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干细胞流式鉴 🐕 定标准(造血干细胞流式检测结果分析)

  • 作者: 胡安柚
  • 来源: 投稿
  • 2025-04-18


1、干细胞 🕊 流式鉴定标准

干细胞 🐬 流式鉴定标准

表型标记

💐 🐕 胎干细 🌳 胞 (hESC):SSEA4+、Tra160+、Tra181+、Oct4+、Nanog+、Sox2+

人诱导多能干 🦊 细胞 (hiPSC):SSEA4+、Tra160+、Tra181+、Oct4+、Nanog+、Sox2+、Alkaline phosphatase (ALP)+

间充质干 🐵 细胞 (MSC):CD73+、CD90+、CD105+、CD44+、CD14、CD45

神经 🦢 干细胞 (NSC):Nestin+、Sox2+、Ki67+、CD133+(可选)

造血干 🐋 细胞 🐳 (HSC):CD34+、CD38、CD133+、CD117+(ckit)、Lin(包括 CD19、CD3、CD14、CD15、CD16、CD66b)

血管内 🌴 皮干细 🐋 胞 (AEC):CD31+、CD133+、VEGFR2+、CD45

🐬 🕊 干细 🐶 胞 (ADC):CD34+、CD45、CD31、CD146+、CD105+、CD166+

软骨 🐋 干细 🦈 胞 (ChC):CD34+、CD45、CD146+、Collagen II+

💐 能性标准

分化潜能:干细胞应能 🦋 够分化为多个胚层谱系,例如内胚层、中胚层和外胚层。

自我更新:干细胞应能够长期增殖,同时保持其多 🐛 能性。

克隆形成:干细胞应能 🐞 够生 🌺 成同质细胞群的 🦟 克隆。

排他性标 🍁

hESC 和 hiPSC:AFP、CK7(上皮细胞标 🦆 记)

MSC:CD31、CD45(造 🍀 血细胞标记),CD19、CD3(淋)巴细胞标记

NSC:GFAP(星形胶质细胞标记),GalC(少)突胶质 💮 细胞标 🐕

HSC:MyD88、CD150(单 🌼 核细胞 🦅 /巨 🦆 噬细胞标记)

AEC:vWF(内皮 🐵 细胞 🌵 🐡 熟标记)

其他考 🦄 🌺 因素

样品制备样品制备:方法对流式鉴定结果有重大影响,例如细胞分散、抗 🕸 体结合和死细胞排除。

抗体选择选择:具有高 🐧 特异性和灵敏度 🌺 的抗体至关重要。

门控策略:建立适当的门控策略对于区分目标 🐼 细胞群与背景噪 🐺 音非 🌼 常重要。

定量分析定量分析:方 🐺 法,例如MFI(平均荧光强度)或 🐳 ,几何平均值可用于比较不同细胞群之间的表面标记表达水平。

2、造血干 🦢 细胞流式检测 🐺 结果分析

造血干细胞流式检 🐼 测结果分 🌿 🕷

造血干细胞 (HSC) 流式细胞术是一种用于分析造血干细胞群的强大 🐡 技术。此技术使用 💮 荧光标记抗体 🦅 来识别细胞表面的特定蛋白,从。而能够表征细胞群并分离特定的细胞亚群

分析步骤

1. 数 🌻 据采 🐝 🐝 :

用荧光标记 🦍 抗体对细胞样本进行染色。

使 🐞 用流式细胞仪 🌷 采集 🦉 数据。

2. 数据 🐠 🌳 析:

门控: 根据细胞大小和颗粒性(前向散射和侧向散射)参数 🐶 对细胞进行选择,以去除碎屑和双重事件。

识别细胞亚群: 使用抗体标 🐝 记来识别感兴 🦈 趣的细胞 🐧 亚群,例如共同淋巴祖细胞 (CLP) 和造血干祖细胞 (HSC)。

统计分析计: 算细胞亚群的百分比、平均荧光强度 (MFI) 和细胞数 🐠 量。

关键标记

用于识别 HSC 和其他造 🌵 血细胞亚群的关键流式细胞术标记包括:

Lin: 用于排除成熟的髓 🦍 系和淋巴系细 🦊 胞(例 🐡 如 CD3、CD19、CD11b、Ter119)。

Sca1: 小 🐞 鼠 HSC 的表 🕷 🐝 标记。

cKit (CD117): HSC 和其他造血祖细胞的表面 🐺 标记。

Flk2 (Flt3): 原始和早期祖细胞的表面标 🦄 记。

CD34: 早期造血祖细胞的 🐝 表面标 🦢 记。

结果解释

流式细胞术结 🐠 果提供了有关样本中 HSC 和其他细胞亚群的信息。

细胞亚群百分比: 表示特定细胞亚群在 🌴 总细胞群中所 🐦 占的比例。

平均荧光强度: 反 🌿 映细胞亚群内特定 🌿 标记 🦟 的表达水平。

细胞数量: 提 🦉 供细胞亚群的绝对 🐛 数量。

这些结果可用于表征造血干细胞群,比,较不同 🌲 样本之间的差异 🐬 并追 🐦 踪治疗或疾病进展。

局限性

流式细胞术分析存在一 🐵 些局限性,包括:

