干 🌲 细胞制备国家标准（干细胞制剂制备与质检行业标准(试行)）

1、干细胞制备 🐬 国家标准

干细 🦢 胞制备 🦅 国 🕸 家标准

GB/T

本标准规定了人干细胞制备的一般要求、专、用、术、语、和定义质量控制制备方法储存运输和使用 🐅 。

本标准适用于各 🦟 种 🦆 人干细胞的制备，包括胚胎干细胞 🌹 、诱、导多能干细胞成体干细胞和间充质干细胞。

2 规 🕊 范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，其随后所有修改单不（包括勘误的内容）或，修 🕸 。订，版。均不适用于本文件鼓励各方研究是否可以使用这些文件的最新版 🦍 本凡是不注日期的引用文件其最新版本适用于本文件

GB 无菌产品生 🕸 产质量管理规范

GB/T 生物 ☘ 样 🦄 本资源库规范

GB/T 洁净室分类与净化净化效率 🐶 评价标准

GB/T 一次性 🐶 使用小 🐡 容量塑料容器

GB/T 一次性使用小容量玻璃容 🐳 器

GB/T 病理切片 🌾 标本显微 🐘 镜检查技术规 🌵 范

3 术 💐 语和定义 🐵

3.1 干 🦢 细胞 🦊

具有自我更新和 🐡 多向分化潜能的未分化细胞。

3.2 胚胎干 🐱 细胞 🐦

从早期胚胎胚（泡）中分离获得的干细胞，具有无限制的自我更新能力和分 🦆 化成所有胚层细 🐛 胞的潜 🦈 能。

3.3 诱 🐒 导多 🕊 能干细胞 🌴 (iPSC)

通过对成体细胞进行基因重编程，获得具有与 🐟 胚胎干细胞相 🌹 似的自 🐡 我更新能力和多向分化潜能的干细胞。

3.4 成 🌼 体 🌷 干细胞

存在于特定组织 🌼 或器官中的具有自我更新能力和向其所属组织或器官分化潜能的干细胞。

3.5 间充 🌲 质 🐟 干细胞 (MSC)

