大鼠脊髓神 🦍 经干细胞（大鼠脊髓神经干细胞原代提取）
- 作者: 刘司纯
- 来源: 投稿
- 2025-09-04
1、大鼠 🐺 脊髓神经干细胞 ☘
大鼠脊髓神经干 🌿 细胞
定义：大鼠脊髓神经干细胞是多能干细胞，存在于大鼠的脊髓中。它们 🐡 具有自我更新并分化为神经元、少。突胶质细胞和星形胶质细胞的能力
特征：自我更新：神经干细胞可以不断分裂并产生更多的神经干细胞，维持其自身数量 🦍 。
多能性：神：经干细胞可以分化为神经系统的三种主要细胞类型神经元、少 🐼 突胶质细胞和星形胶质细胞。
神经发生神经：干细胞可以产生 🦆 新的神 🐬 经元，这是通过一种称为神经发生的复杂过程实现的 🍀 。
定位：在大鼠中，神经干细胞主要 🦊 位于脊髓 🌷 中央管周围的室管 🍀 膜层和灰质。
应用：大鼠脊髓神经干细胞在研究和治疗中 🌷 具有多种 🪴 潜在应用：
脊髓损伤研究：神经干细胞被用作研究脊 🐟 髓损伤机制的模型。它们还可以被移植到损伤的脊髓中以，促。进再生和功能恢复
神经退行性疾病治疗神经：干细胞正在探索用于治疗帕金森病、阿尔茨海默病和 🐧 多 🦢 发性硬化症等神经退行性疾病。
药理 🐬 学研究：神经干细胞可以 🦢 用来测试新药的潜在神经毒性或神经保护作用。
再生医学：神经干细胞有望 🌼 用于再生损伤或丢失的神 🐎 经组织。
挑战：使 🌼 用大鼠脊髓神经干 🕸 细胞进行治疗的主要挑战包括：
免疫排斥：异种移植（不 🐒 同物种之间）会 🪴 导致免疫排斥反应。
分化控制控制：神经干细胞分化成特定细 🌴 胞类型的过程很有挑战性。
移植技术：将神经干细 🌷 胞成 🐅 功移植到损伤部 🌺 位需要先进的技术和精确的手术。
尽管面临这些挑战，大鼠脊髓神经干细胞仍然是研 🌼 究神经系统疾病并开发新的治疗方法的宝贵工 🕷 具。
2、大鼠脊 🌷 髓神经干细胞原代提取
“大鼠脊髓 🌾 神经干细胞原代提取”
材料成年 🍁 雄性大鼠 (200250 g)
无菌手 🦉 术器 🐘 械
无菌培养基 🐎 （如培养基 DMEM/F12 补充 10% FBS）
胶 🌹 原 🕷 酶 🌲 IV (2 mg/mL)
胰蛋 🦋 白酶 🐵 (0.1%)
神 🦟 经上皮生长因 🍀 子 🦅 (EGF) (50 ng/mL)
基本成纤 🌹 维细胞生长因子 (bFGF) (50 ng/mL)
单核细 ☘ 胞生长 🐦 因 🕸 子 (MGF) (20 ng/mL)
肝 🕊 素 🍀 (5 μg/mL)
胰岛素转 🕸 移 🦈 蛋白 (1 μg/mL)
方法1. 动物处死和脊髓分离 🐼
根 🦄 据机构 🐴 规 🦅 程对大鼠进行安乐死。
在无菌条件 🕷 下 🌹 ，剪开和移除脊椎。
小心取出脊髓，并将其转移到装有冷无菌 PBS 的 🌸 培养皿中。
2. 去 🌻 膜 🐡
使用解剖镊子小心地剥 🦋 离覆 🦋 盖脊髓 🐕 的硬膜和蛛网膜。
将去膜后的脊髓转移到含有胶原酶 IV 和胰蛋白酶 🦆 的工作缓冲液中。
3. 酶消 🦋 化
将培养皿置于 37°C 的摇床孵箱中，以的 🐈 300 rpm速度 🦁 孵育 60 分钟。
每 1520 分钟用手持研磨器小 🦍 心研 🦁 磨 🦁 组织。
4. 细胞 🦁 分离 🐛
将酶消化后的细胞 🐬 悬液 🌳 转移到装有的 10% FBS 新鲜培养基的离心管中。
以 🕊 1000 x g 离 🐋 心 5 分钟 🐒 。
小心地弃掉上清液，并 🐅 用新鲜培 🐅 养基重悬细胞。
5. 扩增 🐋 和培养
将重悬的细胞播种到预涂有聚赖氨酸和层 🐺 黏连蛋白的培养板上。
添加含有生长因子的 🐅 完全培养基（EGF、bFGF、MGF、肝素 🦈 和胰岛素转移蛋白）。
将细 🐼 胞置于 37°C、5% CO2 的培养箱中培养 710 天。
6. 神经 🌿 干 🐞 细胞鉴 🌷 定
可通过免疫细胞化学或流式细胞术使用 🌹 神经干 🍁 细胞标记物（如 Nestin、Sox2）来鉴定神经干细胞。
