浙江干细胞血清培养工艺(干 🐝 细胞培养可以加血清吗)
- 作者: 朱予希
- 来源: 投稿
- 2025-07-03
1、浙 🐶 江 🐘 干细胞血清培养工艺
浙江干 🐶 细胞 🐡 血清 🌸 培养工艺
浙江干细胞血清培养工艺是一种优化的人血清培养方法,用于维持和扩增人类胚胎干 🐝 细胞和 (hESC) 诱导多能干细胞 (iPSC)。该工艺的特点如下:
原料:人新 🐠 鲜 🌾 血清(AB 型)
培 💐 养基组 🦊 分 🦅 :
Dulbecco's modified Eagle's medium/Nutrient Mixture F12 (DMEM/F12)
胎 🐺 牛血 🕊 清(FBS)
异硫氰酸苯 🌾 甲酯 (PTU)
苯甲 🌺 基异硫氰酸酯 (BITC)
单链 🐱 铁蛋白 🪴 (aFT)
培 🌲 养 🦁 程序 🐦 :
1. 血清处理: 将新鲜人血清在 56℃ 下灭 🐧 活 30 分钟,以灭活补体和免疫球蛋 🐦 白。
2. 培养基配制: 将 80% DMEM/F12、20% 处理 🦟 后的人血清、PTU、BITC 和 aFT 混合配制 🐧 培养基 🌿 。
3. 干细胞培 🌹 养: 将 hESC 或 iPSC 接种到培养基中,并在 37℃、5% CO2 的潮湿环境下培养。
4. 培养基更换: 每 12 天 🌲 更换培养基,以维持培养物的新鲜度和营养供应。
5. 传代: 当培 🐅 养物达到一定密度时,使用胶原酶 IV 将其传代到新的培 🦍 养基中。
工艺 🦉 优 🐯 势 🦉 :
高成活率和增殖率: 优化后的培养基成分和培养条件为和 hESC 提 iPSC 供了最佳的生长环境,确保了高成活率和增殖 🐬 率。
低分化率: PTU 和 BITC 可抑制细胞分化 🦢 ,维持干细胞的未分 🦁 化状 🌹 态。
抑制免疫排斥: 处 🐛 理后的人血清可降低补体和免疫球 🌺 蛋白活性,减少对干细胞的免疫排 🐦 斥反应。
稳定性好: 培养基成分经过严格配比,确,保培养条件稳定避免 🌳 干细胞分化和基因表达变化。
应用:干 🐴 细胞基础研究
再生医学和组 🌵 织工程
疾病 🐯 建模和药物筛选 🦅
个性化医疗和 ☘ 细胞 🐼 治疗 🦆
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2、干 🐕 细胞培养可以加血 🐕 清吗
是的,干细胞培养通常需要添加血清血清是血。液,凝固后分离出的上清液含 🌺 有丰富的生长因子、激,素。和营养物质对干细胞的生长和分化至关重 💮 要
血清的类型:通常使用牛血清或人血清人血 🐈 清。更理想,因,为。有更低 🌷 的免疫原性但成本也更高
添 🕷 加量:血清的添加量因 🌿 细胞类型而异,但通常在 5% 到 20% 之间。
作用:血清中的生长因子和激素 🐟 促进干细胞的增殖和分化血清。蛋白提供营养支 🦊 持,帮。助维持细胞的健康
值得注意的是,使用血 🌲 清存在一些潜在的缺点:
变异:血 🐟 清是天然产物,所,以不同批 🐬 次之间可能会存在变异这可能影响 🌺 干细胞的培养。
污染:血清可 🐞 能含有污染物,例如病 🍁 原体或内毒素。
免疫原性:动物血清可能具有免疫原性,在某些应用 🌼 中(例如将干细胞移植回患者)需要考虑。
因此,一,些研究人员正在探索血清替代物例如无血清培养 🦆 基或 🌾 重组生长因子。