尿提取干细胞的方法(尿液提取干 🐈 细 💮 胞 诺贝尔奖)
- 作者: 张逸橙
- 来源: 投稿
- 2025-04-11
1、尿提 🦋 取干细胞的 🐒 方法
尿液中提取干 🦄 细胞 🕊 的方法
1. 收集 🦁 尿液 🌸
收集新鲜、无菌 🐞 的中段尿 🐳 液。
排除湍流和初 🌵 始部分。
2. 离心 🐳 分离 🌷
以 2,000 x g 离心尿液 10 分 🦍 钟 🐒 。
收集沉淀物(细胞 🐼 部分)。
3. 洗涤沉 🐎 淀物
用磷酸盐缓冲液 (PBS) 洗涤沉淀物 🦈 至少 🐬 两次。
离心并丢弃上 🐞 清 🦁 液 🦋 。
4. 消化沉淀物 🦄
使用 ☘ 胶原酶或胰蛋白酶消化 🐒 沉淀物 3060 分钟 🐬 。
孵育温度 🕸 为 37°C,加入 FBS 以抑制消化。
5. 离心分离 🌿 并收集细胞
以 1,500 x g 离心 10 分 🐱 钟。
收集细胞 🐬 并用 💐 PBS 洗涤三次。
6. 干 🦈 细胞 🐺 鉴定 🦍
使用流式 🐺 细 🦈 胞术或免疫细胞化学技术鉴定干细胞,如:
CD34(造血干细 🐟 胞 💮 标志物)
CD133(神经干 🌻 细 🦋 胞 🌺 标志物)
SSEA1(胚胎干 🐒 细 🌲 胞标志 🪴 物)
7. 培 🌻 养干细 🐞 胞
将干细 🍀 胞接种到合适 🪴 的培养基中。
提供生长因子和其他必要的条件,促进干细胞生 🕸 长和 ☘ 分化。
注意:该协议是通用的,具体步骤可能根据所收集的尿液类型和目标干细胞类 🐯 型而有所不同。
强烈建议在 🐱 训 🦍 练有素的专业人员的 🦅 指导下进行该程序。
2、尿液提取干细 🐝 胞 诺贝尔奖
语句不 ☘ 正 🌷 确。
诺贝尔奖没有授予“尿液提取干细 🦈 胞”这一发现。
.jpg)
3、尿提取干细胞的 🌵 方法有几种
尿液中提 🌷 取干细胞的方法:
1. 低速离 🕊 心法 🐎 :
将新鲜尿液 🌴 离心,去除 🐡 细胞碎片和杂质。
收集沉 🌷 淀物,即含干细 🌾 胞的尿液细 🍀 胞。
2. 密 🐝 度梯度离心 🦅 法:
将新鲜尿 🐅 液与密度梯度介质(如Percoll或Ficoll)混合 🍀 。
离心后 🐒 ,干细胞会聚集在不同的 🐕 密度梯 🌾 度层中。
收集 🌺 含干 🐋 细胞的 🐡 层。
3. 磁 🐈 珠分离法:
使用针对特定干细胞表 🐘 面标 🐱 志物 🐅 的磁珠。
将磁珠与尿液孵育,干 🦅 细 🦋 胞会结合到 🐼 磁珠上。
使用磁性分离架 🪴 ,将结合了干细胞的磁珠 🐶 分离 🐠 出来。
4. 免疫亲和层 🐘 析法 ☘ :
使用固定 🐅 在层析柱上的抗体,该抗体能特 🐅 异性结合干细胞表面标志物。
将 🐵 尿液通过层析柱,干细胞会结 💐 合到抗体上。
洗脱层析柱 🦈 ,收 🐒 集结合的 🐵 干细胞。
5. 流式细 🌺 胞术分选法:
使用流式细 🐕 胞仪,基于干细胞表面标志物的表达对细胞进行分选 🦉 。
用激光照 🌲 射细胞,检测特定标志物的荧光。
分选器 🐬 会根据荧光强度自动分选出干细胞。
4、尿提取干细胞的方法 🦅 有哪 🦊 些
尿液提取干 🌴 细胞的方法
1. 离 🕊 心法
收集尿液并进行离心,将细胞 🪴 沉淀收集在离心管底部。
培养沉淀物以去除上皮细胞 🪴 和红细胞。
用抗体标记 🐼 目标干细胞,并通过细胞分选 🦢 进行分 🦍 离。
2. 免疫 🦈 磁珠法
将抗体附 🐝 着在磁珠上,这些抗体会特异性地识别目标干细胞表面的分子标志。
将尿液与磁珠混合并孵育,让 🌻 干细胞与磁珠 🐛 结 🦉 合。
用磁铁分离磁珠和 🐡 干细胞。
3. 微 🐛 流控芯 🌸 片法
使用 🐧 微流 🕸 控芯片设计特定通道和滤膜使,干细胞通过而杂质被去除。
将尿液通过 🦋 芯片 🕷 ,目 🐘 标干细胞将被收集在芯片末端。
4. 层 🦍 析法
使用大小或 🦊 亲和力不同的载体来分 🐬 离干细胞。
尿液通过载体,不同类型的细胞分馏至不同的组分 🦅 中。
收集目标 🌾 干细胞所在的组 🦋 分。
5. 培 🐺 养 🦟 法 🐞
将尿液在含有特 🌹 定生长因子 🍀 的培 🦅 养基中培养。
目标干 🐛 细胞会增殖并形成集落,可以从 💐 培养物中分离出 🐒 来。
6. 组 🦊 合方 🐘 法 🌲
为了提高纯度和产量,可 🐳 以将多种方 🐺 法组合使用。
例如,离,心 🦉 法可用 🐯 于预富集细胞然后使用免疫磁珠法进行进一步的分离。