小鼠胚胎干细胞传代(小鼠 🐡 胚胎干细胞最早于1981年获得)
- 作者: 张逸橙
- 来源: 投稿
- 2025-07-13
1、小鼠胚胎干细胞 🦁 传代
小鼠 🌵 胚胎干细胞传代
简介小鼠胚胎干细胞 (ESC) 是一类 🦟 具有高度自我更新能力和多向分化潜能的干细胞,可分化为各种体细胞类型的。ESC 传代培养对于研究干细胞生物学、疾。病建模和组织修复至关重要
传代方法ESC 传代通常通过酶促消化和机 🌹 械剪切完成。
步骤:1. 酶促消化:用胰蛋白酶或胰酶消化 ESC,使其从 🌴 培养基板中分离出来。
2. 机械 🕷 剪切:用移液枪或细胞刮刀将细胞 ESC 团分散成单细胞或小细胞团。
3. 重新接种 🍁 :将分散的细胞重新接种到新鲜 🦟 的培养基板中,通 🌷 常使用 1:4 至的分 1:8 裂比例。
4. 培养:ESC 在 🌸 富 🦍 含生长因子的培养基中培养,通常是 🐞 2i 条件(MEK 和 GSK3 抑制剂)。
传代频率ESC 的传代频率取决于细胞系和培养条件 🐞 。通常,ESC 每 23 天传代。一次
传 🐘 代过程中遇到的挑战
ESC 传代 🌵 过程中可能会 🍁 遇到一 🦟 些挑战,包括:
细 🌵 胞分 🐯 化:ESC 在传代过程中可能会分化,失去其多向分化潜 🐘 能。
细胞死亡:酶促 🕊 消 🦆 化和机械剪切可能会导致细胞死亡。
污染:培养基、材料和操作不当可能会 🐝 导致培养物受到细菌或真菌污染。
克服挑战的 🌾 策略
优化培养条件:根据特定细胞系的需要调整 🐠 培养基成分、生长因子浓度和培养基更 🍁 换频 🐴 率。
使 🐺 用柔性消化:选择 🐧 对细胞伤害较小的消 🐺 化酶,例如 TrypLE Express。
使用胶原酶胶 🦅 原酶 IV:可 IV 将细胞团温和地分散成 🐎 单细胞。
定期监测污染:通过显 🌷 微镜检查和无菌 🐛 操 🌷 作预防和检测污染。
结论小鼠 ESC 传代是一个 🦆 关 🐕 键技术,用于研究 🐎 干细胞生物学和应用。通,过 ESC 优,化。培养条件和克服挑战可以有效维持的自我更新能力和多向分化潜能从而进行持续的研究和应用
2、小鼠胚 🌷 胎干细胞最早于1981年获得
错误。小鼠胚胎干细胞最早于1981年 🐬 。分离 🐬 获得
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3、小鼠胚胎干细胞可以来自 🌲 囊胚中的
内细胞团4、小鼠胚胎干 🐶 细 🌹 胞经定向诱导
定 🐒 向诱导胚 🦅 胎干细 🐯 胞 (iPSC)