小鼠 🌲 干 🦉 细胞注射方式（小鼠脂肪干细胞怎么提取）
- 作者: 刘雨檐
- 来源: 投稿
- 2025-04-17
1、小鼠干 🌴 细胞 🌻 注射方式
小鼠干细 🌷 胞注射
注射 🌸 途 🐎 径：
静脉注射 (IV)：将细胞注射到尾静脉或股静脉，通过血液循环靶 🌸 向全身器官。
腹腔注射 🐡 (IP)：将细胞注射到腹腔，定位到腹腔器官和肿瘤。
肌肉注射 (IM)：将细胞注射到股 🌻 四头肌或其他肌 🌻 肉组织，定位 🦉 到局部区域。
眼内注射 (IVT)：将细胞注射到眼球玻璃体，靶 🐠 向眼 💮 部疾病 🕸 。
注射液准备 🐯 ：
将干细胞悬 🌲 浮在无血清 🐕 培养基或盐水中 🐟 。
调 🦟 整细胞浓度至所需的剂量。
注 🪴 射程序 🌸 ：
1. 麻 🪴 醉小 🐳 鼠。
2. 消 🌷 毒注射部位。
3. 使用无菌注 🦉 射器 🐈 和 🕸 针头。
4. 根据所选的注射途径注射细 🌻 胞 🐳 悬浮 💐 液。
5. 轻轻按 🐺 摩注射部位。
剂量：剂量取决于 🐝 干 🪴 细胞类型、疾病模型 🐈 和注射途径。
通常的剂量范 🐶 围为 10^510^7 个细胞。
注射后的监测 🐟 ：
监测小鼠的健康状况和行为 🐝 。
使用成像技术（如生物 🐛 发光或荧光）跟踪细胞移植物 🌼 。
定期进行组织采样以评估细胞 🐳 植入和分化。
注 🕸 意 🌻 事 🌻 项：
确保使用 🦅 无 🐳 菌技 🍁 术。
避免过度注射，因为这可能 🦉 会损害组织。
在免疫抑制动物中注射异种干细胞时 🦈 ，请使用适当的免疫抑制方案。
2、小鼠脂 🐯 肪干细胞怎么提取
小鼠 🐯 脂 🐒 肪干细胞 🌷 提取步骤
材料：成 🐵 年小鼠
无 🐈 菌手 🐞 术工具（镊 🌴 子、剪刀）
生理 🦍 盐水 🌻
胶 🐬 原酶溶 🦁 液 🐼 （0.2%）
离心管培养基
细胞 🐛 培养瓶 🪴 或板 🌹
步骤：1. 麻醉小鼠并剃毛：使用异氟 🐵 烷麻醉小鼠，然后在手术 🐧 区域四周剃毛。
2. 消毒手术 🌲 区域 🌸 ：用无菌酒精擦拭 🌿 手术区域。
3. 切口取脂：用无菌镊 🦟 子和剪刀，沿，着侧腹部 🦄 切开 🕊 一小口取出约 23 克脂肪组织。
4. 剪 🐛 碎脂肪：将脂肪 🐺 切成小 🐟 块，并放在盛有胶原酶溶液的离心管中。
5. 消化脂肪：在 37°C 下孵育 4560 分钟，摇，晃离心 🌿 管帮助胶原酶 🦊 消化脂肪组 🐞 织。
6. 过滤：使用过滤 100 μm 网过滤消化 🐦 后的脂肪组织，去除组织碎片和其他杂质。
7. 离心：将滤液 🌿 转移到 🦋 新的离心管中，并以离心 300 x g 分 10 钟。
8. 收集上 🌵 清液：小心地吸取并丢弃上清液。
9. 重 🌵 悬细胞：用适当的培养基重悬细胞，以去除残留的胶原酶。
10. 再离心再：以离心 🐎 300 x g 分 10 钟 🐬 。
11. 收集细胞 🐱 ：小心地吸取并丢弃上清液 🐎 。剩。余的细胞团即为小鼠脂肪干细 🐵 胞
提示：使 🌾 用健康成年小鼠。