存在于骨髓、脂、肪组织脐带血等中，具有多向分 🦁 化潜能的成体干细胞 🌸 。

3.6 质 🪴 量控 🦈 制 🕸

为确保干细胞制备质量而 🪴 进 🌷 行的检查、试验和程序的统称。

3.7 污 🍀 染 🌵

由外 🪴 来微生物或异物引起的细胞或培养基的非预期改变。

4 一 🐳 般要 🌲 求 🐎

4.1 伦理 🐞 要 🌲 求 🐝

干细胞制备应符合国家 🐅 有关伦 🌲 理规范和法律法规。

4.2 生 🐎 产场 🦋 所 🐦

干 🌹 细 🦋 胞制备 🍁 应在符合 GB 18918 要求的无菌生产场所进行。

4.3 生 🐈 产 🦉 环境 🦊

干细胞制备场所应采用相 🐡 应级别的洁净室，并符合的 GB/T 22752 要求。

4.4 设备 🦢 和材 🍁 料 🐧

用于干细胞制备的设备和材料应具有良好的生物相 🌾 容性，并经过验证符合预期用途。

4.5 人 🦟 员 🌷

参与干细胞制备的人 🐠 员应经过专业培训，熟练掌握干细胞制备技 🕸 术。

5 质 🌷 量控 🌼 制 🌿

5.1 无 🐕 菌检 🐱 测 🐘

干 🐋 细胞应进行无菌检测，以确保 🐬 无微生物污染。

5.2 细胞形 🐧 态和活力 🕸 检测

干细胞应进行形态 🐴 学和活力检测，以评估细胞的形态特征和活性。

5.3 分化潜 🪴 能检 🕷 测

干细 🌴 胞应进行分化潜能检测，以验证其向预期细胞类型的分化能 🌲 力。

5.4 遗传 🐺 稳 🐛 定性检 🐝 测

干细胞应进行遗传稳定性检测，以评 🍁 估其染色体数目和结构的稳定性。

5.5 污 🐧 染物检测

干细胞制备过程中应进行污染物 🐎 检测，以排除潜在的污 🌷 染物。

6 制备 🦄 方 🐅 法 🐧

6.1 胚胎干细 🐳 胞制备 🌲

胚胎干细胞制备应按照严格的伦理规范和技 🦢 术流程进行，避免对胚胎进行破坏。

6.2 诱 🐯 导多能干 🐝 细胞制备

诱导多能干细胞制备应采用安全有效的基因重编 🌼 程方法，并确保重编程后的细胞具有 🦈 胚胎干细胞的特征。

6.3 成体干细 🦊 胞 🐴 制备

成体干 🕷 细胞制备应根据来源组织或器官的类型采用合适的提取和培养方法。

6.4 间充质干细胞 🕸 制 🍁 备

间充质干细胞制备应 🕷 采用标准的骨髓或脂肪组织分离和培 🦈 养技术，并进 💐 行表面标志的鉴定。

7.1 储存 🦊 条件

干细胞应储 🌸 存在符合其生物学特性需 ☘ 求的 💐 低温条件下，以保持其活力和分化潜能。

7.2 储存 🦁 容器

干细胞储存应使用经过验证的细胞储存 🌺 容器 🌺 ，以确保细胞的稳 🐟 定性和安全性。

8.1 包装 🐈

干细 🌼 胞运输应采用符合其储存条件要求的包装 💮 材料。

8.2 运 🌼 送

干细胞运送应使用经过验证的运输方 🐒 式，以确保细胞的稳 🦆 定性和安 🌼 全性。

9.1 临 🐺 床应 🦄 用

干细 🐟 胞临床应用应符合相关法 🐛 规和 🌾 指南，并经过严格的伦理审查和科学验证。

9.2 研 🌿 究 🦉 用 🦅 途

干细胞研究用 🐎 途应遵守相关伦理规范和 🐎 科学研究 🐱 规范。

10 标 🐎 志和标 🦊 签 ☘

10.1 标 🐟 志 🌴

干细胞制备单位的标志应包括产品名称、批、号、生产、日、期 🌷 、有、效期储存条件使用期限数量制造商名称和地址等信息。

10.2 标签 🐯

干细胞制备单位的标签应包括产品名 🐼 称、批、号、生产、日、期、有、效期储存条件使用期限数量制造商 🐳 名称和地址等 🐼 信息。

附录 A (规范性附 🌻 录) 质量控制项目和方法

2、干细 🐴 胞制剂制备与质检行业标准(试行)

干 🌲 细胞制剂制备与质检行业标准（试行）

本标准规定了干细胞制剂研制、生、产质检和临床应用的安 💮 全性和有效性要求。

二、规范 💐 性 🐴 引用 🐡 文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，其随后所有修改单不（包括勘误的内容）或，修 🦄 。订，版。均不适用于本文件鼓励根据本文件进行协议的各方研究是否适用于下列 🦟 文件的最新版本未注日期的引用文 🐎 件其最新版本适用于本文件

