如何检测 🦁 血液干细胞（如何检测血液干细胞移植成功）
- 作者: 马颜宁
- 来源: 投稿
- 2025-07-07
1、如何检 🦈 测血液 🦍 干细胞
检测血液干细胞的 🌲 方 🦁 法
1. 流 🍁 式 🦄 细 🌸 胞术（FACS）
标记 🕊 靶向血液干细胞表面标 🕊 记物的抗体 🦄 。
使用流式细胞仪 🐋 根据标 🐶 记的细胞进行分选。
常 🌺 见 🐼 的标记物 🌷 包括：CD34、CD133、CD45RA、Lin。
2. ColonyForming Unit（CFU）测 ☘ 定 🐒
将血液样品接种到培养基中，形 🦈 成集落。
计数不同类型的集落以评估血液干细 🌷 胞含量：
CFUGranulocyteMacrophage（CFUGM）：产生粒细 🐦 胞和巨噬细胞 🕷 。
CFUErythroid（CFUE）：产生红细胞 🌴 。
CFUMegakaryocyte（CFUMeg）：产 🌷 生 🦉 血小板 🦋 。
3. Cobblestone AreaForming Cell（CAFC）测定 ☘
将血 🐝 液样品接种到基 🐎 质细胞层 🌻 上。
血液干细胞 🐘 粘附在 🕊 基质上并形 🐋 成类似鹅卵石的区域。
这些 🌾 区域 🐱 代表 🦍 血液干细胞的活性。
4. 免疫缺陷 🐛 小鼠移植模型
将人类血液 🕸 样品移植到免疫缺陷小鼠的骨髓 ☘ 中。
如果样品中含有血液干细胞，它们会 🐬 重建小鼠 🐴 的 🍁 造血系统。
可以恢复受体小鼠的造血细 🐒 胞并分析它们的特性。
5. 基因 🌹 分析
分析血液干 🌵 细胞特异性基因的表 🕷 达，例如：
Hematopoietic Stem Cell Antigen1（HSCA1）
Leukemia Inhibitory Factor Receptor（LIFR）
Oct4
Nanog
6. 单细胞 RNA 测 🐺 序
对单个血液细胞进行 🍀 RNA 测序，鉴 🦟 定基因表达模式 🌸 。
可以根 🌷 据转录 🐬 组特征识别血液干细胞。
选择 🦢 性方法
检测方法的选择取决于 🦆 目的和可获得 🐴 的样品。
FACS 和 CFU 测定用于 💐 定量分析 🐯 。
CAFC 和免疫缺陷小 🌿 鼠移植模 🐳 型用于评估血液 🌿 干细胞功能。
基因分析和单细胞 RNA 测序提供对 🌹 血液干细胞分子特征的深入 🐝 了解。
2、如何检测血液 🦟 干细胞移植成功
血 🌳 液干细胞移植成功检 🦋 测
血液干 🐕 细胞移植 🐦 (HSCT) 的成功检测涉及以下方法的综合评估：
1. 血 🌹 液检查 🌻 ：
白细胞计 🪴 数 🦈 ：移植后白细胞计数，通，常会下降然后 🦆 逐渐恢复。
血红蛋白水平血红蛋白水 🕸 平：也会下降，然后 🦍 逐渐恢复 🦋 。
血小板计数血 🌼 小板计数 🐝 ：通常很低，然后逐渐恢复。
2. 骨髓 🪴 穿 🐝 刺 🌿 和活检：
骨髓穿刺和 🍁 活检可以评估移 🦉 植骨髓中 🐟 造血细胞的恢复。
成功移植 🐠 的征象包括：
多个造血细胞 🐺 谱系的恢复（红细胞 🌵 、白细胞血、小板）
供体细胞的存在（通过细胞 🌴 标记或染色 🌲 显现 🕸 ）
3. 免疫重 🐅 建：
免疫球蛋白水平免疫球蛋白水平：会 🌷 下降，然后再随着 B 细胞功能的恢复 🌵 而提高。
T 细胞计数细胞 🦊 计数：T 会下降，然后再 🦟 随着胸腺功能的恢复而提高 🐎 。
4. 临 🐱 床症 🐕 状 🐅 ：
中 🐺 性粒细胞恢复：移植后中 🌸 性粒细胞，计数通常在 23 周 🐅 ，内恢复表明移植成功。
感染控制：能够控制感染表明免疫系统已经重建，移植 🌾 成功。
5. 分子 🐕 检 🐒 测：
PCR 分析 🐘 ：检测供体细胞特异性 DNA 或 RNA 以证实供体细胞的存 🐟 在。
流式细胞术：检测供体细胞表面标志物的表 🐛 达。
6. 其他 🦍 指标：
移植相关并发症 🐯 并发症：的发生，例如移植物抗 🦍 宿主 🦟 病 (GvHD)，可能表明移植不成功。
长期随访 🐴 ：定期随访对于监测移植的长期成功率至关重要。
成 🐦 功的 🌷 标准：
移植成功的具体标准可能因移 🐒 植类型和患者个体而异。一般来说成功的标，志包括：
持 🌹 久的造血 🌵 重 🕸 建
免 🐳 疫 🐕 重 🦉 建
