🌼 湖北小鼠心肌原代干细胞(小鼠心肌细 🌻 胞系h9c2)
- 作者: 朱星莼
- 来源: 投稿
- 2025-10-10
1、湖北小 🌵 鼠心肌原代干细胞
湖北小鼠心肌原代干细 🐳 胞
定义湖北小鼠心肌原代干细胞是直接从湖北小鼠心脏组织中分离和培养的未分化的细胞 🐋 ,具有自我更新和 🌲 分化为心肌细胞的能力。
特点自我更新能力能:够无限增殖并保 🐳 持其干细胞特性。
分化能力 🕸 能:够分化为心肌细胞心、血管内皮细胞和其他心脏谱系细胞。
免疫原 🐺 性低 🦅 :与同种移植患者匹配时免疫排斥反应较低。
易于获取 🌼 :可从小鼠心脏组织中轻松分离和培养。
用途湖北 🐯 小鼠心肌原代干细胞已广泛用于各种心血管疾病的研究和治疗,包括:
心 🌳 脏重 🦄 建:替代受损或死 🕊 亡的心肌组织。
药 🐅 物筛选 🌴 :测试药物的毒性、疗效和机制 🌳 。
疾病建模:研究心血管疾 🕊 病的病理生理学 🌷 。
再生医学:修复 ☘ 心脏损伤并改善心脏 🐵 功能。
优点高度可塑性:分化 🌼 潜力高 🌺 。
易于培养:可长期在培养 🦍 皿中扩增。
动物模型:为 🐎 人类心血管疾病 🍀 的研究提供了可靠的动物模型。
限制移植效率:体内移植后的存活和分化率较低 🌳 。
免疫 🐟 排斥:尽管免疫原性低,但仍可能发生免疫排斥反 🐧 应。
道德问题:使用小鼠作 🍁 为来源可 🦋 能会引发道德问 🌺 题。
前景湖北小鼠心肌原代干细胞在心血管疾病治疗领域具有广阔的前景。 ongoing 研究正在集中于提高移植效 🐕 率、降。低免 💐 疫排斥反应和探索新的应用
2、小 🪴 鼠心 🐯 肌细胞系h9c2
h9c2 细 🐘 胞 🦁 系 🐦
名 🌸 称:小鼠 🦅 胚胎心脏纤维母细胞 🐕 系 h9c2
来源:C57BL/6J 小鼠的 9.5 日龄胚胎心脏组 🕸 织
形态:上皮样多边形细胞 🌺 形,成单层细胞
生长条 🐶 件:
培养基 🌷 培养基:Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) 含 🐧 ,胎 10% 牛 🦁 血清
培 🌵 养温 🦊 度 🐟 :37°C
二氧 🦍 化碳 🌸 浓度 🕷 :5%
特性:保留 🐋 了心脏细胞 🐝 的收缩性,可自发 🦉 跳动
对心肌梗死和心律失 🦁 常模型研究非常有用
可分化为 🐴 心肌细胞样表型表,达心肌肌钙蛋白和肌球蛋白
对某些心血管药物敏 🐠 感
应用:心脏病 🐋 机制 🦅 的 🦟 研究
药物筛选和毒 🌳 性学研究
心 🕷 肌组织工程
心血管疾 🦊 病 🕷 的体外 🦟 建模
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3、小鼠心肌 🌴 细胞分化试剂盒 🐴
小鼠 🌴 心肌细胞 🦋 分化试剂盒 🐬
产品简介小鼠心肌细胞分化试剂盒是一种优化过的试剂,用于从胚胎干细胞 (ESC) 或诱导多能干细胞分化 (iPSC) 出功能性心肌细胞。该试剂盒,包。含一系列因子 🐼 和培养基补充剂旨在模拟心脏发育期间 🐛 发生的信号通路
试剂盒 🌹 成分 🍁
心肌细胞分化 🐞 因子 🐳 :Wnt3a、Activin A、BMP4、VEGF
培养 🍁 基 🐡 补充剂 🦅 :B27 Supplement、N2 Supplement、Insulin、Transferrin
其他试剂:小分 🍁 子抑制剂、抗 🐅 生素
使用说明1. ESC/iPSC 培养:将 ESC/iPSC 在标准条件下培 🌹 养在低附着物培养皿中。
2. 分化诱导 🌴 :在分 🪴 化培养基中悬浮 ESC/iPSC,含有试剂盒中的分化因子。
3. Embryoid 体 (EB) 形成:培 🐠 养 812 天,让 🐞 EB 自发形成。
4. 心肌细胞 🦍 选择:使用抗 🦢 心肌蛋白或抗肌钙蛋白抗体进行心肌细 🐎 胞选择。
5. 心肌细胞分化:将选择的细胞转移到成熟 🐴 培养基中,让其分化为 🌴 功能性心肌细胞。
优点高效率:优化过的 🐅 因子组合可促进高效 🌷 ESC/iPSC 分化为心肌 🌷 细胞。
功能性:产生的心肌细胞表现出收缩和电生理特性,使 🐵 其适合用于研 🕸 究和再生医学。
方便:提供所 🐠 有必 🐱 要的试剂,简化 🪴 了分化程序。
可扩展:该 🦈 试剂盒 🐠 适 🐋 用于大规模心肌细胞生产。
应用心脏发育和疾病 🦅 的研究
心脏 🦈 再 🌹 生医学 💐
药物筛 🕊 选
毒性 💮 检 🌷 测
4、成年小鼠心肌细 🐕 胞提 🦈 取
成年小鼠 🐒 心肌细胞提取
材料成 🐳 年 🐴 小鼠 (812 周大)
Hank's 平衡 🌳 盐溶 🌵 液 (HBSS)
酶解液(0.1% 胰蛋白酶、0.1% 胶 🐯 原 💐 酶 🌿 )
FBS(胎牛血清 ☘ )
培 🐱 养基 🦈 (DMEM/F12、10% FBS)
步骤1. 获 🐡 取心肌 🌳 组织:
处死小鼠,取出心脏并 🦋 置于 HBSS 中。
切除心 🦆 房 🌷 和心室,仅保留心肌组织 🦅 。
2. 酶 🌻 解 🐋 :
将心肌 🦢 组织切 🐠 碎 🦟 成小块。
将 🦅 HBSS 中 🐵 的小块组织轻轻振荡 10 分钟。
加入酶解液,轻轻振 🦋 荡 3045 分,钟或直至组织解离成单个细 🐬 胞。
3. 离 🍁 心分 🌸 离 🍁 :
用 HBSS 洗涤细 🐡 胞悬液 🌿 两次,每次 5 分 💐 钟,1200 rpm 离心。
收集 🌳 沉 🌳 淀细胞。
4. 制 🐺 备纯化心肌细胞:
将沉淀细胞加入培 🐋 养基中,轻轻吹打成单细胞悬液。
加 🌲 入 FBS,使其终浓度为 10%。
轻轻离心 🦁 5 分 🕊 钟,1200 rpm。
收集 💮 沉淀心 🐅 肌细胞,加入新 🌹 鲜培养基。
5. 细胞培养 🌼 :
将心肌细胞接种到培养板或培养 🦍 瓶 🐱 中。
将细胞置 🐠 于 37°C、5% CO2 的培养箱中培养 🦅 。
注意事 🐼 项:
整 🐈 个过程中 🦊 保 🦈 持无菌条件。
酶解 🦄 时间根据心肌组织的质地而异。
纯 🌻 化心肌细胞时 🐵 ,FBS 可,以吸附非心 🐵 肌细胞如成纤维细胞和内皮细胞。
心肌细胞在培养基 🌷 中可以存活数天至数周。