GB/T /ISO 9001:2015 质 量管 🐴 理体 🌸 系要求

YY/T 生物 ☘ 安 🌼 全 🐴 柜

GB/T 细胞 🍀 库 🦉 操作规范 🌲

三 🦍 、术 🐎 语和定义

3.1 干 🦉 细 🦈 胞 🕸

具有自我更新和分化潜 🐡 能 🐕 的原始细胞。

3.2 干 🐴 细 🌻 胞 🐯 制剂

使用体外或体外培养的人或动物干细胞制备 🐅 的用于治疗 🌵 或研究的成品。

3.3 质 🌾 检 🕊

对干细胞制剂 🦅 进行 🐎 的检查、试验和评价，以确 🌳 保其符合既定标准。

3.4 分 🐟 离 🐎

从组织或器官中 🌹 提取干细胞的过程。

3.5 培 🦍 养 🕊

将干细胞接种 🌴 到培养基中，提，供适宜的生长条件使其增殖和 🦅 分化。

3.6 冷 🦈 冻 🦁

将干细胞在低温下保 🌷 存的 🦅 过程。

3.7 复 🕸 苏

将冷冻的干细胞恢复到培养状态的 🐺 过程。

四、干细胞制剂研制 🌷

4.1 干细胞制剂的研制 🕷 应在符合质量管理体系要求的环境中进行 🌳 。

4.2 干细胞制剂的研 🍀 制应有明确的目的和科学依据，并符 🦍 合伦理规范。

4.3 干细胞制剂的研 🦁 制应制定详细的制备方案，包括干 🐯 细胞 🐵 来源、分、离方、法培养条件质量检测指标等。

五、干细 🦆 胞制剂 🐋 生产 🌷

5.1 干细胞 🐵 制剂的生产应 🕊 在符合无菌和生物安全条件的环境中进行。

5.2 干细 🕷 胞制 🦉 剂的生产应使 🍁 用合格的原料和材料。

5.3 干细胞制剂的生产应按照既定的制备 🦟 方案进行，并严格控制培养条 🐡 件和质量检测。

5.4 干 🐶 细胞制剂生产过程中应建立良好的生产记录，包括生产日期生产、批、号、原 🍁 、料来源生产人员质检结果等。

六、干细胞制剂质检 🦅

6.1 干细胞制剂的质检应按 🦄 照既定的质检标准进行，包括细胞形态学检测细胞、表、面标、志检测细胞、增、殖能力检测细胞分化潜能检测微生物检测无热 🍀 源检测等。

6.2 干细胞制剂的 🌷 质检结果应符合既定的标准。

6.3 干 🐒 细胞制剂的质检报告 🐴 应包括质检项目、结、果质检人员和质检日期等。

七、干细胞制剂 🌴 临床应 🌻 用 🐠

7.1 干细胞制剂临床 💐 应用应在符合相关法规和伦理规范的前提下进行。

7.2 干细胞制剂临床应用应 🌷 根 🐒 据既定的临 🐬 床方案进行。

7.3 干细 🦋 胞制剂临床应用过程中应密切监测患者的 🌷 安全性和有效性。

7.4 干细胞制剂临床应用应建立良 🦅 好的 🐴 临床记录，包括患者信息用、药、情、况疗效评价 🦢 不良事件报告等。

本标准由中华人民共 🦋 和国国家卫生 🐞 健康委员会组织制定 🌷 。

3、干 🕸 细胞制备国 🌻 家标准是什么

国 🐘 家干细胞 🌷 制备技术 🐟 规范 (GB/T )

