患者的解剖结构和临床需要 🐧 而有所不同。
所有程序都 🍁 应由有经验且合格的牙科专业人 🦊 员进行。
4、牙周膜干细 🐋 胞原代培养
牙 🐧 周膜干 🐺 细 🌺 胞原代培养
简介牙周膜干细胞(PDLSCs)是一种来源于牙龈组织的成体干细胞。它们具有多向分化潜能,可,以分化 🐬 为 🐘 牙周组织细胞如成纤维 🐟 细胞成、骨细胞。和牙PDLSCs本。质样细胞原代培养是分离和培养以进行体外研究和治疗应用的第一步
材料和方法 💐
获取组织从健康捐 🐱 献者或动物模型中提取牙龈组织。
消化和分离 🌿
使 🍀 用胶原酶和弹 🐶 性蛋白酶消化组织 🦉 ,释放细胞。
通 🐠 过密度梯度离心将 🐧 PDLSCs分离出来。
培养将PDLSCs接种 🦍 在含有血清和生长因子 🍁 的培养基中,如Dulbecco's改良培养基Eagle胎(DMEM)/10%牛血 🐴 清(FBS)。
培养细胞 🐶 ,每23天更换培养基。
鉴定通过免 🐺 疫荧光染色或流式细胞术 🐘 检测成纤维细胞成、骨细胞和牙本质样细胞的标记物,如骨CD44、CD90、STRO1、钙素和胶原I型。
应用原代培养的 🐺 PDLSCs可用于:
组织工程:培养PDLSCs并将其用于再生牙 💮 周组织,如牙龈牙周、韧带和 🕊 牙槽骨。
药物筛选:研究牙周疾病的药物和治 🦉 疗方法的影响。
细胞治疗:在动物模 🐎 型中研究PDLSCs用于牙 🐎 周组织再 🐬 生和修复。
基础研究:了解PDLSCs的生物学特 🐟 性、分化途径和与牙周疾病的相互作用。
优势多向分化潜能:PDLSCs可以分化为多种牙周组织细胞,使它 🐳 们成为牙周组织工程的理想细胞来源。
自更新 🐠 能力:PDLSCs具 🌾 有在体外增殖和自我更新 🐕 的能力。
免疫调节特性:PDLSCs具有免疫调节特 🐦 性,使 🦁 其在组织移植中 🦊 更具优势。
局限性异质性:PDLSCs是 🐈 一个异质性细胞群,具有不同的分化潜力。
培养条件:PDLSCs的生长和分化受培 🦆 养条件的影响,如培养基 🦈 成分和生长因子。
衰老:与其他成体干细胞类似,PDLSCs在原代培养 🦟 中具 🐕 有有限的增殖 🦅 能力。