小鼠胰腺干细胞原 🍀 代 🍀 (KPC小鼠的胰腺癌细胞系)
- 作者: 刘伊湉
- 来源: 投稿
- 2025-08-01
1、小鼠胰腺干细 🦋 胞原 🐦 代
小鼠胰 🪴 腺干细 🦄 胞原 🐦 代
定义小鼠胰腺干细胞原代是指从活体小鼠胰腺中分 🪴 离和培养的未分化的干细胞群。这些细胞具有自我更新和分化为胰腺细胞谱系(例如细胞细胞细胞和细胞的 β 能、α 力、δ PP )。
分离方法胰腺消 🦋 化:将胰腺切碎并与胰蛋白酶或胶原酶 🐡 等酶一起消化,释放细胞 🐠 。
密度梯度离心:通过密度梯度 🐟 离心将干细胞与其他细胞 💮 类型分 🐵 离。
培养基胰腺干细胞原代通 🐱 常在含有生长因子细胞 🦆 因子、和其他维持干细胞自我更新的成分的特殊培养基中培养常。用的培养基包括 🐈 :
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)/Ham's F12
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM)
应用胰腺干细胞原 🐧 代在以下领域 🐎 具有广 💮 泛的应用:
糖尿 🌸 病研究研究:细 β 胞 🌼 功能障碍,以及开发 🐧 针对糖尿病的新疗法。
胰腺发育:了解胰腺发育过程,以及识别 🐈 导致胰腺 🍀 疾 🦅 病的机制。
细胞移植:在动物模型中进行细胞移植,以评估胰 🌳 腺干细 🐕 胞在修复胰腺损伤中的潜力。
药物筛选筛选:可能调节胰腺干 🌷 细胞功能或分化的候选药物。
再生医学:研究利用胰腺干细胞治疗胰腺疾病,如糖 🌲 尿病和胰腺炎的可能性。
优点具有自我更新 🐴 和分化能力。
可提供对胰腺 🌵 发育 🦋 和疾病的深入 🐦 了解。
促进新的治疗方法的开 🐦 发。
局限性分离和培养过程可能复杂且耗 🐅 时。
在体外培养中可能失 🦅 去原代细胞的某些特性。
细胞移植疗法的成功取决于宿主免疫反应和长期 🌴 存活率。
2、KPC小鼠的胰腺癌细胞 🦅 系
KPC小 🌺 鼠模型 🌹 及其胰腺癌 🐅 细胞系
KPC小 🦁 鼠 🐝 模型 🦢
KPC小鼠模型是一种转基因小 🦁 鼠模 🐡 型,用于研究人类胰 🐅 腺癌。
这些小 🐴 鼠携 🐼 带三种突变:
胰腺特异 💮 性灭活Kras基因(KrasG12D)
失活的 🐋 抑 🐼 癌 🐕 基因Trp53(Trp53LSLR172H)
表 🌴 达人胰 🐈 腺α淀粉 🦢 酶(Pdx1Cre)
由于这些突变,KPC小 🦟 鼠会 🐼 自发地发展侵袭性胰腺导管腺 🐕 癌 (PDAC),类似于人类疾病。
KPC胰腺癌细 🍀 胞系
从 🌲 KPC小KPC鼠的胰腺癌肿瘤中分 🍁 离出来的细胞培养物被称为胰腺癌细胞系。
这些细胞 🐧 系保持了原发肿瘤的分子和病理特征,使其成为研究胰腺癌生物学和治疗的宝贵工具。
常见 🐠 ??的KPC细 🌲 胞系 🌵 包括:
KPC1
KPC2
KPC3
KPC4
应用KPC小鼠模型和细胞系已广泛用于研究 🦍 胰腺癌的以 🌺 下方面:
肿瘤 🌵 发生和进展:了解基因突变和信 🦍 号通路在胰腺癌发展中的作用。
药物靶向治疗:评估和筛选针对胰腺癌的实验性药物和 🦄 疗法。
免疫治 🦋 疗:探讨免疫系统的作用,开发免疫疗法。
转移:研究胰腺癌细胞转 🐧 移到其 🐕 他器官的机制。
耐药机制:确定胰腺癌对治疗产 🐺 生 🌵 耐药性的原因。
KPC小鼠模型和细胞系提供了研究胰腺癌复杂生物学和开发有效治疗方法的有价值的 🐘 工具。