注意事项手术和培 🦉 养期间保 💐 持无菌 🌸 操作。
严格遵守动物护理和 ☘ 使用 🌴 准则。
使用高质量的试剂和培养基 🐳 ，以确保神 🌲 经 🐋 干细胞的存活和分化。
3、大鼠脊髓神经 🍁 干细胞移植术
大鼠 🦟 脊 🌻 髓神经干细胞移植术 🐼
简介大鼠脊髓神经干细胞移植术是一种实验性治疗方法，涉及将神经干细胞移植到受损的大鼠脊髓中神经干细胞是。具有分化成神经元、少。突 🐼 胶质细胞和星形 🐬 胶质细胞等神经细胞类型潜能的多 🌻 能细胞
目的此 🕷 手术的目的是修复受损的 🕊 脊髓，促进神经再生和功能恢复。
程序手术 🐘 步 🍁 骤 🐞 如下：
1. 脊 🍁 髓切断: 在大鼠脊髓中 🌳 制造一个损伤，移除受损组织。
2. 神经干细胞培养: 从健康大鼠或人类 🌻 供体中分离神经干细胞，并在体外培养。
3. 移植 🦍 : 将培养的神经干 🐺 细胞注射或移植到脊 🌻 髓损伤部位。
4. 愈合: 移植的 🐶 神经干细胞将分化成功能性神经细胞，并与周围组织整合。
结果在大鼠模型中，该手 🌹 术已显示出以下结果：
促进神经元 🐕 的 🌸 存活和生长
改善少突胶质细胞的髓鞘形 🌼 成
减 🐈 少神经 🌻 炎症
改善运 🐯 动和感觉功能恢复
临床意义虽然该手术目前仅在实验性 🐞 环境中进行，但它有望在未来应用于人类脊髓损伤患者。如，果，成。功它可能成为一种有效的治疗方法为患者提供功能恢复的希望
局限性大 🦉 鼠模型和人类 💮 脊髓损伤之间的翻 🐠 译困难
移植的神经干细胞可 🌻 能难以完全整合到损伤的 🌴 脊髓 🐼 中
炎症和免 🦊 疫排斥的可能性 🐕
伦理 🦊 问题，特别是涉及人类胚胎干细胞的 🦆 使用
研究方向研究正 🐴 在进行以解决移 🐝 植技术的局限性，并探索新方法来提高其有效性。这些方向包括：
优化神经干细胞 🐼 的 🦊 培养和分化条件
开发支 🌼 架和生物材料来促进移植物的存 🐳 活和整合
抑制炎症和 🦁 免疫排斥
探索多能干细胞和诱 🕷 导多能干细胞作为神经干细胞来源的潜力
4、大鼠脊髓 🌷 神经干细胞移植
大鼠脊髓 🌻 神经干细胞 ☘ 移植
简介脊髓神经干细胞移植是一种通过将神经干细胞移植到受损脊髓中来修复脊髓损伤的实验技术神经干细胞是。具有自我更新和分化成神经元、少。突胶质细胞和星 🦆 形胶质细胞潜力的多 🦢 能祖细胞
过程神经干 🦊 细胞采集：从胚胎或成体大鼠脑或脊髓中采集神经干细胞。
移植 🌾 准备：将神 🌻 经干细胞悬浮 🌷 在培养基中，并浓缩到合适的浓度。
脊髓损伤模型创建：在实验 🐠 大鼠中创建脊髓损伤，通 🐺 常通过切 🕸 断或压迫脊髓。
神经干细胞 🐦 移植：使用显微注射器将神经干细胞悬浮液注入受 🌿 损脊髓部位。
机制移植的神经 🌹 干细胞可 🍀 能会通过以下机制促进脊髓修复：
神经再生：分化为新的神经 🦊 元和髓鞘形成 💐 细胞，从而重建受损神经回路。
神经保护：释放 🕸 神经保护因子保护，受损神经元免 🐠 受进 🦍 一步损伤。
免疫调节 🐋 ：抑制炎 🐕 症 🌲 反应和促进受损组织的修复。
结果大鼠脊髓神经干细胞移植已显 🐕 示出修复脊 💐 髓损伤 🌷 并改善功能的潜力：
运动功能恢复：移 🐒 植的神经干细胞可以促进损伤 🐶 部 🐺 位以下肢体的运动功能恢复。
感觉功能恢复：神经干细胞移植也有助于恢 🐠 复感觉功 🦅 能 🌷 ，例如触觉和疼痛感知。
组织修复：神经干细胞移植可 🐘 以促进受损 🌸 脊髓组织的修复和重塑。
挑战脊髓神经干细 🐞 胞移植仍面临一些挑战，包括：
免疫排斥：移植的神经干细胞可能 🦋 会被宿主体识别并被免疫系 🦍 统排斥。
细胞存活：移植后神经干细胞的 🐼 存活 🐈 率是一个关键问题。
有效性变异：移植的效果可能 🦄 因脊髓损伤的严重程度和移植神经干细胞的类型而异。
展望大鼠脊髓神经干细胞移植是一种有前途的脊髓损伤治疗方法。进一步的研究旨在提高移植的有效性 🐞 ，解，决。挑 🦊 战并最终将其应用于人类患者
