小鼠短期 🐦 造血干细胞(小鼠骨髓造血干细胞染色体的制备与观察 🌾 )
- 作者: 马鹿瑶
- 来源: 投稿
- 2025-10-03
1、小鼠 🌿 短期 ☘ 造血干细胞
小 🐒 鼠短 🐕 期造血干 🌳 细胞 (STHSC)
定义:小鼠短期造血干细胞 (STHSC) 是一种具有自我更 🐱 新和分化潜能的多能造血干细胞,但与长期造 🐝 血干细胞 (LTHSC) 相,比其自我更新能力和寿 🐎 命有限。
特性:自我更新:STHSC 可自我 🦉 更新,产生更多 STHSC。
多能性:STHSC 可分化为所有类型的造血细胞 🌲 ,包括淋巴细胞细胞细胞细 🌷 胞(B 和、T 髓细胞、NK 中性)粒细胞(单、核细胞、巨、噬细 🐼 胞、嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞)。
寿命有限:STHSC 的寿命比 LTHSC 短,在小鼠中约为 23 个月 🌳 。
细胞表面标 🐞 记:STHSC 通常表现为 Lin Sca1+ cKit+ CD48 CD150+。
功能:造血:STHSC 产生造血祖 🦍 细胞,这些 🐧 祖细胞进一步分化为成熟的造血细胞。
组织修 🕷 复:STHSC 参与损伤 🐎 组织 🌷 的修复和再生。
免疫调节:STHSC 在免 🐬 疫系统的发育和功能 🐝 中发挥作用。
重要性:STHSC 是骨髓移植和干细胞治疗的关键靶 🌻 点 🐘 。
研究 🍀 STHSC 有助于了解造血调控 🌻 和再生机制。
STHSC 的异常与白血 🌲 病等 🐘 造血疾病有关 🦊 。
与 LTHSC 的 🐘 比 🦆 较 🌵 :
| 特 🦉 征 🐦 | LTHSC | STHSC |
||||| 自 🐼 我更新能力 | 高 | 中 |等
| 寿 🐒 命 | 长(>1 年 🐟 ) | 中等(23 个) |月
| 细胞表 🌷 面标 🦢 记 | Lin Sca1+ cKit+ CD48 CD150 | Lin Sca1+ cKit+ CD48 CD150+ |
| 分 🐧 化 🐘 潜能 | 多 🐛 能 | 多能 |
| 功能 | 维 | 持 |造血 🐘 系统补充造血祖细胞 🕸
2、小鼠 🐒 骨髓造血 🦅 干细胞染色体的制备与观察
小 🦟 鼠骨髓造血干细胞染色体的制备与观察
材料和 🍁 试剂
骨髓细胞 🐳 悬液
高渗溶液 🦢
固定剂卡氏液
吖啶橙染色液 🪴
盖玻片载玻片
步骤
1. 获取骨髓细胞 🌹 悬液
从小鼠股骨或 🌿 胫骨中抽取骨 🦢 髓 🐧 。
用高渗溶液冲洗骨 🐧 髓,除去红细 🦁 胞。
2. 固 🐟 定
将骨 🐛 髓细胞悬液加入固 🦍 定剂中,充分混合。
固定时间 🐅 :室温 30 分钟或 4°C 过夜 🐡 。
3. 制 🦍 备 🐈 玻片 🐘
将固定后的细 🌼 胞悬液滴在载玻 🐺 片上,形成薄层。
干燥 🌿 载玻片 🐵 ,使细胞 🐵 附着。
4. 染 ☘ 色 🌲
将 🐯 卡氏液滴在细胞上 🐶 ,作 🐯 用 30 分钟。
用蒸馏水 🍁 冲 🌵 洗掉卡氏 🐵 液。
加入吖啶橙染色 ☘ 液,作用 10 分钟。
用 🌷 蒸馏水冲洗掉吖啶橙染 💐 色液。
5. 盖 🐋 玻片
在细胞上 🐕 盖上盖玻片。
用指甲油或胶密封盖玻片的边 🌴 缘。
6. 观察 🐱
在荧光显 🐅 微 🦉 镜下观察 🌿 染色好的细胞。
染色原理卡氏液:将 🐡 DNA 染成 🌵 蓝 🐳 色。
吖啶橙:单 🦍 链 DNA 染成 🐳 绿色,双链 DNA 染成橙色。
观察结果正常的小鼠骨 🕊 髓造血干细胞应呈现为圆形或椭圆形细胞,核,大 🐼 ,而圆染色质分布均匀 🦈 呈绿色或蓝绿色。
异常的小鼠骨髓造血干细胞可能具有不同的形态、染色 🐱 质分布 🌳 或染色颜色。
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3、小鼠骨髓造血干细胞形成各 🐴 种血细 🌸 胞
骨 🌼 髓造血 🐘 干细胞 🕸 :
骨髓造血干细胞 (HSC) 存在于骨髓中,是所有血细胞的祖细胞。它,们,具有自我更新的能力可以产生各种类型的血 🦁 细胞包括:
髓系细 🐠 胞:
红细胞 🐞 (运 🦄 输 🦍 氧气)
白细胞(免疫细胞):中性粒细胞、嗜、酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞单核 🕊 细胞
巨噬 🪴 细胞(吞 🪴 噬 🌳 细胞)
血小 🐯 板(凝血)
淋巴系 🐒 细 🐘 胞:
T 淋巴细胞细胞(介导免疫 🐺 )
B 淋 🌴 巴细 🦍 胞(产 🦉 生抗体)
自然杀伤 (NK) 细胞杀(死被感染细 🌸 胞)
血细 🌹 胞生 🦋 成过程 🐬 :
HSC 通过一个 🐦 分 🐠 化过程产生血细 🐴 胞:
1. HSC 自我更新:HSC 分裂产生 🦈 两个相同的 HSC,以维持干 🌾 细胞库。
2. 祖细胞形成:HSC 分化成各种祖细胞,如粒细胞单核细胞 🕸 祖细胞 (GMCFC) 和巨核细胞红细胞祖细胞 (MEP)。
3. 前体细胞分化:祖细胞进 🌿 一步分化为前体细胞,如中性粒 🐳 细胞前体细胞和红细胞前体细胞 🦉 。
4. 成熟血细胞形 🕸 成:前体 🐠 细胞经历最终分化形成成熟血 🐴 细胞,。
这个血细胞生成过程受各种生长因 🌲 子和细胞因子的调节 🐎 ,以确保血细胞的持续 🐟 供应。
4、小鼠和 🌷 人的 🐱 造血干细胞都具有的表
| 表面标 🐅 志 | 小 | 鼠 |人
||||| CD34 | + | + |
| CD45 | + | + |
| CD117 (cKit) | + | + |
| CD135 (Flt3) | + | + |
| Sca1 | + | |
| Thy1.1 (Thy1.1) | + | |
| Gr1 (Ly6G/Ly6C) | | |
| Mac1 (CD11b/CD18) | | |