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小鼠短期 🐦 造血干细胞(小鼠骨髓造血干细胞染色体的制备与观察 🌾 )

  • 作者: 马鹿瑶
  • 来源: 投稿
  • 2025-10-03


1、小鼠 🌿 短期造血干细胞

🐒 鼠短 🐕 期造血干 🌳 细胞 (STHSC)

定义:

小鼠短期造血干细胞 (STHSC) 是一种具有自我更 🐱 新和分化潜能的多能造血干细胞,但与长期造 🐝 血干细胞 (LTHSC) 相,比其自我更新能力和寿 🐎 命有限。

特性:

自我更新:STHSC 可自我 🦉 更新,产生更多 STHSC。

多能性:STHSC 可分化为所有类型的造血细胞 🌲 ,包括淋巴细胞细胞细胞细 🌷 胞(B 和、T 髓细胞、NK 中性)粒细胞(单、核细胞、巨、噬细 🐼 胞、嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞)。

寿命有限:STHSC 的寿命比 LTHSC 短,在小鼠中约为 23 个月 🌳

细胞表面标 🐞 记:STHSC 通常表现为 Lin Sca1+ cKit+ CD48 CD150+。

功能:

造血:STHSC 产生造血祖 🦍 细胞,这些 🐧 祖细胞进一步分化为成熟的造血细胞。

组织修 🕷 复:STHSC 参与损伤 🐎 组织 🌷 的修复和再生。

免疫调节:STHSC 在免 🐬 疫系统的发育和功能 🐝 中发挥作用。

重要性:

STHSC 是骨髓移植和干细胞治疗的关键靶 🌻 🐘

研究 🍀 STHSC 有助于了解造血调控 🌻 和再生机制。

STHSC 的异常与白血 🌲 病等 🐘 造血疾病有关 🦊

与 LTHSC 的 🐘 🦆 🌵

| 特 🦉 🐦 | LTHSC | STHSC |

||||

| 自 🐼 我更新能力 | 高 | 中 |等

| 寿 🐒 命 | 长(>1 年 🐟 ) | 中等(23 个) |月

| 细胞表 🌷 面标 🦢 记 | Lin Sca1+ cKit+ CD48 CD150 | Lin Sca1+ cKit+ CD48 CD150+ |

| 分 🐧 🐘 潜能 | 多 🐛 能 | 多能 |

| 功能 | 维 | 持 |造血 🐘 系统补充造血祖细胞 🕸

2、小鼠 🐒 骨髓造血 🦅 干细胞染色体的制备与观察

🦟 鼠骨髓造血干细胞染色体的制备与观察

材料和 🍁 试剂

骨髓细胞 🐳 悬液

高渗溶液 🦢

固定剂
卡氏液

吖啶橙染色液 🪴

盖玻片
载玻片
步骤

1. 获取骨髓细胞 🌹 悬液

从小鼠股骨或 🌿 胫骨中抽取骨 🦢 🐧

用高渗溶液冲洗骨 🐧 髓,除去红细 🦁 胞。

2. 固 🐟

将骨 🐛 髓细胞悬液加入固 🦍 定剂中,充分混合。

固定时间 🐅 :室温 30 分钟或 4°C 过夜 🐡

3. 制 🦍 🐈 玻片 🐘

将固定后的细 🌼 胞悬液滴在载玻 🐺 片上,形成薄层。

干燥 🌿 载玻片 🐵 ,使细胞 🐵 附着。

4. 染 🌲

🐯 卡氏液滴在细胞上 🐶 ,作 🐯 用 30 分钟。

用蒸馏水 🍁 🌵 洗掉卡氏 🐵 液。

加入吖啶橙染色液,作用 10 分钟。

🌷 蒸馏水冲洗掉吖啶橙染 💐 色液。

5. 盖 🐋 玻片

在细胞上 🐕 盖上盖玻片。

用指甲油或胶密封盖玻片的边 🌴 缘。

6. 观察 🐱

在荧光显 🐅 🦉 镜下观察 🌿 染色好的细胞。

染色原理

卡氏液:将 🐡 DNA 染成 🌵 🐳 色。

吖啶橙:单 🦍 链 DNA 染成 🐳 绿色,双链 DNA 染成橙色。

观察结果

正常的小鼠骨 🕊 髓造血干细胞应呈现为圆形或椭圆形细胞,核,大 🐼 ,而圆染色质分布均匀 🦈 呈绿色或蓝绿色。

异常的小鼠骨髓造血干细胞可能具有不同的形态、染色 🐱 质分布 🌳 或染色颜色。

3、小鼠骨髓造血干细胞形成各 🐴 种血细 🌸

🌼 髓造血 🐘 干细胞 🕸

骨髓造血干细胞 (HSC) 存在于骨髓中,是所有血细胞的祖细胞。它,们,具有自我更新的能力可以产生各种类型的血 🦁 细胞包括:

髓系细 🐠 胞:

红细胞 🐞 (运 🦄 🦍 氧气)

白细胞(免疫细胞):中性粒细胞、嗜、酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞单核 🕊 细胞

巨噬 🪴 细胞(吞 🪴 🌳 细胞)

血小 🐯 板(凝血)

淋巴系 🐒 🐘 胞:

T 淋巴细胞细胞(介导免疫 🐺

B 淋 🌴 巴细 🦍 胞(产 🦉 生抗体)

自然杀伤 (NK) 细胞杀(死被感染细 🌸 胞)

血细 🌹 胞生 🦋 成过程 🐬

HSC 通过一个 🐦 🐠 化过程产生血细 🐴 胞:

1. HSC 自我更新:HSC 分裂产生 🦈 两个相同的 HSC,以维持干 🌾 细胞库。

2. 祖细胞形成:HSC 分化成各种祖细胞,如粒细胞单核细胞 🕸 祖细胞 (GMCFC) 和巨核细胞红细胞祖细胞 (MEP)。

3. 前体细胞分化:祖细胞进 🌿 一步分化为前体细胞,如中性粒 🐳 细胞前体细胞和红细胞前体细胞 🦉

4. 成熟血细胞形 🕸 成:前体 🐠 细胞经历最终分化形成成熟血 🐴 细胞,。

这个血细胞生成过程受各种生长因 🌲 子和细胞因子的调节 🐎 ,以确保血细胞的持续 🐟 供应。

4、小鼠和 🌷 人的 🐱 造血干细胞都具有的表

| 表面标 🐅 志 | 小 | 鼠 |人

||||

| CD34 | + | + |

| CD45 | + | + |

| CD117 (cKit) | + | + |

| CD135 (Flt3) | + | + |

| Sca1 | + | |

| Thy1.1 (Thy1.1) | + | |

| Gr1 (Ly6G/Ly6C) | | |

| Mac1 (CD11b/CD18) | | |

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