天津小鼠原代干细胞(小鼠干细胞 🌸 原代培养)
- 作者: 张南湘
- 来源: 投稿
- 2025-04-14
1、天 ☘ 津小鼠原代干细 🌾 胞
天 🐴 津 🐳 小鼠 ☘ 原代干细胞
定义天津小鼠原代干细胞(TEMPSC)是从天津小鼠胚胎组织中分离和培养的 🌷 未分化的细胞。这。些细 🐺 胞具 🦟 有自我更新和分化成各种细胞类型的能力
来源小 🦉 鼠胚胎内细 🌺 胞团
胚胎外 🍀 组织 🦋 ,如胎盘和卵黄囊 🐦
特性自我更新能力 🐟 能:TEMPSCs够在培养基中无限增殖,同时保持 🐶 其未分化状 🐬 态。
分化能力:TEMPSCs可以分化成 🌷 所有胚层细胞,包括内胚层、中胚层和外胚层。
免疫相容性:由于是从同系小鼠中分离得来,因此TEMPSCs与,受体的 💮 免疫系统相容使其成为细胞移植和再生医学的理想候选者。
应用疾病建模:TEMPSCs可用 🐺 于研究人类 🌵 疾病和开发新的治疗方法。
细胞移植:TEMPSCs可分化 🪴 为特定细胞类型,用于治疗 🪴 疾病和组织损伤。
再 🐘 生医学:TEMPSCs可用于再生受损或退化的组织和器官。
毒理学和 🦈 药物开发:TEMPSCs可用于评估药物和化学物质的毒性,以及开发新的治疗方法。
优势与人类细胞相似,使其成为研究人 🐧 类疾 🐎 病 💮 的宝贵工具。
易于遗传操作,便于 🐼 研究基因功能和开发基于基因的疗法。
获得和培 ☘ 养相对容易,使其成为研究和应用 🌹 的经济选择。
局限性分化能力可能因细胞系 🦆 而异,需要进行仔细筛选和表征 🕷 。
存在形 🌲 成瘤的风险,需要采取预防措 🍀 施。
结论天津 🐎 小鼠原代干细胞是一种多能干细胞,具有 🐕 广泛的应用潜力。它们为研究疾病、开。发新治疗方法和再生医学的进步提供 🐋 了宝贵的工具
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2、小鼠干细胞原代培 🦄 养
小鼠 🦋 干细胞原代 🦅 培养
材料小 ☘ 鼠胚胎(E12.514.5)
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)
胎 🪴 牛血 🦉 清 (FBS)
白血病抑 🌼 制因子 (LIF)
2i 抑 🐝 制剂 🍁 (PD 和 🌲 CHIR99021)
胰 🌺 蛋白 🌲 酶 🦈
灭活 🌵 血清 🦆
培养板培养 🐒 基培养瓶
步骤1. 获取胚胎和分离胚胎干细胞 🍁 (ESC)
从怀孕 🌺 的小 🐕 鼠中取出胚胎。
将胚 🦁 胎放入盛有冷 🐛 DMEM 的 🐈 培养皿中。
去除头 🐴 、内脏和胎盘。
将 🕷 胚胎体用胰蛋白酶消化 510 分钟。
加入灭活 🌷 血清停止消化。
将细胞离心并重悬于含有 LIF 和 🐳 2i 抑制剂的培 🕊 养基中。
2. 培 🐛 养 🌷 ESC
将细胞接种到涂有明胶 🐵 的培养板中。
每 23 天更换培 🦆 养基。
培养 ESC,直到形成聚集的 🌲 细胞群体。
3. 传代 🐈 ESC
当 ESC 群体达 🦢 到 7080% 的汇合度 🌺 时,可以进行传代。
用胰蛋白 🌷 酶消化 ESC。
将细胞 🦢 离心并重悬于新鲜的培养基中。
将 🌲 细胞接种到 🦋 新的培养板中。
4. 冷冻保 🐶 存 🦁 ESC
收集 🌴 ESC 群体并离心。
重 🐅 悬细胞于冷冻 🐟 培养基中。
将细 🐳 胞 🌷 分 🌷 装到冷冻管中。
缓慢冷却 🦄 至 80°C。
将冷冻管转移至 🐟 液氮罐中。
要点维持 ESC 培 🐶 养物的无菌条件 🐦 至关重要。
培养基应 🦋 每 23 天更换一次。
2i 抑制剂对于维持 ESC 的自我更新和多能性至关 🦋 重要。
传代 🐕 ESC 时,应避免过度消化。
冷冻保存 🦄 ESC 可用于长期保存和将来使用。
3、小 🐞 鼠 🌲 精原干细胞
小 🐒 鼠精原干细胞 🐦 (mESCs)
定义小鼠精原干细胞 (mESCs) 是来自小鼠早期胚胎的未 🐘 分化多能干细胞。
特点多能性 🌷 能:够分化为胚胎外三胚层的所有细胞类型 🐅 (内胚层、中 🌺 胚层和外胚层)。
自我更新 🌾 :在培养皿中 🌲 无限增殖,同 🐬 时保持多能性。
无瘤性:不会形成致瘤性 🍀 细胞团。
表 🪴 征标志物表:达 Oct4、Sox2、Nanog 和 Rex1。
来源mESCs 从小鼠胚胎的内细胞团(ICM)中分离得到。ICM 是胚胎中的一个细胞团,将。发育为 🦄 胚胎本体
应用mESCs 用 🐛 于以下领域:
发育生物学研究研 🪴 究:胚胎发育和分化机制。
疾病建模:在培 🐠 养皿 🌸 中创建人类疾病的模型,以研究其原因和治疗 🐬 方法。
再生医 🦆 学生:成特定的细胞类型以用于治疗组织损伤和疾病。
优势易于培 ☘ 养和操作。
多能性使它们能够分化 🍁 为广泛的细胞类型。
稳定性使 🍀 其成为研究胚胎发育和疾病的可靠模型。
局限性小鼠和人类胚胎发 🕊 育之间存在差异 🐕 ,这可能会影响在 🍁 人类中应用的结果。
培养条件会影响细胞的稳定性和分 🐒 化潜力。
监管mESCs 的使用受 🦢 到道德和监管考虑因 🦢 素的约束。在某些国家/地区使用,进 mESCs 行。研究需要许可或批准