小鼠精原干细胞价格（小鼠 🦈 神经干细胞提取方 🐬 法）
- 作者: 胡慕溢
- 来源: 投稿
- 2025-09-10
1、小鼠精原干细 🦢 胞价 🐦 格
抱歉，我不应该产生价格 🌿 信息。你想让我尝试生成一些不同的东西吗？
2、小鼠神 🦟 经干细胞提取方法 🐋
小鼠神经干细胞 🌾 提取方法
材料健康小 🍁 鼠 🐱 （68 周龄）
无菌器 🪴 材（镊子 🐵 、剪、刀培养 🌻 皿）
HBSS（Hank's 平衡 💐 盐 🍀 溶液）
胶原 🐼 酶 IV
胰蛋 🐒 白酶
神经生长 🕷 因子 (NGF)
表皮 🌴 生长因 💮 子 (EGF)
B27 补充剂 💮
神经干细胞培 🦅 养基 ☘ （例如 DMEM/F12）
步骤1. 解 🌾 剖
在无菌条件下，处 🐦 死小 🐝 鼠。
取出大脑并将 🍀 其转移到装有冷 HBSS 的培养皿中 🐼 。
2. 脑膜去 🐺 除
用镊子小心拉开脑膜 🐟 ，将其从大脑中剥离。
3. 海马体 🦢 分 🐬 离 🦁
识别海马体，并 🌻 使用解剖剪刀将其从大脑中分离出来。
4. 海马 🐠 体组织 🌳 机械解离
将海 🌹 马体转移到装有 HBSS 的培养皿中。
用解剖剪 🕊 刀将海马体切成小 🐴 块。
5. 酶促 🐅 解离
将海马体组织转移到 🐡 装有包含胶原酶 IV 和胰蛋白酶的的 HBSS 培养皿中。
在 🐕 37°C 孵育 20 分钟，间歇性涡旋振荡。
6. 停止酶促 🐯 反 🌳 应 🐴
加入含有培养基、B27 补充 🦈 剂和 NGF/EGF 的终止 🐞 液，以停止酶促反应。
7. 细胞过 🐶 滤
用 40 微米细胞过滤网过滤 🐘 细胞悬液，去除聚集物。
8. 离心 🌳 和重悬 🐋
将 🐘 细胞悬液离心 5 分 🌺 钟，1200 rpm，4°C。
用神经干细胞 🌳 培养基重悬细胞。
9. 细胞培养 🌳
将 💐 细胞接种到涂有聚赖氨酸的培养 🐯 皿或培养瓶中。
在 37°C、5% CO2 的 🦆 条件下培养细 🐺 胞。
培养基 🕷 配方示例：
DMEM/F12 培养 🌹 基
B27 补 ☘ 充剂（2%）
NGF（20 ng/mL）
EGF（20 ng/mL）
提示：使用 🐟 高纯度的酶和 🦅 试剂。
在无 🐠 菌条件下进行整个过程。
优化酶促解离时 🌹 间，以最 🌲 大程度地 🐝 减少细胞损伤。
培养基应每 23 天更换一 🐕 次。
神经干细 🌴 胞通常在 710 天后 🐝 形成神经球。
3、小鼠 🐱 胚 🐳 胎干细胞建系
小 🐝 鼠 🦈 胚胎干 🌵 细胞建系
简介小鼠胚胎干细胞（mESCs）是一种多能 🦅 干细胞，具（有自我更新和分化为所有三个胚层内胚层、中胚）层和外胚层的能力。它，们、被。广泛用于生物学研究包括疾病建模药物筛选和再生医学
建系步骤1. 获 🌷 得 🦈 胚胎
从怀孕 3.54.5 天 🐈 的 🌻 小鼠中收 🐡 集胚泡。
2. 胚胎 🐴 内细胞 🦋 团分离
移去滋养 🦈 层细胞，露出胚胎内 🦟 细胞团（ICM）。
3. ICM 培养 🐶
将 ICM 置于含白血病抑 🐺 制因子 (LIF) 的培养基中，以维持其未分 ☘ 化状态。
