小鼠神经干细胞gfap(小鼠神经干细胞和神经祖细胞 🦢 区别)
- 作者: 朱晨熙
- 来源: 投稿
- 2025-04-30
1、小鼠神经干细 🐦 胞gfap
小鼠神 ☘ 经干 🐒 细胞 🌺
未分化的多能细胞 🦅
具有自我更新和分化成神 🌿 经元、少突胶质细胞和星形胶质 🌵 细胞的能力
存在于成年小鼠的大脑中,包括海马体、侧脑室下 🐅 区和嗅球
Gfap星形 💐 胶质细 🌵 胞纤维酸性蛋 🐺 白 (Gfap)
星形 🐬 胶质细胞的中间丝蛋白
在发 🐺 育中和损伤后 🌺 都表达
小鼠神经 🦍 干细胞 Gfap
Gfap 是小鼠神经 🪴 干细胞 🍁 的常用标记 🐈
Gfap 表达神经干细胞已 🌺 在小鼠大脑的不同区域分离 🦅 和鉴定
Gfap 表达神经干细胞参与神经 🌷 发 🐦 生和组织修复
研究用途研究神经干细胞 🐱 的生物学(自我 🦅 更新、分、化迁移)
追踪神经干细胞在发育 🦊 和损伤后的命运
开发基于神经干 💮 细胞的疗法,用于治疗神经 🦆 系统疾病
2、小鼠神经干细胞 🦊 和神经祖细胞区别
小鼠神经干细胞 (NSC) 和神经 祖细胞 (NPC) 都是神经系统发育过程中的多能细胞,具有自我更新 🕷 和分化成 🌷 不同神经元和神经胶质细胞的能力。两者之间存在一些关键区别:
来源:NSC:存 🦆 在于整个神经系统发育过程中,包括胚胎和成体。
NPC:主要 🐠 存 🌳 在 🐦 于胚胎时期。
位置:NSC:主要位于脑室下区 (SVZ) 和齿状回下牙槽带 (SGZ) 等特定神经发 🐬 生区。
NPC:存在于 🐧 整个发育中 🌾 的神 🌹 经管中。
分化 🐟 潜 🐼 力 🐳 :
NSC:具有分化 🦅 成所有类型 🌸 神经元和神经胶质细胞的潜力。
NPC:分化潜力较窄,倾向于 🐞 生成特定的神经 🌾 元或神经胶质细胞亚型。
自我更 🕷 新 🐎 能力:
NSC:具有较强的自我更新能力,可以持续产生新的 NSC 和神经元 🌻 或神经胶质细胞。
NPC:自我更新能力较弱,随,着发育的 🪴 进行逐渐失去自我更新能力。
增殖率:NSC:增 🐛 殖 🦆 率较 🐶 低。
NPC:增殖率较 🦈 高 🌷 。
受 🦋 控机制:
NSC:受 🕸 多种 🕷 信号通路和转录因子严格调节 🐕 ,以维持其多能性和自我更新能力。
NPC:受类似的机制控制,但 🐳 可能因特定的神 🌵 经发育阶段而异。
功能:NSC:在整个生命 🦢 周期中,包括神经系统发育、损伤修复和神经变性中发挥关键作用。
NPC:主要 🦅 参与胚胎期 🌵 神经系统的发育。
| 特征 🐠 | 神经干细胞神经 (NSC) | 祖细胞 (NPC) |
||||| 来源 🌲 | 胚 | 胎 🦅 |和成体胚 🦄 胎
| 位置 | 特 | 定 |神经发生 🐧 区 🪴 整个神 🐡 经管
| 分化潜力 | 所 | 有 |神经细胞类 🐴 型特定 🌷 亚型
| 自我 🐵 更 🕷 新 | 强 🐟 | 弱 |
| 增 🕊 殖率 | 低 🪴 | 高 |
| 受控机制 | 严 | 格 |调节严格调节但随发育而变 💐 化
| 功能 | 神 | 经 |发育和 🌷 修复胚胎神经发育
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3、小鼠神经干细胞的分离 🐕 及培养实 🐘 验
小鼠神经干 🌳 细胞的分离及 🐘 培 🌼 养实验
目的:分离和培养原代小鼠神经 🐋 干细胞 🌷 ,用于神经发育和损伤修 🐈 复研究。
材料:动物:68 周 🕊 龄 C57BL/6 小 🕊 鼠 🦋
试剂:HBSS 缓 💮 冲 🐺 液 🐞
EDTAPBS 溶液 🦊 (0.05% EDTA 在 PBS 中 🐶 )
神经干细胞 🦄 培 🐼 养基(含有 EGF、bFGF、B27 等生长因子 🐦 )
胰蛋 🦉 白酶 🐼 EDTA 液 🐱
神经球 🦈 消解液(含 🦍 胰蛋白酶、胶原 🌿 酶)
多聚赖氨酸涂层 🐟 培养皿或培养 🕊 瓶
设备:层流罩
解剖器械 🐡 (剪 🐈 刀、镊 🌹 子)
细胞 🐘 培养 🌵 箱(37°C,5% CO2)
