成年小鼠神经干细胞（小鼠 🐞 神经干细胞的分离及培 🐦 养实验）
- 作者: 陈苡朵
- 来源: 投稿
- 2025-05-11
1、成年 🐟 小 🌼 鼠神经干细胞
成 🌻 年小 🌹 鼠神经 🐱 干细胞
成年小鼠神经干细胞 (NSC) 是在成年小鼠大 🌳 脑中发现的一种多能干细胞类型。它们具有自我更新能力，并能够分化为神经元、少。突胶质细胞和星形 🦈 胶质细胞等多种神经细胞类型
特征：位置：主要位于海马 🐎 体的齿状回和侧脑室 🐠 下区。
形态：小细胞，圆形，或卵 🐘 形细胞核长而细的突起。
标 🦟 记物：Nestin、Sox2、Hes1
功能：神 🐡 经发 🐝 生：产 🐈 生新的神经元。
少突胶 🦢 质细胞形 🌻 成 🦊 ：产生髓鞘化神经细胞。
星形胶质 🐋 细胞形成形成：大脑中 🐳 的胶质支架。
意义：成年小鼠 🐟 NSC 因其在神经再 🦋 生和修复研究中的潜力而受到关注。刺。激这些细胞的神经发生和分化能力可以作为治疗神 🕊 经退行性疾病和损伤策略
其他 🦋 信息 🐶 ：
成年小 🐡 鼠 NSC 约占大脑 🐳 细胞的 5%。
神经发生在成年小鼠 🐺 中持续存在，受到学习、运动和环境丰富 🌴 化的影响 🐋 。
在某些神经退行性疾病（如阿尔茨海默病）中，成年小鼠 🐼 NSC 的神经发生能力会受损。
2、小 🕸 鼠 🐡 神经干细胞的分离及培养实验
实验目的分离并培养小鼠神经干细胞以用于 🪴 进一步的研究，例如神经发育、再生和疾病建模。
材料动 🐺 物： 怀 🦊 孕 🐈 小鼠 E14.516.5
培养基： 神经 🪴 干细胞培养基（含 EGF 和 bFGF）
酶 🐎 ： 胶原酶 IV、胰蛋 🐳 白酶
抗 🦋 生素 🐛 ： 青霉 🐕 素链霉素
其他： 培养皿培养、瓶、细胞抓取器 🕷
实验步骤1. 解 🪴 剖 🐶
对怀孕小 🌳 鼠进行剖 🐒 腹手术，取出胎儿。
取出头部组织，将其放 🦍 入 🐶 含 PBS 的培养皿中。
2. 分离神经干细胞 🍀
将 🐬 头 🐧 组织切成 🕊 小块。
加入胶原 🐺 酶 IV 和胰蛋白 🦍 酶消化 30 分 🦟 钟，37°C。
通过 40 微米 🐵 细胞过滤器过 🌳 滤细胞悬液。
离心收集细胞 🦢 （5 分钟，1200 rpm）。
3. 培 🌵 养 🐬
将收集的细胞悬液 🐬 重悬于神经干细胞培养 ☘ 基中。
接种 🍀 至涂有聚赖氨酸的培养皿中。
37°C、5% CO2 培 🦍 养 🌻 。
4. 培 🐘 养基 🦁 更 🐯 换
每 🌷 23 天更换培养基。
加入半量新鲜培养 💮 基，同时 🦟 去除半量旧培养基。
5. 分 🦁 离 💮 和传代
当细 🐱 胞达 🦢 到 80% 融合时，使用细胞 🐛 抓取器将其分离成小团。
将细 🐳 胞团接种至新的涂有聚赖氨酸的培养皿中。
按照步骤 4 继续培 🦉 养。
预期结果在显微镜 ☘ 下观察，分离后的神 ☘ 经干细胞为小、圆形的悬浮细胞。培，养后细胞。会增殖并形成神经球
注意事项保持无菌操作，以 🐵 防止污染。
小心操作细 🦉 胞抓 🌵 取器，避免损伤细 🐈 胞。
定 🦆 期 🦢 监测培养物，并更换培养基以保持细胞健康 🦈 。
3、成 🦋 年脑中不存在 🌷 神经干细胞
错误。研究表明，成年脑中确实存在神经干细胞。这，些神经干细胞。位，于特定的脑 🐡 区例如海马体和齿状回它们 🍁 具有自我更新和分化形成新神经元的潜力在学习、记、忆神经。发生和修复中发挥重要作 🐎 用
4、神 🦟 经干 🐛 细胞标记小鼠
神经 🐳 干细胞标记小鼠
神经干细胞标记小鼠是一种转基因小鼠，其基因，组中整合了荧光标签或其他示 🦁 踪剂用于标记神经干细胞。这些小鼠被广泛用于研究神经干细胞的生物学、发。育和功能
标记方法神经干细胞标记小鼠通常通过将荧光蛋白（例如绿色荧光蛋白 [GFP]、红色 🌿 荧光蛋白 [RFP] 或蓝色荧光蛋白 [BFP]）的基因置于神经干细胞特异性启动 🌵 子或增强子的控制之下来创建。当使用这些启动子时，转基因，在神经干细胞。中表达导致荧光蛋白在这些细胞中产生
应用神经 🐧 干细胞标记小鼠用于各种研究领域，包括：
发育生物学：研究神经干细胞在中枢神经系统发育中的作 🦁 用。
神经 🦈 营养学：调查神经干 🍁 细胞的增殖、分化和迁移。
神经再生：研究神经干细胞在中风、创伤或脊 🐬 髓损伤后的再生中的潜力。
神经退行 💐 性疾病：探索神经干细胞作为治疗帕金森病或阿尔茨海默病等疾病的候选 🐋 。
类型有多种不同类型的神经干细胞标记小 🐛 鼠，每种类型都针对神经干细胞的不同 🦟 亚群。一些常见的类型包括：
NestinGFP 小鼠：标 🦋 记神经干细胞和神经祖细胞。
GFAPGFP 小鼠：标记神 🦋 经胶质祖细胞和星 🐡 形胶质细 🐵 胞。
Olig2GFP 小鼠：标记少突胶 🐅 质细胞祖细 🐋 胞 🍁 。
Sox2GFP 小鼠：标记神经干细胞和多 🐡 能干细胞。
优点神经干 🪴 细 🌳 胞标记小鼠具 🌺 有以下优点：
实时成 🐛 像 🌴 神经干细胞。
跟踪细胞 🐶 系谱和分化。
在活体动物中研究神经干细胞的功 🐶 能。
筛选潜在的神经营 🐵 养治疗方法。
限制神经干细胞标记小 🦢 鼠 🦋 也有一些局 🐱 限性：
转基 🐵 因表 🌸 达可能因小鼠系而异。
标记的细胞可能与本 🐦 机神经 🕊 干细胞表现不同。
长期 🦉 成像可能 🌼 会导致光毒性或 🐼 组织损伤。