感染 🌾 控制 🌼
没有严 🌷 重并发症
良 🐼 好的 🌳 长期生存
3、如何检测血液 🌴 干细胞是否正 🐈 常
血 🌼 液干细胞正 🦁 常 🌺 性检测
血液干细 🦉 胞（HSC）是骨髓中负责产生 🦟 所有血细胞类型的未分化细 💮 胞。其。正常性对于维持健康的血液系统至关重要以下是一些检测血液干细胞是否正常的检测方法：
1. 外 🌸 周 🐬 血计 🐺 数 (CBC)
CBC 测量血液中不同类型细胞的数量和百分比，包括白细胞、红细胞和血小 🐟 板。异。常的血液细胞计数可能是血液干细胞功 🐦 能障碍的迹象
2. 骨髓活检 🦄 和抽 🐴 吸术 💐
骨髓活检和抽吸术涉及从 🐞 骨髓中收集样本来检查 HSC 的数量和质量。医生使用显微镜检查细胞，评。估其发育 🐈 阶段和任何异常情况
3. 流 ☘ 式细 🐧 胞 🦋 术
流式细胞术是一种技术，可以根 🌿 据其大小、形状和表面标记物来识别和计数不同的细胞类型。它 🐋 可用于检测的数 HSC 量和。亚群分布
4. 染 🐬 色体分析 🦟
染色体分 🌷 析检查细胞的染色体结构 ☘ 是否存在异常染色体异常。可。能导致血液干细胞 🦈 功能障碍
5. 基因 🌿 检测 🌸
基因检测可以识别与血液干细胞相关疾病的特定基因突变。这。些疾病包括再生障碍性贫血和 🐠 骨髓增生异常综合征
6. 功能 🐼 检 🐋 测
功能 🌻 检测评估 HSC 的 ability to produce different types of blood cells. 这可以通过体外培养或动 🌺 物模型来完成。
正常范围血液干细胞的正常范围因年龄和个体而异。一 🦟 般来说，在以下范围内被认为是 🐅 正 🐕 常的：
骨髓活检： HSC 百分比为 🐟 0.53%
流式 🐺 细胞 🐯 术： HSC 百分 🐴 比为 0.11%
基 🐺 因检测： 无已知的致病突变 💐
异 🦆 常结果的 🌲 含义
血液干细胞异常的结果可能表 🌵 明疾病或状况，例如：
再生障碍性贫 🌳 血 🐅
骨髓增生异 🐼 常 🐧 综合 🐛 征
白血病淋巴瘤
镰状细 🦍 胞病
及时诊断和治疗对于 🐎 改善 🐳 预后至关重要。
4、从哪几个方面检测 🐯 干细胞
干细胞检测 🦆 的方面
1. 表面标 🌻 志 🐋 物 🦟
利用流式 🦈 细胞仪或免疫组织化学方法检 🐬 测干细胞表面特异性抗原，如：
人胚胎干细胞 🐬 (hESCs)：SSEA4、Tra160、Tra181
人诱导多 🐈 能 💐 干细 🕷 胞 (iPSCs)：SSEA4、Tra160、Oct4、Sox2
间 🐋 充质干细胞 (MSCs)：CD44、CD73、CD90、CD105
神 🦋 经 🐼 干细胞 (NSCs)：Nestin、Sox2、Musashi1
2. 转录因 🐦 子
分析干细 🌵 胞特异性转 🦉 录因子的表达，如：
hESCs：Oct4、Sox2、Nanog
iPSCs：Oct4、Sox2、Klf4、cMyc
MSCs：Runx2、Osterix、Sox9
NSCs：Sox2、Nestin、DCX
3. 表 🌿 观遗传学
检测干细胞特异性表观遗传 🦟 学标记，如：
DNA 甲 🐅 基化：hESCs 和 iPSCs 具 DNA 有低甲基 🦟 化水 🌵 平
组蛋白修饰：H3K4me3 和 H3K27me3 在干细胞 🦄 中 🦊 表现出独特模 🦄 式
4. 体外 🌻 分化潜能 🦍
通过将干细胞培养在特定培养条件下，评，估其分 🌷 化为不同细胞类 🐯 型的能力如 🐛 ：
胚层分化：hESCs 和 iPSCs 可以分化为内胚层、中 🕷 胚层和外胚层
间质分化：MSCs 可以分化 🐎 为骨细胞、软 🌵 骨细胞和脂肪细胞
神经分化：NSCs 可以分 🌵 化为神经元、胶质细胞和少突胶质细胞
5. 体内形成 🦊 瘤潜能
将干细胞注射到免疫缺陷小鼠体内，形成瘤体的能力表明干细胞具有无 🦟 限增殖和自我 🐞 更新的潜力。
其他方面细胞形态学：干细胞通常具有 🌳 特定的形态学特征，如卵圆形或多边形。
克隆形成：干细胞能够形成由 🐳 单个细胞衍生的 🐶 克隆。
增殖能力：干细胞具有很高 🦆 的 🦁 增殖能力。
自更新能力：干细胞能够在维持其未分化状态的同 🐠 时进行自我复制。