倒 🕊 置显微镜 🌵
细胞 🐧 计数 🐺 板 🐘
步骤:1. 小鼠脑组织 🐎 分 🦄 离
在 🦊 层 🌵 流罩内 🪴 ,处死并解剖小鼠。
移出大 🌻 脑,小心 🐟 去除脑膜。
2. 神经 ☘ 球 🌾 制 🦄 备
将 🕷 大 💮 脑 🌵 组织切成小块,在神经球消解液中消化 30 分钟。
用 HBSS 缓 🕊 冲液洗涤神经 🕊 球 3 次。
从神经球 🦄 中收集细 🌺 胞悬液。
3. 单细胞悬液 🌺 制 🌷 备
用胰蛋白 🐝 酶EDTA 液消化神 🦄 经球悬液 10 分钟。
用神经干 🐴 细胞培养 🐦 基稀释酶液,并洗涤细胞 3 次。
通 🐼 过 40 μm 细胞滤网过滤细胞悬液 🐧 。
4. 细 🐬 胞 🐋 分离
将过滤后的细胞悬液接种 🦉 至多聚 🦁 赖 🐳 氨酸涂层培养皿或培养瓶中。
神经干 🐟 细 🌻 胞将贴壁生长神经,球 🦋 将悬浮在培养基中。
在培养基中加入 10 μM 神 🐎 经生长抑制剂 🐠 (NGI)去除神经球。
5. 细 🐝 胞培养
每 23 天更换培养基 🦢 一次。
在细胞培养箱中培养,温度为 37°C,CO2 浓度为 🐧 5%。
定期监测神经干细胞 💐 的 🌳 生长和形态。
6. 细胞 🐡 计 🐼 数和表征 🐳
用 🕷 细胞计数板计数细胞数量。
使用免疫荧光或流式细胞术 🦊 对细胞进行表 🐅 征,检,测神经干细胞标记物 🐦 如 nestin 和 Sox2。
结果:获得高纯 🌸 度的小鼠神经 🌲 干细胞,形成 🐳 神经干细胞球体。
神经干细胞可增 🌴 殖分化成神经元、星形胶 🌾 质细胞和 🕸 少突胶质细胞。
讨论:神经干细胞培养是研究神经发 🍁 育 🌵 、损伤修复和再生医学的重要 🍀 工具。
分离方法的优化可 🌿 以提高细胞的产量和纯 🍀 度。
使用神经生长抑 🦄 制剂可以有效去除神经球,获 🐠 得纯的贴壁神经 🐛 干细胞。
4、小鼠神经干细胞诱 🦋 导分化 🐯
小鼠神经 🪴 干细 🐞 胞诱导分化
介绍神经干细胞是一种具有自我更新和多向分化潜力的未分化细胞。它们存在于大脑的特定区域,被,称。为神经,发生区 🐝 并在整个生命中产生新的神经元和其他脑细胞诱导分化是指将神经干细胞转化为特定细胞类型的过程如神经元、少。突胶质细胞或星形胶质细胞
诱导分 🐶 化方法
诱导小鼠 🐘 神经干细胞分化的常见方法包括:
生长因子和细胞因子:表皮生长因子 (EGF)、成纤维细胞生长因子和 (FGF) 神经生长因子 (NGF) 等生长因子可以促进神经元分化。血小板衍生生长因子和 (PDGF) 胰岛素样生长因子可促进 (IGF) 少。突 🦊 胶质细胞分化
转录因子转录因子 🌼 :是一种 🐈 调节基因表达的蛋白质一。些转录因子,如 NeuroD1 和 Mash1,已。知可促进神经元分化
化学诱导剂:特定的化学物 🍁 质,如二甲基亚砜 (DMSO) 和,烟酰胺已被证明可以诱导神经干细胞分化。
电刺激电刺激:可以促进神经发生区神经 🌸 干细胞的分化。
分化阶段神经干细胞诱导 🕸 分化的过程通常涉及以下阶段 🍁 :
增殖:神经干细胞首先 🌷 通过对称分裂进行 💐 增殖 🦟 。
指 🐦 定:受诱导剂影响,神经干细 ☘ 胞会产生对 🐕 特定细胞谱系(如神经元或少突胶质细胞)的倾向性。
分化:神经干细胞开始 🐝 表达特定细胞类型的标记物和功能。
成熟:分化细胞成熟 🦁 为完 🐳 全功能的神 🦅 经元或胶质细胞。
应用神经干细胞诱 🌿 导分化 🐡 在多个领域具有潜在的应 🌷 用,包括:
再生医学:诱 🐈 导分化细胞可以用来修复脑 🐘 损伤或退行性疾病。
药 🐡 物筛选:诱导分化细胞可用 🌵 于筛选针对特定神经系统疾病的药物。
发 🌲 育生物学:诱导分化可以提供有关神 🦈 经 💐 系统发育过程的见解。
神经科学:研究 🦋 诱导分化细胞可以帮助阐明神经元和胶质细胞的功能和相互作 🐅 用。
结论诱导小鼠神经干细胞分化是一种强大的技术 🦉 ,可,以用来产生特定细胞类型并具 🍀 有广泛的应用。通,过。进一步研究和优化这项 🐎 技术有望在未来对神经系统疾病的治疗和理解产生重大影响