维 🦊 持 🦆 无菌环境，以防止污染。
在提取过 🌳 程中小心操作，避免损坏细胞。
调整消化时间和离心 🐝 速度，以获 🦟 得最佳的细 🌵 胞回收率。
可以使 🌲 用流式细 🐵 胞术或 🐝 免疫组织化学方法验证脂肪干细胞的纯度和表面标志物表达。
3、干细胞注射方 🐡 式 🐦 有几种
干细胞注射 🐡 方式主要有以下几种：
静 🐞 脉注射：将干细胞注入血 🐛 管中 🐟 ，通过血液循环分布到全身。
动脉注射：将 🌷 干细胞注入动脉中，直接输送到目标器官或组织。
局部注射：将干细 🐱 胞直接注射到受损或患病部 🐟 位，如关节、椎、间盘心脏等 🦁 。
鞘内注射：将干细胞注入脊髓硬膜外 🍀 腔或脑脊液中，用 🐈 于治疗中枢神经系统疾病。
眼内注射 ☘ ：将干细胞注射到眼球内，用于治疗眼部疾 ☘ 病 🐞 。
鼻内注射：将干细胞注射 🦢 到鼻腔中，用于治疗鼻腔或其他上呼吸道 🦄 疾病。
经皮注射：使用 🐞 细针将干细胞注射 🦁 到皮肤下用，于治疗皮肤损伤或脱发。
4、小鼠脂肪干细 🌹 胞提取 🌻
小 🐅 鼠脂肪干细胞提取
材料：小鼠
胰蛋 🌼 白酶
肥 🍀 胖细胞溶解缓冲液
PBS培养 🪴 基（含胎牛血清和 🐈 抗生素 🐅 ）
培养皿移液枪
细胞 🐳 培养箱 🐠
步骤：1. 小 🐎 鼠处死：
用二氧化碳或 🐶 异氟醚处死 🐛 小鼠。
2. 消 🦋 毒和解剖：
用 🐺 70% 乙醇消毒小 🦢 鼠腹部 🐟 。
切开腹部 🐎 ，暴露出内脏 🌴 脂肪 🐕 。
3. 切 🌾 除 🕷 内 🐵 脏脂肪：
用无菌镊子小心地切 🐯 除内脏脂 🌾 肪 🐦 。
将脂肪组织放入 🐛 无菌培 🐝 养 🐳 皿中。
4. 消化脂肪 💮 组 🐎 织：
加入胰蛋 🐋 白酶溶液（浓度和时间因脂肪组织大小而异），轻轻搅拌。
将混合物 🌸 放入细胞 🌷 培养箱（37°C，5% CO2）中消化 3060 分钟。
5. 停 🕸 止消化：
加入与胰蛋白酶溶液体积相同的肥胖细胞溶解缓冲液，轻轻搅拌 🐺 。
离 🐕 心 5 分 🦢 钟 🌷 ，1200 rpm，4°C。
6. 洗 🌷 涤并 🐡 重悬细胞 🦁 ：
用 PBS 洗涤细胞沉淀 🌷 3 次。
用培 🐦 养基 ☘ 重 🐯 悬细胞。
7. 过 🐼 滤 🦄 细胞：
用 100 μm 细胞过滤器过滤细胞悬液，去除未消化的组织碎片 🐒 。
8. 培 🐵 养细 💐 胞 🦊 ：
将 🐼 过 🐡 滤后 🦁 的细胞悬液接种到培养皿中。
在细胞培养箱 🌴 （37°C，5% CO2）中培 🐘 养细胞。
9. 更换培养 🌿 基：
每 23 天 🌳 更换一次 🪴 培 🐦 养基。
10. 收获 🐕 细 🌿 胞：
当细胞达到 8090% 汇合度时，用胰蛋白酶 🦈 溶液消化细胞。
离 🐱 心细胞并用 PBS 洗涤。
细 🌹 胞形 🦟 态 🐵 ：
小鼠脂肪干细胞 🐴 呈纺锤状或多 💐 角形，具有较大的细胞核和明亮的胞质。
应用：小鼠脂肪干 🌹 细胞可用于研究肥胖、糖尿病和其他代谢疾病。
它 🌷 们也可用于组织工程和再生 🐱 医学等领域。
