小鼠造血干细胞比例(小鼠骨髓造血干细胞染色体的制备 🌴 和观察)
- 作者: 李竞琛
- 来源: 投稿
- 2025-10-03
1、小鼠 🌻 造血干细胞比例 🐝
小鼠造 🐘 血干 🐕 细胞比例 🕊
在小鼠骨髓中,造血干细胞 (HSC) 仅占非常小比例。以下是不同类型的 🌳 在小鼠骨髓中 🦍 的 HSC 估计比例:
LTHSC (长期 🌴 再生的 🌺 ):0.010.02%
STHSC (短期 🌲 再生 💐 的 🌹 ):0.030.05%
MPPs (多 🐎 能祖 🍁 细胞):0.040.1%
这意味着在 1000 万个骨髓细胞中,只有个 1020 是这 HSC。些细胞。负责维 🐋 持整个身体的造 🐈 血系统
不同 HSC 群体 💐 之间的比例差异
LTHSC 是 🦊 最稀有的,它们具有自我更新和产生所有血细胞谱的能力具有。STHSC 较,大的增殖能力但无法长期自我更新是更。MPPs 早,期的,祖细胞它们。可以分化成所有类型的血细胞但不 🦁 能自我更新
影 🐡 响 HSC 比 🦅 例的 🐒 因素
HSC 比例会受到 💐 以下因素的影响 ☘ :
年龄 🐯 : HSC 比例随着年龄的增长而减少 🐒 。
压力压 🐼 力:会减少 HSC 比例。
基因 🌻 突变:一些基因突变会导致 🦆 HSC 比例异常。
药物治疗 🦍 :某些药物可以影响 HSC 比例。
了解 HSC 比例对于研究造血疾病和开发再生医学 🪴 疗法很重要。通 HSC 过调节比例,我。们可以改善造血系统的功能并治疗血液疾病
2、小鼠骨髓造血干细胞染色体的制备 🦋 和观察
小鼠骨髓造血干细胞 🐯 染色体的 🐘 制备和观察
材料:小 🐟 鼠 🌸 骨髓 🕸 造血干细胞悬液
PBS (pH 7.2)
低 🐘 渗 🐅 液 🐦 (0.075M KCl)
固定液 (甲醇:乙酸 🐡 = 3:1)
卡氏液载玻片
盖玻片
显微镜
步骤:
染色体制 🦟 备:
1. 将 🌷 小鼠骨髓造血 🕷 干细胞 🐴 悬液离心 5 分钟,1000 x g。
2. 吸出上清 🐈 液,用 PBS 洗涤细 🦈 胞。
3. 用 🐞 低渗液悬 ☘ 浮细 🌼 胞 5 分钟。
4. 向低渗液中 🐼 缓慢滴加固定液,直到体积翻倍。
5. 混合并孵育 🌴 15 分钟。
6. 离心 🦁 5 分 🌵 钟 🦍 ,1000 x g。
载玻 🌳 片染 🦟 色 🦢 :
1. 在载玻片上滴一小滴固定后 🦆 的细胞 🌼 悬液。
2. 用滴管轻轻吹散细 🌷 胞。
3. 倾斜载 🐡 玻 🐅 片数 🐦 秒钟,以去除多余的液体。
4. 在载玻片上 🐶 滴一小滴卡 🐼 氏液。
5. 盖 🐟 上盖玻片,用滤 🕸 纸压扁 🦄 。
6. 孵 🌴 育 5 分钟 🐅 。
7. 取下盖 🦍 玻片并用蒸馏水 🌸 洗涤载玻片 🐟 。
8. 晾 🐈 干载玻 🐈 片 🌺 。
观察:1. 将载玻 🌹 片 🦁 置于显 🦊 微镜下。
2. 使用 100x 油 🌹 浸 🌿 物 🦍 镜观察。
3. 染色体将呈 🐵 现出条带状结构,表明其处于中期阶段。
4. 可以对染色体进 🐶 行计 🌹 数和分类以分,析细 💐 胞的染色体异常。
注意事 🌻 项:
所有步骤应在低温 🦉 下 💮 进行 🍁 。
所有试 🦊 剂应新鲜制备。
载玻片染色时,避免过 🐯 度干燥或过湿。
观察 🌵 时应使用合适的照明和滤 🦍 光片。
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3、小鼠骨髓造血干细 🌷 胞形成各种 🐳 血细胞
骨髓造 🍁 血干细 🦢 胞及其 🦅 分化
骨 🐒 髓造 💮 血干细胞 (HSC) 是位于骨髓中的原始多能细胞。它们具有自我更新和分化成所有类型的血细胞的能力,包括:
红细 🐘 胞:负责携带氧 🐈 气 🐠
白细胞:对抗 🦋 感染和疾病
血小板:促进 🐈 血液凝固 🌷
分化过程HSC 通过一系列受基因调控的步骤 🦈 分化成特定的血细胞谱系:
1. 共同淋巴祖细胞 (CLP):HSC 分化为 CLP,它们 🌲 可以进一步分化为淋巴 🐟 细胞细胞细胞(T 和、B 自然杀伤细胞)。
2. 粒巨噬细胞祖 🌷 细胞 (GMP):GMP 分化为粒细 🌷 胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞和巨 🦊 噬细胞)。
3. 单核巨噬细胞祖细胞 (MDP):MDP 分化为单核细胞,它们可以进一步分化 🦊 为巨噬细胞和树突状细胞。
4. 红系祖细 🐅 胞 (EPC):EPC 分化为 🦅 红细胞。
5. 巨核细胞祖细胞 (MKP):MKP 分化为巨 🐈 核细 🐟 胞,它们产 🐘 生血小板。
调节HSC 的分 🌳 化受到来自微环境、激 🐕 素和细胞因子的各种信号的调节。这些信号决定 HSC 是自、我。更新分化还是进入静止状态
4、小鼠和人的造血干细胞都具有 🌸 的表
小鼠和人类造血 🐴 干细胞都具有的表 🌷
| 表 🐅 | 功 🐋 |能 🍀
|||| CD34 | 造 |血祖细 🌻 胞 🌷 的标 🐴 志物
| CD38 | 造 |血祖细胞和早淋巴细胞的 ☘ 标志物 🌹
| CD45 | 所 🐦 |有 🌹 造血细 🐞 胞的标志物
| CD71 | 转运 🐅 蛋白,在 |早 🐞 期的造血 🐝 细胞中表达
| CD90 | 干细胞标记 🐛 ,在小鼠中称为 Thy1.2 |
| CD105 | 内 🐒 |皮生长因子受体 🪴
| CD117 | 干细胞 🐞 因 🐬 子受 🐧 体 (cKit) |
| CD133 | 干 🌺 |细胞标 🦉 记 🐶
| CD166 | 黏附分子 🕊 ,在 |造血干细胞和祖细胞中表 🐵 达
| CXCR4 | 化学趋 🪴 化 🐠 因子受 🦅 体,在 |造血干细胞和祖细胞中表达
| Sca1 | 表面抗 🐧 原,在 |小鼠造血干 🐬 细胞中表达