骨髓干细胞提 🍀 取小鼠（小鼠骨髓间充质干细胞提取方法 🐡 ）
- 作者: 杨政然
- 来源: 投稿
- 2025-06-10
1、骨 💮 髓干细胞 🦄 提取小鼠
骨髓 🌵 干细胞提取 🦋 小鼠
简介骨髓干细胞提取小 🦢 鼠是一种经过基因改造的小鼠，其骨髓中含有高水平的造血干细胞是（HSC）。HSC多，能干细胞。可以分化为所有血细胞类型骨髓干 🦆 细胞提取小鼠用于研究造血系统干细胞、生。物学和再生医学
原理骨髓干细胞提取小鼠是通过敲除或激活某些基 🐒 因来 🌼 创建的。这些基因通。常参与造血干细胞的自我更新和分化常见的靶基 🐯 因包括：
Cxcr4：编 🦋 码趋化因子受体CXCR4，负责HSC向骨髓迁移。
Mpl：编码血小板生成素受体 🐠 ，在HSC增殖和存活中起作用 🐅 。
Vav1：一种 GTP 酶，参与 🦟 HSC 信号 🐞 传导 🦉 。
通过敲除或激活这些基因 🐅 ，可以增加骨髓中 HSC 的数 🌻 量和或活/性。
优点产生大 🦍 量 HSC，用于研究和 🐒 治疗。
允许研究 HSC 在体内的行 🐝 为和命运。
为开发新的造 🐧 血疗法提供模型。
应用基础科 🍁 学研究：造血系统、干 🐕 细胞生物学。
临床前研究 🐛 ：造血干细胞移植血、液 🐘 疾病治疗。
再生医学：组织工程 🌸 、细胞治疗。
注意事项HSC 提取效率 🌿 因小鼠品 🌷 系和基因改造 🍀 的具体方法而异。
骨髓干细胞提取小鼠可能会表现出血液系统异常，例如贫血或血小 🐱 板减少症。
应在 🐡 合格 💐 的研究人员的监督下使用这些小 🐶 鼠。
2、小鼠骨 🐞 髓间充质干细胞提取方法
材料：小鼠胫 🦄 骨或 🐘 股骨
DMEM 培养 🐒 基 🐳 （含 🕷 10% FBS）
PBS（含 🌸 0.5% BSA）
胰 🍀 蛋白 🐺 酶 🐧 （0.25%）
弹性 🌴 蛋白 🌳 酶（2 mg/ml）
红细胞裂解 🦢 液
培养皿步骤：
1. 消毒：用 75% 酒精擦拭小鼠 ☘ 胫骨或股 🐟 骨表面。
2. 剥离肌肉：使用无菌镊子小 🌸 心剥离胫骨或股骨 🐕 上的所有肌肉组织。
3. 切除骨骺 💮 ：使用无菌手术剪 🍁 切除胫骨或 🐶 股骨的两端。
4. 冲洗骨髓：使用注射器和 21 号针头，将 510 ml DMEM 培，养基冲入骨髓腔 🐈 并收集流出的骨髓悬液。
5. 胰蛋白 🍀 酶消化：将收集到的骨髓悬液转移到一个 50 ml 离心管中，并加 ☘ 入 10 ml of 预 🦊 热的胰蛋白酶 0.25% 溶液。
6. 孵育：将离心管置于 37°C 的孵箱中孵育 1 小时 🦅 ，间歇性 🕷 振荡。
7. 终止消化：加 🐈 入 10 ml DMEM 培养基终止消化，。
8. 离心：将离心管在 1200 rpm 的 🐶 离 🌸 心机中离心 5 分钟。
9. 去除上清：小心吸出上清小心，不要 🍁 扰动细胞沉淀。
10. 弹性蛋白 🦋 酶消化：加入 🦄 5 ml of 预热的弹性蛋白 🕊 酶 2 mg/ml 溶液，并孵育 30 分，钟间歇性振荡。
11. 终止消化：加入 10 ml DMEM 培 🐎 养基 🦉 终止消化，。
12. 离 🐟 心：将离心管在 1200 rpm 的离心机中离 🦄 心 5 分 🌳 钟。
13. 去除上清：小心 🦍 吸出上 🐘 清小心，不要扰动细 🌿 胞沉淀。
14. 红细胞裂解：加入红细胞裂 🐦 解 1 ml 液，混匀并孵育 5 分钟。
15. 终止裂解：加入 9 ml DMEM 培养基终止 🦉 裂 🐛 解，。
16. 离心：将 🌺 离心管在 1200 rpm 的 🌲 离心 🍀 机中离心 5 分钟。
17. 去 🐦 除上清 🕸 ：小心吸出 🦈 上清。
18. 重 🐎 悬 🌸 细胞：用 DMEM 培养基重悬细胞，并计数。
细 🌻 胞培 🌾 养 🦟 ：
1. 将细胞 🦍 接种到预先涂有 0.1% 明胶的培养皿中。
2. 每 🐺 平方 🐼 厘米接种 个细胞 🦈 。
3. 在 37°C、5% CO2 孵箱中培 🦅 养细 🌷 胞 🐼 。
4. 每 🦍 23 天 🐬 更换培养基 🐒 。
3、小鼠骨髓细 🦁 胞的提取视频 🐵
抱 🐺 歉，我没有小鼠骨髓细胞提取视频。
4、小鼠骨 🐳 髓造血干细胞 🐶
小 🐝 鼠骨 🐛 髓造 🌷 血干细胞
骨髓造血干细胞 (HSC) 位于骨髓微环境中，是，一种多能干细胞能够 🐴 自我更新并分化为所有血细胞 🌻 类型。它。们在维持稳态血细胞生成和 🦍 对损伤的反应中发挥着至关重要的作用
特性：自我更新：HSC 能够分裂，产，生与自己相同的子细胞从而 🌼 维持其干细 🐋 胞池。
多能性：HSC 可以分化成所有血细胞类 🌺 型，包括白细胞、红细胞血、小 🐺 板和巨噬细胞。
归巢 🌼 ：HSC 表达化学趋化因子受体，使 🐬 它们能够迁 🦟 移到骨髓微环境。
功能：稳态血细胞生成：HSC 持续产生新的血细胞，补充死去的细胞并维持血细胞 🌿 计数。
损伤反应：在损伤或应激情况下，HSC 会，释放到血液中并迁移到 🪴 损伤部位促进组织再生。
调节：HSC 的产生和功能受骨髓微环境中多种因子的调节 🐒 ，包括：
细胞 🐛 因子：白细胞 🐛 介素 (IL)3、IL6 和骨形态发生蛋白 (BMP) 等细胞因子促进 HSC 的自我更新和分化。
基质细胞：骨髓成纤维细胞、内皮细胞和造血支持细胞为 HSC 提 🕊 供物理和化学信号，调节其行为。
嘌呤代谢：腺苷和肌苷 🌹 等嘌呤代谢物可以 🦊 调节 HSC 的稳态。
研 🌺 究意 🐯 义 🐘 ：
HSC 研究对于理 🐠 解造血血、液病和再生 🕷 医学具有重要意义对。的 HSC 操纵可以用于开发新的治疗策略 🌼 ，例如：
干细 🦊 胞移植：用 🐴 于治疗白血病和免疫缺陷等血液病。
基因治疗 🕊 ：用于纠正遗传 🌿 性血液病，如镰状细 🐠 胞性贫血。
组织再生 🐠 ：利用 HSC 的分化潜力再生受损或 🐈 丢失的组织。