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3、小鼠胰 🦊 岛β细胞株的培养
小鼠胰岛 🌷 β细胞株的培养 🕸
材料和设 🐴 备
胰岛分 🍀 离缓冲 🌲 液
培养 🐦 基(例如 RPMI 1640)
血 🐒 清(例 🦄 如胎牛血 🐳 清)
抗生素 🦊 (例 如青霉素/链 🐦 霉素)
胶原酶玻璃注射器和针 🐡 头
培养瓶或培 🐞 养 🌵 板 🐯
培 🕷 养 🐒 箱 🌾 (37°C,5% CO2)
步骤1. 胰 🐳 岛分 🌲 离 🌹
处死 🕷 小鼠并摘取胰腺。
将胰腺置于 🦊 胰岛分离缓冲液中。
加入 🐴 胶原 🌳 酶 🌵 溶液,在 37°C 下孵育 1520 分钟。
用胰岛分离缓冲液反复冲洗胰腺,以去除残留的胶 🐱 原酶 💐 。
用玻 🪴 璃注射器和针头轻柔地消化 💐 胰 🐳 腺,释放胰岛。
过 🐘 滤消化 🐟 液以去除细 🌷 胞碎片。
使用密 🦆 度梯 🦟 度离心法纯 🦢 化胰岛。
2. 胰 🐠 岛 🐳 培 🌹 养
将胰岛悬浮在培 🦁 养基中,加入血清和抗生素。
将 🌵 细胞接种到培养瓶或培养板 🐼 中。
将培 🐅 养物 ☘ 置于 37°C、5% CO2 的 🍀 培养箱中。
3. 胰岛β细胞株的生长和维持 🌹
每 23 天更 🐵 换培 🌵 养基 🐅 。
定期监测 🐕 细胞生长和 🌵 活力。
培 🐵 养物 🕊 长满后,可以用胰蛋白酶消化并传代到新的培养瓶或培养板中。
为了保持胰岛β细胞的特性,可以加入生长因子(例 🌲 如胰高血糖素样肽1)和细胞保 🦢 β 护(剂 例如烟酰胺)。
注意事项培养小鼠胰岛β细胞 🐶 株时,保持无菌操作非常重要。
胰岛对温度和 pH 变化非常敏感,因此需要仔细监测 🌹 。
不同的培养基和血清组合可能会 🐺 影响细胞生 🐘 长和存活率。
定期 🕷 监测细胞形态 🌹 和胰岛素分泌对于确保细胞健康和功能性至关重要。
4、小鼠骨髓间 🦍 充质干细胞
小鼠骨 🐕 髓间 🐅 充质干细胞 (mMSCs)
定义:mMSCs 是从骨 🦁 髓中分离出来的多能干细胞,具,有分化为多种细胞类型的潜力包括骨细胞、软骨细胞和脂 💐 肪细胞。
来源:mMSCs 位于骨髓基质中骨髓,是长骨中心腔中的一种 🪴 软组织。
特性:粘附性粘附: mMSCs 于特定类型的基质,例 🐵 如塑料培养皿。
多能性能: mMSCs 够分化为多种细胞谱系 🦟 ,包:括
骨 🍁 细胞:形 🦍 成骨组织
软骨细胞:形成 🌷 软骨组 🐈 织
脂 🌷 肪细胞:形成脂肪组织
免 💐 疫调 🐘 节: mMSCs 具有免疫调节特性,可抑制免疫反应并促进组织修复。
分泌因子分泌: mMSCs 各种生 🐎 长因 🐵 子和细胞因子,可影响周 🌴 围细胞的生长分、化和存活。
应用:mMSCs 在再生医学领域具 🕷 有广泛的应 🐶 用,包括:
骨再生:修复骨 🐴 缺损和骨折。
软骨再生:治疗关节损伤和骨关 🐧 节炎。
脂肪组织再生:填充软组 🐴 织缺损 🐯 。
免疫 🌹 调节:治疗自 🌷 身免疫疾病和移植物抗宿主病。
药 🌼 物筛选:测 🐝 试新药物对干细胞的影 🐴 响和毒性。
研究:mMSCs 仍是正在进行的 🌳 活跃研究领域。科学家们正在调查:
mMSCs 的 🌿 分 🪴 化途径
mMSCs 在组织修复 🕷 中的 🐟 作用
mMSCs 在疾病治疗中 🕸 的潜在应用
安全性 🌳 和有 🦈 效性方面的挑战 🦋