牙髓干细 🪴 胞具体如何分离（牙髓干细胞具体如何分离出来）
- 作者: 马希柠
- 来源: 投稿
- 2025-09-10
1、牙髓 🐶 干细胞具体 🐋 如何分离
牙 🌹 髓干细胞 🦉 分离程序
1. 组 💐 织采 🦄 集 🦢 ：
从健康牙齿中提取牙髓组织，通常从不需要拔除 🐅 的智齿或牙周手术中获 🐧 得。
2. 酶消 🦍 化：
使用胶原酶和 🌻 其他酶处理牙髓组织 🐺 ，以分解细胞外基质并释放 🐶 干细胞。
3. 悬浮细胞培养 🦋 ：
将酶消化 🐱 后的细胞悬浮在富含营养的培养基中，并放置在培养皿中 🦊 。
4. 贴壁 🦟 培养：
悬浮细胞会在培养皿壁上 🌵 贴附，而其他细胞（如血液细胞会悬浮在培养）基中贴附。的细胞。是牙髓干细 🌺 胞
5. 克隆形成单元（CFUF）分析 🐛 ：
在培养基中添 🐞 加刺激细胞增殖的生长因子，如表皮生长因子（EGF）和成纤维细胞生 🦢 长因子（FGF）。能（形）成克隆群体的贴壁细 🐘 胞被称为表CFUF，明。它们具有自我更新和分化的能力
6. 分流 🌼 细胞 🐈 术分选 🐟 ：
使用表面标记物，如STRO1和CD146，通过分流细 🐈 胞术分（FACS）离出 🐠 牙髓干细胞。这。些表面标记物特异性地表达在牙髓干细胞上
7. 干细 🌲 胞培养和 🐴 扩 🐺 增：
分选出的牙髓干细胞在富含 🦆 生长因子的培养基中进一步培养和 🌲 扩增，以获得大量 🐱 的干细胞。
分离后的牙髓干细胞的 🐴 特 🐴 征：
表达STRO1、CD146等 🍁 表面标记物
具有 🦢 自我更新和多向分化的能力
可分化成牙髓细胞成、骨 🐘 细胞成、软骨细胞 🦅 和其他细 🌵 胞类型
2、牙髓干 🌳 细胞具体如何分离出来
牙髓干细胞分离步 🦆 骤
1. 采 🦢 集牙髓
从刚刚拔出的健康 🐕 牙齿中，使用无菌器 🌴 械小心移除牙髓。
牙髓组织是一种 🐦 软组织，位，于牙齿中间的牙髓腔内含有丰富的牙髓干细胞。
2. 消 🐴 化牙髓
将牙髓切成小 🐱 块，并用含有消化酶的溶液（如胶原酶和蛋白酶消 🐒 化 🕸 ）它们。
消化过程将牙髓组织分解成单 🌵 个细胞 🐳 。
3. 过滤细胞 💐 悬液
将消化的细胞悬液通过过滤器过滤，去 🌷 除未消化的组织碎片和细胞碎片。
4. 单 🌺 核 🌵 细胞分离
单核细胞是牙髓干细胞的来源。将过滤后的细胞悬液进 🐬 行单核细胞 🐈 分离，可，以。去除其他类型的细胞如免疫细胞和红 🌳 细胞
单核细胞分离可以通过密度梯度离心或磁性激活细 🐛 胞分 🦁 选（MACS）进行。
5. 选 🌷 择牙 🦢 髓干细胞
从分离出的单核细 🐕 胞中，可以使用不同的表面标记物来选择牙髓干细胞。
常 🐼 见的表面标记物包括：
STRO1
CD34
CD146
CD90
6. 培养 🐒 牙 🦉 髓干细胞
将选出 🦆 的牙髓干细胞接种到合适的培养基中，并培养它们增殖和分化。
培养基通常含有生长因子和其他 🐺 营养 🐠 物质，以支持牙髓干细胞的生长。
注 🐺 意 🦅 事项 🦉 ：
牙髓干细胞的分 🦊 离过程应在无菌条件下进行，以防止污染。
分离的 🌺 牙髓干 🐧 细胞应进行细胞鉴定，以验证其身份和特 🌷 性。
牙髓 ☘ 干细胞 ☘ 的培养条件和选 🐶 择方法可能因具体应用而异。
3、牙髓干细胞具体如何分离的 🌴
牙髓干 🦍 细胞分 🌷 离步骤 🐝
1. 牙髓 🐳 组织获取
拔出健康的牙齿或进行牙髓活髓切除术以获 🪴 取牙髓组织。
使用无菌技术并遵循适当的生 🐈 物安 🐎 全程序。
2. 牙 🐅 髓消化
将牙髓组织切 💐 成小块，加入含有消化酶的培养液中。
典型使用的酶 🐒 包括胶原酶、蛋白酶和透明质酸酶。
孵育数小时，使，酶分解牙髓组织 🐱 释 🐟 放细胞。
3. 细胞 🐠 悬液过 🦍 滤 🐠
将消化后的牙髓组织通过滤网过 🕷 滤，去除组织碎片和未分离的细胞。
4. 细胞分离 🕷
使用密度梯度离心法或磁珠分 🌹 选法将干细胞与其他细胞分离。
密度梯度离心法：细胞悬液分层在密度不 🦉 同的液体上。干细胞。位于特定密度的 🌴 界面上
磁珠 🦟 分选法：干细胞表面带有特定的标记物磁珠，附着 🐎 在这些标记物上。通。过磁场收集附着有干细 🦁 胞的磁珠
5. 干细 🕊 胞培养和扩增 🐝
分离出的干细胞接种到 🕊 含有生长因子的培养基中。
干 🦈 细胞在合适 🐘 的培养 🌼 条件下培养和扩增，形成细胞群。
6. 干细 💐 胞 🦅 鉴定
通 💮 过流式细胞术或免疫细胞化学染色对干细胞进行鉴定。
鉴定标记物包括 🦈 ：
STRO1 (Stro1抗 🦢 体 🐴 )
CD44 (CD44抗体 🐱 )
CD146 (CD146抗 🐟 体 🐧 )
CD271 (神经干细 🐶 胞 🦅 标 🦉 记物)
4、牙髓 🕸 细胞和牙髓干细胞区别
牙髓细胞存 🌲 在于牙髓腔内
分为：成 🦍 牙本质细胞：产生 🐅 硬组织，形成牙本 🐡 质
成牙员 🐼 细胞：产生软组 🌾 织，形成 🐬 牙髓
纤网细胞：负责支 🦋 持和营养牙 🐟 髓
牙髓干 🦁 细 🌲 胞 🐧
存在于牙髓的血管周 🌸 围 🐘 和神经周围
具有 🍀 自我更新和分化成各种牙髓细胞类型的能力
在再 🌸 生牙髓组织和修复牙髓疾 🌳 病 🐘 中具有治疗潜力
比牙髓细胞更难获得 🦢 和培养
区别| 特征 🌻 | 牙 | 髓 🌼 |细胞 🌸 牙髓干细胞
||||| 位置 | 牙 | 髓 |腔内 🌻 牙髓的血管周围和神经 🌾 周围
| 类 🐵 型 | 成牙本质细胞成牙、员细胞、纤 | 网 |细胞多能干细胞 🐴
| 功能 | 产 | 生 |和 🐅 维护牙髓组织 🌹 自我更新和分化
| 治疗潜力 | 有 🐯 | 限 🐞 |高
| 获得和 🌻 培养难度 | 较 | 低 |较 🌷 高
