小鼠神经干细胞价格（小鼠神经干细胞的分离及培养实验）
- 作者: 郭珺珩
- 来源: 投稿
- 2024-12-11
1、小鼠神经干细胞价格
小鼠神经干细胞的价格因供应商、细胞数量和培养环境而异。以下是一些估计值：
供应商Stem Cell Technologies：每百万个细胞 200 美元至 500 美元
Thermo Fisher Scientific：每百万个细胞 250 美元至 600 美元
Lonza：每百万个细胞 300 美元至 700 美元
细胞数量100 万个细胞：200 美元至 700 美元
500 万个细胞：1000 美元至 3500 美元
1000 万个细胞：2000 美元至 7000 美元
培养环境无血清培养基：比血清培养基价格高 10% 至 20%
3D培养：比 2D 培养价格高 20% 至 50%
其他因素运输成本
细胞纯度和质量
特殊培养要求
注意：这些价格仅为估计值，实际价格可能会有所不同。建议直接联系供应商以获取最新定价。
2、小鼠神经干细胞的分离及培养实验
材料小鼠脑组织
Hanks' 平衡盐溶液 (HBSS)
胰蛋白酶溶液
胶原酶溶液
DNase I
神经基础培养基：DMEM/F12、B27 补充剂、EGF、FGF2
培养皿和培养瓶
实验步骤1. 小鼠脑组织分离
处死小鼠，在无菌条件下取出脑组织。
用 HBSS 冲洗脑组织，去除血迹。
用锋利的剪刀或手术刀将海马体和大脑皮质小心剥离。
2. 酶促消化
将脑组织切成小块，并放入含胰蛋白酶和胶原酶的溶液中。
在 37°C 下孵育，偶尔振荡。
3. 细胞分离和纯化
通过 100 μm 细胞滤网过滤细胞悬液。
用含有 DNase I 的 HBSS 洗涤细胞。
使用神经干细胞标记物（例如 Nestin 或 Sox2）进行细胞分选。
4. 细胞培养
将分选的细胞接种到涂有神经基础培养基的培养皿或培养瓶中。
在 37°C、5% CO2 的培养箱中培养细胞。
每隔 23 天更换培养基。
5. 神经分化
为了诱导神经分化，可以在培养基中加入神经生长因子 (NGF) 或脑源性神经营养因子 (BDNF)。
培养 714 天后，可观察到神经元和胶质细胞的分化。
提示保持无菌条件至关重要。
优化酶促消化的持续时间和胰蛋白酶/胶原酶的浓度，以获得最佳细胞产量。
使用神经基础培养基，为神经干细胞提供生长和分化的必要营养成分。
通过免疫细胞化学或 RTPCR 分析神经分化标记物，以确认神经干细胞分化。
3、小鼠神经干细胞价格是多少
我不具备有关小鼠神经干细胞价格的信息。如果您有兴趣获得此信息，请联系生物医学研究用品供应商或研究机构。
4、小鼠神经干细胞提取方法
小鼠神经干细胞提取方法
材料：小鼠胚胎（E12.514.5）
无菌器材和培养液
Hanks' 平衡盐溶液 (HBSS)
0.25% 胰蛋白酶EDTA
神经基质 (Neurobasal?A) 培养基
神经基质生长因子补充剂 (GlutaMAX?I、B27 补充剂、penicillinstreptomycin)
步骤：1. 收集胚胎：从怀孕时间为 E12.514.5 的母鼠中摘取胚胎。
2. 冲洗胚胎：用 HBSS 冲洗胚胎，去除多余的血液和组织。
3. 分离脑部：用无菌剪刀剪下胚胎头部，去除头皮和颅骨，暴露出脑部。
4. 消化脑部：将脑部转移到含有 0.25% 胰蛋白酶EDTA 的 HBSS 中，在 37°C 下孵育 1530 分钟，直至脑组织完全消化成单细胞悬液。
5. 终止消化：用神经基质培养基稀释胰蛋白酶EDTA，以终止消化过程。
6. 离心收集细胞：在 1200 rpm 下离心悬液 5 分钟，收集细胞沉淀。
7. 重悬细胞：用神经基质培养基重悬细胞。
8. 分离神经干细胞：通过悬浮培养去除非贴壁细胞。将细胞悬液接种到涂有多聚赖氨酸或明胶的培养板上。培养 24 小时后，将漂浮的细胞移除。
9. 培养神经干细胞：将贴壁的细胞培养在神经基质培养基中，并定期更换培养基。
提示：使用无菌技术进行所有步骤，以防止污染。
确保胚胎处于无菌状态。
消化时间会因胚胎大小和发育阶段而异。
悬浮培养步骤可去除非神经干细胞。
神经干细胞可以在含有生长因子的神经基质培养基中培养数周或数月。
