小鼠原 🌷 代干细胞有哪些(小鼠干细胞原代培养)
- 作者: 郭星奈
- 来源: 投稿
- 2025-04-13
1、小鼠原代干细 🐈 胞有哪些
胚胎干 🐒 细胞 🐎 (ESC)
从胚 🪴 泡内细 🐞 胞 🐡 团中获取
全 🦆 能性,可以分化成任何细 🐟 胞类型
胚胎祖细 🌳 胞 (EC)
从胚 💮 胎外滋 🌷 胚层中获取 🐠
多能性,可以分化成体 🐒 细胞系 🪴
成 🦢 体干细胞 🌳
从 🌲 各 🌾 种组织中获取,如骨髓 🍀 、皮肤和血液
多能性,可以分化成特定组织 🌷 类型的细胞
诱导多能干 🪴 细胞 (iPSC)
从体细胞中重新编程而来的,具有类似于的 ESC 特 🌻 ,性但具有免疫匹配 🌳 的优势
腺 🍀 泡祖 🐱 细胞 🐬 (AEC)
从 🐳 肺部组 🐺 织中获取 🐳
可 🌼 以分化成肺上皮 🦟 细胞
神经干 🐛 细胞 (NSC)
从大脑和脊髓中 🐋 获取
可以分化成神经元 💮 和神经胶质细胞
间充质干 🌳 细胞 (MSC)
从骨髓、脂肪组 🦆 织 🐬 和脐带血中获 🌵 取
多能性,可,以分化成多种细胞类型 🐕 如骨细胞、软骨细胞和脂肪 🍁 细胞
造 🐵 血 🦈 干 🦍 细胞 (HSC)
从骨 🐒 髓和 🐛 脐带血中获取
可以分化成所有的血细胞类 🐱 型
血管周细 🐎 胞 (PC)
从 🦢 血管周围组织中获 🦈 取 🦟
多能性,可以分化成内皮细胞、平滑肌细胞 🦍 和 🐒 外周神 🌷 经细胞
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2、小鼠干细胞原代 🐠 培养 🐶
小鼠 🌴 干细 🦁 胞原代培养
目的:建立小鼠干细 ☘ 胞系用于研究或治疗 🌼 应用
保持干细胞的自我更 🐎 新和 🦍 分化潜能
材料:小鼠 🐼 胚胎或骨 🦈 髓 🌻
无血清培养基 🌸 (如DMEM/F12)
胎牛血 🌾 清 🐛 (FBS)
LIF(白细胞抑制因 🌷 子)
2巯 🐛 基 💮 乙 🐶 醇
聚 🦊 ornithine和 🐘 层粘连蛋 🕸 白
抗生素 🐵 抗 🌵 /真菌剂
步骤:1. 胚 🐘 胎或骨 🐯 髓采 ☘ 集
使用 💮 无 🐛 菌技术,从胚胎或骨髓 🦅 中提取细胞。
2. 培养 🐎 皿 🐘 包被
用聚ornithine和层粘连 🐺 蛋白包 🌲 被培养皿,以促进细胞附着。
3. 细 🌺 胞 🦅 接种
将细 🍀 胞悬浮在培养基中,接种 🐼 到 🦉 包被的培养皿中。
添加LIF因 🌻 子以维持干细胞自我更 🐎 新。
补 🌾 充2巯基乙醇以防止氧化应 🕷 激。
4. 培 🌷 养 🐺
将细胞培养 🐦 在 🐟 37°C、5% CO2的培养箱中。
定期更换培 🦋 养基(每23天 🐎 )。
在 🐅 细胞达到 ☘ 约80%汇合度时传 🦉 代。
5. 传 🌷 代 ☘
用Accutase或TrypsinEDTA消 🐳 化 🐳 细胞。
将细胞悬浮在新鲜培养基 🦆 中,重新接种到新的包被培养皿中。
6. 分 🐛 化 🐞
通过调节培养条件或添加诱导因子,可以诱导干细胞分化为特定的细胞 🦉 类型。
注意事项 🍁 :
保 🍁 持无菌环境以防止污 🌷 染。
定期监测细胞生长和形态 🕸 。
如果细胞出现分化迹象或不再自我更 💐 新,应更换传代或重新建立原始培养物。
小鼠 🐛 干细胞培养需要高度专 🕊 业化的 🦆 技术和经验。