1. 范 🕸 围 🐼

本规范规定了干细胞制备工艺的关键工艺参数 🍀 、操、作步骤质 🐘 量控制要求和相关术语本规范。适、用、于。科研机构医疗机构干细胞库等从事干细胞制 🌺 备的单位

2. 术 🦁 语 🌴 和 🌼 定义

干 🐵 细 🌹 胞：具有自 🕊 我更新和多向分化潜能的细胞。

干细胞制备 🐒 ：将干细胞从来源组织中分离、培养和扩增的过程。

来源组织：干细胞的原始 🐘 组织来源，如骨髓、脐、带血羊水等。

传代：干细胞经 💮 分离、培养和扩增后的细胞代数增加 🐬 过 🐞 程。

分离：将干细 🐠 胞从来源组织中去除杂质 🦄 细胞 🌳 的过程。

培养：在定 🐺 义的培养基和培养条件下维持干细胞生长和增殖 🐎 的过程。

扩增：通过细 🕊 胞分裂增加干细胞数量 💐 的过程。

3. 工 🐝 艺 🦄 参数

3.1 分 🐱 离 🌳

分离方法：密度梯度离心 🦉 、免 🕸 、疫磁珠分选流 🌿 式分选等。

分 🐺 离纯 🐬 度 🐝 ：≥90%

细 🐒 胞活力 🐵 ：≥80%

3.2 培 🦉 养 🐛

培养基：含 🐴 血清、生长因子等成分的无 🕊 血清培养基或血清培养基。

培 🕸 养条 🕊 件 🐺 ：37℃，5% CO2。

培养 🐵 周期：根据干 🌵 细 🐎 胞类型而定。

3.3 扩增 🦍

扩 🐱 增倍数 🐬 倍：≥10

扩增速度 🐯 ：根据 🦟 干细 🌺 胞类型而定。

扩增 🌺 过程中细 🦢 胞活 🐒 力维持在≥80%。

4. 质 🐈 量 🦉 控制 🕊

4.1 无 💮 菌检测 🐅

培 🐘 养 🌲 基 🐺 ：无菌

细胞悬 🕷 液 🐵 ：无菌 🕊

4.2 细胞特异性标记检测 💐

干细胞特异 🐦 性表面标记：阳性

杂 🐬 质细胞特异性表 🌴 面标记：阴性

4.3 细胞形 🌿 态学 🦁 检测

细胞形态 🦋 符合干细胞特征

细胞 🍁 无异 🐧 常 🦢 形态

4.4 细 🐱 胞增殖能力检测

细胞增殖速率：符合 🐵 干细 🐴 胞特征

细 🐅 胞传代数 🐶 代：≥20

4.5 细胞分化能力检测 🌷

多向分化潜能：根据干细 🌲 胞类 🍁 型 🐱 而定

分化方 🐞 向明确分化，效率高

5. 标 🌸 识 🐕 和追溯

干细胞制备记录：应包含来源组织 🦍 、分 🌹 、离、方 🐦 法培养条件扩增倍数等信息。

干细胞标签：应包含 🐎 干细胞类型、来、源、组织制备日期 🌹 批号等信息。

追 🌷 溯体系：应建立追溯体系，确保 🐋 干细胞从来源组织到最终使用的全过程可追溯。

4、干细胞制备国家标准规范 🐠

干细胞制备国家标 🦆 准规范

建立干细胞制备的国家标准规范，确 🐛 保干细胞制备过程的安全规范、和，有效性 🦄 为干细胞临床研 🐳 究和应用提供技术保障。

本规范适用于人类胚胎干细胞、诱、导、多能干细胞间充质干细胞脂肪 🌾 来源干细胞等干细胞的制备过 💮 程。

干细胞 🌵 ：具有自我更新和多 🍀 向分 🦟 化潜能的细胞。

干细胞制备：从供体组织或体液中分离、培养和保存干细胞的 🌷 过程。

术语 💮 和缩写

GMP：药品生产质量 🌺 管理 🕷 规 🦈 范

SOP：标 🐝 准操作规 🌾 程 🐎

QC：质量控制 🌼

QA：质 🐯 量保 🐦 证

1. 设 🦢 施 🌷 和设备 🌵

制备设施应符 🦊 合GMP要求，包括无菌 🐦 环境、温、控系统通风 🐟 系统等。

设备应经过 🐶 验 🌸 证和校准，确保其精度和可靠性。

2. 原材料和试剂 🌺

供体组织或体液 🦆 应来自合格的捐献者，并进行 🦍 严格的筛选和 🦅 检测。

试 🐱 剂和培养基应符合GMP要求，并经过 🐕 验证。

3. 分离和 💮 培养 🐡

干细胞分离方法 🐡 应 🦍 得到优化和验证，以 🐡 确保细胞的纯度和活力。

培养条件应根据不同干细胞类型的要求进行优 🕸 化，并定期监测和记录。

4. 保 🌾 存 🌸

干细胞可 🐼 采用冷冻或其他方式保存保存方 🐴 ，法 🐳 应经过验证。

保存期间 🐳 应定期 🌻 监测细胞的活力和状态。

5. 质量 🐝 控 🦟 制 🌹

建立完 🪴 善的质量控制体系，对制 🐝 备过程中的原料、设备、环境和产品进行严格的检测 🐧 。

检测 🦍 项 🐯 目包括细 🐬 胞纯度、活、力、基因稳定性分化潜能等。

6. 质 🌺 量 🦈 保证

建立质 🦉 量保证体系，确保制备过程符合 🐴 GMP要 💐 求。

定期进行 🦊 内 🐱 部审计和外部评估，持续改进制备流程。

7. 文 🌹 件管 🐈 理 🐬

建立全面的文件 💮 管理体系，包括SOP、记、录报告和数据分析。

所有文件应 🐱 准确、清晰 🕷 和可 🐈 追溯。

8. 人员 🌺 培 🐼 训 🐳

对参与干细胞制 ☘ 备人员进行全面培训，使其掌握GMP要求和制备技术。

定期考核 🍀 人员的知 🌹 识 🍀 和技能。

9. 追溯 🐅 和 🐶 可追溯性

建立完善的追溯和可追溯 🕸 性系统，跟踪干细胞从供体到临床应用的整个过程。

所有相关信息应清晰 🐧 可 🕸 查。

10. 伦理 🦍 审查

干细胞制备应符合相关伦理 🍁 准则和法规，并经过伦理委员会批准。

捐献者应 🐬 在知情同意书上签 💐 字。

本规范 🦆 由国家标准化管理委员 🦅 会发布。

本规范自 🐵 发布之日起实施。

相关单位和个人应严格遵守本规范规 🕸 范，干细胞制备活 🐡 动。