外周干细胞怎么计数（外周干细胞计数单个核细 🌸 胞）
- 作者: 陈若兮
- 来源: 投稿
- 2025-10-07
1、外周干细胞 🐋 怎么计数
外周血干细 🐟 胞（PBSC）计数 🦅 方法 🦈
1. 流式细胞术计 🐯 数 🌷
最常用的方法 🌸 ，使用抗体标记造血干细胞 🦢 （HSC）特（异 🐯 性表面标志物如CD34、CD133）
通过流式细胞仪测 🐠 量阳性细胞数量
2. 细胞形态学计 🐛 数
在显微镜 🌿 下识别和计数具有特 🐅 定形态特征的干细胞 🍁
耗时且 🐈 主观，需要经过训练的技师 🌻
3. 克隆形 🐼 成单元（CFU）检 ☘ 出试验
检测造血干细胞的克隆 🌹 生长能力
将外周血样培养在培养基中，形成克隆 🐦
克隆数量代表干细 🐶 胞数量
4. 限制 🌾 性稀释 🌳 分析（LDA）
确 🐋 定单个细胞的干 🕷 细 🌺 胞潜能
将单个细胞 🌵 接种到培养基中，观察克隆 🌼 形成
克 🐘 隆形成频率代表 🦟 干细 🌾 胞频率
5. 定量实时 🐯 聚合酶链 🐱 反应（qPCR）
检测 🐅 造血 🐱 干细胞特异性转录因子（如OCT4、NANOG）的 🍀 mRNA表达水平
mRNA表 🐠 达水平与干 🌳 细胞 🐕 数量相关
6. Xenograft移植 🐠
将 🦁 外周血样 🕊 本移植到免疫缺陷小鼠中
观察人造 🐘 血干细胞的重建 🦋 情 🦋 况
重建 🐦 程度 🐯 代表干细胞数 🐋 量
具体步 🐵 骤：
1. 采集外 🐬 周血样本：通过静 🦈 脉采血或白细胞分 🐯 离术（WBC）收集。
2. 细胞制备：将血液样品用密度梯度离 🌸 心或红细胞裂解液处 🐈 理，分离出单核细胞 🐛 。
3. 标记：使用 🐴 抗体标记造血干细胞表面标志物 🌿 。
4. 计数 🌿 ：使用流式细胞术、形态学或其 🌹 他方法计数阳性细胞或克隆。
注 🌳 意 🐛 事 💐 项：
不同方法的灵敏度和 🦁 特异性可能不同。
外周 🌵 血干细胞数量受多种因素影响，如年龄、健康状况和疾病状态。
计数结果应 🐝 由经验丰富的临床医生解释，并 🦍 结合患者的病史和其他检查结果。
2、外周干细 🌳 胞计数单个核细胞
外周血单个核 🌴 细 🌳 胞计数
外周血单个核细胞计数是指在每微升外周血中计算单核细胞的数量。它通常作为全血细胞计数的一部 🌷 分进行，用。于评估血液中的白细胞成分
什 🐝 么是单核细胞 🦍 ？
单 🌷 核细胞是一种大型白细胞，具有单一的大核。它，们，在。骨，髓。中产生并在血液中循环在需要时迁移到组织中单核细胞可以分化为巨噬细胞和树突状细胞这是免疫系统中重要的免疫细胞
单核 🐬 细胞 🌿 计数的意义 🐞
单 🌼 核细胞计数升高可能 🐛 表明：
感染（例如单核细 🐅 胞增多症、艾滋病）
炎症（例 🐠 如 ☘ 自身 🐦 免疫疾病、类风湿性关节炎）
血液系统疾病 🌴 （例 🌵 如白血病 🦄 ）
脾脏肿 🕸 大
单核细胞计数降低可能 💮 表明 💐 ：
出血免 🕷 疫抑制（例如类固醇）
营 🦅 养不良
一般参考 🦢 范围
正常外周血单个核细胞计数范围 🦢 为：
成年人 🦢 ：300900 个/μL
儿 🐅 童： 个/μL
其他 🐞 重要信息
单核细胞计数可能会受到某些药物（例如 🌷 类固醇）和（治）疗例如化疗的影响 🌺 。
重要的是要记住，单，核细胞计数只是全血细 🐎 胞计数的一部分应结合其他 🐠 指标进行解释。
3、外 🐦 周干细 🌳 胞Cd34计算
外周血 🐅 干细胞 💮 (PBSC) CD34 计 🦊 算
外周血干细胞 🌹 CD34 计数用于评估骨髓移植中干细胞的可用性。
所需的设备和材料 🌾 ：
外周血样本 🐴
抗 CD34 单 🦊 克隆抗体
流 🐯 式细胞仪
TruCOUNT 管 🌷
步骤：1. 收集外周血样本 🦊 ：从供体 🐴 采集 🐠 外周血 10mL 。
2. 加入 TruCOUNT 管：将 TruCOUNT 管添加到外周血样本中管。TruCOUNT 含 🐕 有抗 CD34 单。克隆抗体 🌺 和计数珠
3. 孵育：将样本孵 🦊 育 15 分 🌲 钟室温，使抗体与 CD34 细胞结合 🌹 。
4. 稀释 🦆 ：用 🦈 水稀释 🐋 样本至规定的体积。
5. 流式细 🐱 胞术分析：使用流式细胞仪分析样本。计数珠的存在允许 🐝 准确计数细胞 CD34 。
结果 🐺 解 🌷 释 🕊 ：
CD34 计数以 💐 每微升（μL）细胞数表示。
对于骨髓移植，一，般而 🐬 言每公斤供 🐱 体体重需要 25 x 10^6 个 CD34 细胞。
较高的 CD34 计数 🐠 与移植后的较短时间恢复和较高的成功 🐴 率 🌻 相关。
注意 🦟 事项 🌷 ：
准 🍀 确的 CD34 计数至关重要，因为它影响移植的最佳时机和剂量。
患 🐬 者的年龄、健康状况和其他因素可 🦈 能 🐋 会影响 CD34 计数。
建议在移植前 🐘 进行多次 CD34 计数 🐒 ，以 🌲 监测细胞的可用性。
4、外周血干细胞计 🌿 算公式
外周血干细胞 🐟 （PBSC）计算公式：
PBSC 剂量 (单位/kg) = 体重 (kg) x 目 (标/kg)细 🕷 胞剂量单位
其中：体重 (kg)：患者的体 🐯 重（以千克为 🐕 单位）
目标细胞剂量 (单位/kg)：移植所 🕷 需的单位 PBSC 数目除以患者的体重以单位（千/克 🌳 为单位）
注 🐅 意 🌾 事项 🌸 ：
目标细胞剂量因移植类型 🕷 和患者的病情而异。
公式提供的 PBSC 剂量是一个估计值，可能需要 🐛 根据患者的个体情 🐧 况 🐧 进行调整。
PBSC 收集通常通过白细胞分 🌾 离机（WBC 采集器）进行。
PBSC 收集后，通常需 🌵 要在移植前进行 🦊 纯化和冷冻。
