小鼠股骨造血干细胞 🦆 (小鼠骨髓造血干细胞染色体的制备与 🌲 观察)
- 作者: 陈君赫
- 来源: 投稿
- 2025-08-23
1、小鼠 🌷 股骨造血干细胞 🐬
小鼠股骨 💮 造血干 🌸 细胞
定义:小鼠股骨造血干细胞 (HSC) 是存在于小鼠股骨骨髓中的多能干细胞,具有自我更新和分化为所有成熟血细胞系的能力 🦟 。
特性:自我更新:HSC 可以自我复制,保持干细 🕊 胞库 🐧 的稳定。
多能性:HSC 可以分化为红细胞、白细胞和血小板的所有 🌲 成熟血细胞系。
归巢:HSC 在造血器官(骨髓和脾脏)中具有特异性的归巢能力 💮 。
表面标记物表:HSC 达特 🐅 定的表面标记物,如 Sca1、cKit 和 CD34。
定位:小鼠 HSC 主要位于股骨骨髓的窦状静脉周围区域,称为造血干细胞龛龛。是由骨髓基质细胞、内,皮 HSC 细胞。和巨噬细胞构成的微环境提供了 🐳 自我更新和分化的必要信号
功能:HSC 在 🐼 以下过程中 🌴 发挥至关重要的作 🐦 用:
血细 🐳 胞生成:HSC 通 🐼 过分化产生新的血细胞 🦆 ,以维持正常造血。
血液系统修复:在血液系统受到损伤时,HSC 会激活以恢 🐴 复受损的血细胞系。
免疫应答:HSC 在激活的免 🌹 疫应答中产生 🦢 免疫细胞,例如淋巴细胞 🦅 和单核细胞。
应用:小鼠 HSC 研究在以下领 🐯 域具有重要意义:
血液系统疾病的研究研究:HSC 有助于了解 🐺 白血病和贫血等血液系统疾病的发病机制。
干 🐦 细胞移植:HSC 用于异基因和自体干细胞移植治疗白 🐛 血病和淋巴瘤等疾病。
干细 🕸 胞生物学:HSC 研究提供了有关干 🌻 细胞自我更新、多能性和分化的重要见解。
2、小鼠 🦁 骨髓造血干细胞染 ☘ 色体的制备与观察
小鼠骨 🐞 髓造血干细胞染 🐝 色体的制备与观察
材料:小鼠骨 🦉 髓 🍁
培养基抗凝剂(如 🕸 肝 🦟 素)
玻璃载 🐕 玻片
聚合酶链 🐯 反应(PCR)引 🐘 物
直接染 💐 色 🦢 试 🐡 剂盒
显微镜方法:
1. 小 🌻 鼠骨髓的收集
将小鼠麻醉并 🌺 杀处。
无菌收集小鼠股骨和 🐳 大腿骨 🐝 。
将骨头末端 🦆 剪断,使用 🌸 注射器和针头从骨髓 🐛 腔中抽取骨髓。
在 🍀 含有 🐈 抗凝剂的培养基中稀释 🌳 骨髓。
2. 细胞 💮 培养
将骨髓细胞 🦁 接种到培养瓶中。
在 37°C、5% CO2 的条件下 🐦 培养 35 天。
3. 染色体 🐈 的 🌻 收集
收 🐺 集培养中的细胞并离心。
重悬细胞于含有高渗溶液的缓冲液中 🐡 。
加入固 🦆 定液固定 🐋 细胞。
利用离 🌴 心机将细胞悬浮液离心到 🐝 玻璃 🌸 载玻片上。
4. 直 🦄 接染色
使 🌷 用直接染色试 🦄 剂盒 🦉 对染色体进行染色。
染色后,使用显微镜观察染色体 🐱 。
5. 观察 🌿
使用显微镜的高倍镜观察染色 💮 体的形态和数量。
拍摄 🌴 染色体的照片用于进 🍀 一步分析。
注意 🐅 事项 🕊 :
所有操作应在无 🦉 菌条件下进 🦋 行。
使 🍀 用合适的显微镜和物 🐘 镜以获得清晰的图像 🐳 。
对于准确的分析,需要对大 🦄 量 🌷 染 🐧 色体进行观察。
根据需要,可使用 PCR 引物对染色体进行进一步鉴 🐈 定。
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3、小鼠骨髓造血干细胞形成 🐺 各种血 🕸 细胞
骨髓 🌲 造 💐 血干细胞 (HSC)
位于小鼠骨髓中,是 🐦 产生所有类型血细胞的始祖细胞。
血细胞类型 🐠
红 🐧 细胞 🐶 (RBCs):携带氧 🐳 气
白细 🌸 胞 🦁 (WBCs):抵抗感 🌴 染
血 🌺 小板 (Plt):止 💮 血
HSC 分 🌼 化 ☘
HSC 分化为以下各种类型 🪴 的 🐟 血细胞:
髓系巨噬细胞 🌷 :吞噬入侵者 🐛
中 🦄 性粒细胞:杀 🦆 死细 🦊 菌
嗜酸性 🐒 粒细胞:攻击寄生虫
嗜碱性 🦉 粒细胞:释放炎症介质 🐺
淋系T 细胞:识 🐋 别 🐧 和杀死受感染细胞
B 细胞 🐒 :产 🦟 生抗体
自 🦟 然杀 🐋 伤 (NK) 细胞杀 🦊 :死癌细胞
巨核细胞血 ☘ 小板 🐘 :止 🐟 血
造血过程HSC 通 🐕 过一系列步骤分化 🦄 为这 🦅 些血细胞:
1. 增 🐺 殖增 🌸 殖:HSC 以增加其数量 🌵 。
2. 分化:HSC 逐渐分化为各种类型的血细胞祖细 🌴 胞。
3. 成熟:祖细胞进一步分化 🦅 为成熟的血细胞。
重要性骨髓造血干细胞对于 🌿 维持健康血细胞计数至关重要,这是维持整体健康和免疫功能所必需的。
4、小鼠 🐋 骨髓干细胞attc
ATTCC 小 🦟 鼠骨 🐴 髓干细 🐘 胞
名 🐟 称: 小鼠骨髓干细胞 🌷 ,ATCC? CCL124?
来 🐡 源: 小鼠尾骨
细 🐦 胞类型: 间充质干细 🌵 胞 🌻 (MSC)
培养基: 含 10% 胎 🍀 牛血清的 🐛 αMEM
传代 🐠 : 每 34 天 🐟 传代一次
特征:多能性:可分化为脂肪细胞 🐧 、成骨细胞和软骨细胞。
自我 🦋 更新能力:可长 🍀 期培养,保持干细 🦅 胞特性。
分泌旁分泌因子:释放促进 ☘ 组织修复和再生因子。
应用:组 🦅 织工程和再 🐺 生医学
药物筛 🕊 选和毒性 🐳 研究
免 🦈 疫 🦍 学 🐴 研究
分 🦍 子 🌹 生物学研 🐠 究
订 🌼 购信 🐋 息 🐱 :
编 ☘ 号: CCL124?
培养 🐘 基 🌷 : αMEM(ATCC? 302003?)
血清: 胎牛 🐘 血 🐺 清(ATCC? 302020?)
其 🪴 他: 可另购 🐴 培养基 🐵 和血清
更 🐱 多信 🌻 息 🐘 :
[ATCC 小鼠骨髓干 🦍 细胞页面]()