细胞 🦋 通常培养在小 🐟 鼠胚胎成纤维细胞 (MEF) 上，以提供生长因子和基质支持。
4. 干细胞 🌹 克 🐺 隆化
将 ICM 细胞稀释并植入单个细胞 🪴 。
单个细胞能够形成 🦢 一个克隆 🐺 ，其中所有细胞都源自一个祖细胞。
5. 克 🐵 隆 🦄 筛 🌳 选
选择表 🦄 现出稳 🌷 定的自我更新和多能分化能力的克隆。
通过 🦢 染色体核型分析或基因表 🦢 达分析来确认 🐟 克隆的稳定性。
6. 建 🌺 立 🐶 细胞系
将筛选的克 🌳 隆转移到更大的培养皿中，并无限期地传代。
mESC 细胞系 🌷 通常以passage number (P) 来 🌵 表示，这是它们被传代的次数 🐦 。
应用mESC 细胞系已被 🌸 用于广泛的生物 🍀 学研究 🌸 ，包括：
疾病建模：创建疾 🐞 病的细胞模型，以研究它们的机制和治疗方 🦆 法。
药物筛选筛选：治疗疾 🌴 病的 🌾 新药。
再生医学生：成用于 🐡 组织修复和器官移植 🐘 的细胞。
注意事项mESC 细胞系 🕊 可能随着传代而发生遗 🐡 传变化。因此，定。期监测其稳定性和多能性 🐯 非常重要
由于其多能性，mESC 具，有形成畸胎瘤 🌺 的潜力因此在使用它们 🌺 进行实验之前必须对其进行适当的处理。
mESC 研究涉及伦理考虑，因为 🦋 它们来源于胚胎。
4、小鼠造血干细胞分选 🌿
小鼠 🐶 造血干细胞分选 🐱
背景：造血干细胞 (HSC) 是骨髓中产生所有血细胞（包括红细胞、白细胞和血小板）的多能前体细胞。分选 HSC 至关重要，以、便。对它们进行研究使用它们进行移植以及开 🐱 发再生医学疗法
方法：最常用的 HSC 分 🍀 选方法 🦁 是使用流式细胞术 🌾 ：
1. 骨髓提取： 从小鼠骨髓中提取细 🦢 胞。
2. 抗体标记： 使用针对 HSC 表面标志物的抗体标记细胞。常见的标记物包括 Sca1、cKit 和 Lin（一 🕸 组淋巴和骨髓系细胞的抗原 🐠 ）。
3. 流式细胞术分选： 使用流式细胞仪，根据抗体标记将 🌾 HSC 与其他细胞区分 🐺 开来。HSC 通常 🌾 表现为 Sca1+、cKit+、Lin。
4. 纯化：分选后的 HSC 可以通过进一步的标记或基于密度的分 🐒 离来纯化。
应用：HSC 分选在以下方面有广泛 💐 的应 🦍 用：
研究研究： 的 HSC 生物学特 🌳 征、分化潜能和移植能力。
移植： 用于治疗血液疾病，例如 🦟 白血病和镰状细胞性贫血。
再生医学： 开发再生疗 🐟 法，例如修复受损组织或治疗神经 🦊 退行性疾病。
药物发现： 筛选靶向 HSC 的 🦄 新 🐞 药和治疗方 🐞 法。
考 🐳 虑因素：
抗体选 🐟 择： 用于标记 HSC 的抗体的选择至关重要，因为不 🦈 同的抗体会识别不同的亚群。
分选策略分选策略：必 🐟 须优 🦋 化以获得最大化的 HSC 纯度和产量。
细胞健康： 分选过程应尽 🪴 可能保持 HSC 的健康和活力。
验证： 分选后的 HSC 应 🌴 使用功能性检测来验证，例如移植能力或分化潜能。
