嘌呤霉素筛选干细胞（嘌呤霉素筛选培养基含血清和 🐟 双抗吗）
- 作者: 杨默一
- 来源: 投稿
- 2025-08-15
1、嘌 🕷 呤霉素筛选干细胞 🐳
嘌呤霉素筛 🐡 选干细胞
嘌呤霉素筛选是一种用于选择和分离培养的干细胞的方法 🌷 嘌呤霉素是一 🐴 种。抗生素，它。可以通过抑制鸟嘌呤核苷酸合成来靶向增殖细胞
原理干细 🐴 胞 🕸 具有 🌸 较低的增殖率，因此对嘌呤霉素的敏感性较低。
增殖性细胞对嘌呤霉素高度敏感，因，为它干扰嘌呤核苷酸合成这是合 🌹 成 DNA 的必要成分。
步骤1. 添加嘌呤霉素：将嘌呤 🌷 霉素添加到 🦆 干细 🐼 胞培养基中，浓度通常为 0.11 μg/mL。
2. 孵育 🦉 ：培养细胞，通常为 🌺 4872 小时。
3. 去除增殖细 🐼 胞 🐱 ：嘌呤霉素会杀死增殖性细胞，而干细胞仍然存活。
4. 收集干细胞：使用细胞刮刀或胰 ☘ 蛋白酶将存活的干细 🐡 胞从培 🐧 养皿中收集。
优点选择性：嘌呤霉素可有效选择具 🦄 有较低增殖率的干 🌴 细胞。
简便性：该方法相对简单，操作 ☘ 方便。
广泛性：嘌呤 🐟 霉素筛选可用于从各种组织和 🐺 来源获得干细胞。
局限性细胞损伤：高浓度 🌲 的嘌呤 🐕 霉素 🐒 可能对存活的干细胞造成损伤。
非特异性：嘌呤 🐅 霉 🕸 素也可以靶向一些非增殖细胞，例如神经元 🐳 和内皮细胞。
耐药性：某 🐕 些细胞系可能对嘌呤霉素产生 🦢 耐药性。
应用嘌呤霉素筛选干细胞 🦍 已用于：
干细胞 🌼 研究
组 🌲 织再 💮 生 🐺
细 🦄 胞治疗 🐯
2、嘌呤霉素筛选培养基含血清和双 🌷 抗吗
3、嘌 🐅 呤霉素 🐧 筛选要一直加药吗
4、嘌呤霉素转染细胞筛选原理 🌳
嘌呤 🦆 霉素转染细 🦉 胞筛选原理
嘌呤霉素转染细胞筛选 🐠 是一种将目标基因整合到受体细胞中的分子生物学技术。其原 🐈 理如下：
1. 目标基因克隆到嘌呤霉素抗性 🌷 基因下游：
目标基因克隆到一 🍁 个带有嘌呤霉素抗性 🐞 基因（puro^R）的载体上基因，puro^R 编码一种能抵抗嘌呤霉素毒性的酶。
2. 目标基 🌵 因与受体 🍀 细胞质粒转 🐡 染：
载有目标 🦋 基因puro^R 构建体的质 🦋 粒被转染到受体细胞中。
3. 筛选 ☘ 嘌呤霉素抗性克 🦍 隆：
转染后，细胞暴露于嘌呤霉素选择剂中。只，有。成功整合了嘌呤霉素抗性基因的细胞 🐟 才能存活因为它们 ☘ 能产生对嘌呤霉素具有抗性 🐵 的酶
4. 筛选出的细胞含有整合的目标基 🐟 因：
成功筛选出的嘌呤霉素抗性克隆 🦊 还包含整合到其基因组中的目标 🐼 基因。这。意味着目标基因将稳定表达在 🌸 受体细胞中
5. 作用 🐎 机制：
嘌呤霉素是一种核苷类似 🪴 物，它，会干扰蛋白质 🌷 合成导致未整合的质粒被降解。
只有整合了嘌呤霉 🐵 素抗性基因的细胞才能产生嘌 🦁 呤霉素抗性酶，保护它们免受嘌呤霉素的毒 🐒 性。
优点：高效且 🌲 易于 🐠 进行
整合的目标基因 🐅 稳定 🐒 表达
可用于多种细 🐕 胞类型
缺点：整 🌸 合位点可 🐈 能是随机的可能，影响基因表达
可能 🐼 产生抗生素耐药性问题