非特异性染色: 抗体 🕸 可能与除目标蛋白之外的其它蛋白发生非特异性反 🍁 应。

补偿问题 🐛 : 多个荧光标记会产生补偿问题,这可能影响标 🌷 记物之 🌴 间的区分。

样本准备样本准备: 方 🐒 法可能会影响流式细胞术结果。

结论

造血干细胞流式检测结果分析是一种 🦉 强大的工具,可用于表征和分离造血干细胞群。通,过仔细 🐎 分析数据研究人员可以获 🌺 取有关和 HSC 相,关细胞。亚群的有价值的信息从而促进造血系统研究和治疗

3、干 🦊 细胞流式鉴定标准是什么

干细 🌼 胞流式鉴定标准 🦟

流式细胞术用于 🐦 识别和表征干细胞,主要基于细胞表面标志物的表达模式。常见的鉴定标准包括:

造血干 🕊 🐟 🦢 (HSC)

🐠 性: CD34、CD45、CD135

🐘 💐 : CD3、CD19、CD20、CD56

间充 🕸 质干细胞 🐎 (MSC)

🍁 🐶 : CD44、CD73、CD90、CD105

🐅 🐛 : CD34、CD45、CD31、CD14、CD19、CD56

🐡 🐋 干细胞 🐬 (ESC)

🌴 性: 表面抗原 SSEA1、SSEA3、SSEA4

🐠 🌼 : OCT4、SOX2、NANOG

诱导 🐼 多能 🕸 🦈 细胞 (iPSC)

🕸 性: 表 🦋 🌷 抗原 TRA160、TRA181、Nanog、OCT4、SSEA4

💐 : CD34、CD45

其他干 🐯 细胞类型

神经 🐶 🐳 细胞: Nestin、SOX2

骨髓基 🦊 质细 🐘 🐟 : CD44、CD271 (NGFR)

脂肪源性 🦆 干细胞 🐺 : CD44、CD34、CD105

🐕 🐺 事项:

不同组织和发育阶段的干细胞可能 🦢 具有一些独特标志物。

使用多个表 🌸 面标志物进行组合分析以提高特异性。

考虑细胞的散射和自体荧光 🐯 等物理参数。

流式鉴定通常需 🐡 要与其他技术(例如功能测定)相 🌹 结合,以全面表征干细胞特性。

4、干细 🦉 胞流式鉴定 🌼 标准最新

🦈 🦁 胞流式鉴定 🐡 标准

🌵 、人胚 🦄 胎干细胞 🐺 (hESC)

SSEA4+ (阶段 🐘 特异性胚胎抗 🌳 原 4)

TRA160+ (CD105)

TRA181+ (CD147)

OCT4+ (八聚体结合转录因 🐬 子 4)

Sox2+ (SRYbox 2)

Nanog+ (同源异 🐱 型盒 E)

🍁 、人诱导 🐛 🐅 能干细胞 (hiPSC)

SSEA4+

TRA160+

TRA181+

OCT4+

Sox2+

Klf4+ (克鲁伯 🪴 皮特斯 🍁 🌻 子 4)

cMyc+ (黏液 🐺 瘤病 🕷 毒癌基因家族成员)

三、间充质 🐈 🌵 细胞 🌵 (MSC)

CD73+

CD90+

CD105+

CD166+

отрицательный CD34 (CD34 阴 🐵 🐬 )

отрицательный CD45 (CD45 阴 🦢 🐕 )

四、神 🌿 经干细胞 (NSC)

CD133+

Nestin+

Musashi1+

GFAP+ (胶质纤维 💐 🐈 🐡 蛋白)

五、造 🐞 血干细胞 (HSC)

CD34+

CD38 (CD38 阴 🌺 🐋 )

CD45RA (CD45RA 阴 🦍 🐼 )

CD90+

CD117+ (cKit)

六、祖 🌸 细胞 🐠

CD34+

CD38+

CD45RA+ (CD45RA 阳 🐠 🐘 )

CD90

CD117

七、淋巴造血 🌵 干细胞 (LHSC)

CD34+

CD38+

CD117+

Sca1+ (干 🌾 细胞抗原 🦋 1)

八、髓 🍁 系祖 🐧 细胞 (GMP)

CD34+

CD38+

CD117

CD16+

🐵 、红系祖细胞 (EryP)

CD34+

CD38+

CD117

CD71+

十、巨 🐬 🦟 细胞祖细胞 (MMDP)

CD34+

CD38+

CD117+

CD14+

注意事 🐠 🐞

这些标准仅作为参考,不同实验条件和抗体来源可能会 🐕 有所不 🐴 🌿

干细胞鉴定应结合多 🌻 种标记和功能测定。

通过流式细胞术对细胞进行 🦢 评分时 🕊 ,建议使用适当的对照和阳性标记(如细胞系)。

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