小鼠髓系白血病干细胞（小鼠骨髓造血 🌷 干细胞染色体的制备与观察）
- 作者: 马燕然
- 来源: 投稿
- 2025-08-25
1、小鼠髓系白血 🐵 病干细胞
小鼠髓系白血病干 🐝 细胞 (LLSC)
定义：存在于骨髓中的一种造血干细胞（HSC）类 🐡 型。
具有自 🐋 我更新和分化成各种白血病细胞的能力。
与慢性 🌿 髓系白血病（CML）和急性 ☘ 髓系白血病 🌳 （AML）的发病机制有关。
特点：表达 🐬 白血病 🌿 相关标记物 🐼 ：Ly6A/E、Sca1、CD48、CD150
具有 🐒 再植能力：可以通过将小鼠 LLSC 移植到辐照受体小鼠中诱导出白血病。
对白血病治疗具有耐药性：LLSC 通 🦈 常对传统的化疗药 🦄 物和放疗具有耐药性。
自我更新和分化能力 🐼 ：LLSC 可以自我更新并分化成各种白血病细胞 🌷 ，包括粒细胞、单、核细胞红 🐘 细胞和巨核细胞。
作 🌳 用机制 🌴 ：
LLSC 被认为是白血病的发病机制的中心因素。它。们可 🌾 以通过获得驱动白血病发展的基因突变而变成恶性细胞这些突变可能涉及以下基因：
BCRABL1： CML 中 🐛 发现的融 🐘 合基 💮 因。
NPM1： AML 中发现的 🌳 突 🦄 变基 🌷 因。
FLT3： AML 中发 🐡 现的突变 🐟 基 🦍 因。
这些突变导致 LLSC 的自我更 🌼 新和分化能力增强，并赋予它们对治疗的耐药性。
靶向 🐳 治 🦈 疗：
靶向 LLSC 是 🦄 治疗白血病的关键策略靶向疗。法旨在特异性地杀 🦢 死 LLSC，同。时减少对正常细胞的损害一些常见的靶向疗法包括：
酪氨酸激酶抑制剂抑制（TKI）：白血病细胞中异常酪 🐘 氨 🦉 酸激酶的药物。
组 🐝 蛋白 🌻 脱乙酰酶抑制剂（HDACi）：激活白血病 🌸 细胞中肿瘤抑制基因的药物。
免疫疗法：利用免疫系 🌾 统识别和攻击白血病细胞的疗法。
通过 🦆 靶向 LLSC，研，究人员希望提高白血 🦟 病治疗的疗效并为 🐶 患者提供更持久的缓解期。
2、小 🦉 鼠骨 💮 髓造血干细胞染色体的制备与观察
材 🌻 料和试剂 🕊
小鼠培养基 🐈 （如 🦟 RPMI 1640）
细胞培养瓶 🕷
集落 💐 刺激 🐴 因子 (CSF)
白细胞 💐 介 🦟 素 🐴 3（IL3）
牧场生长 🦉 培养 🦆 液 💮 （FCS）
集 🌻 落形成单元 🐈 集落形成细胞（CFUC）培养基
肝素胶 🐘 原 🐛 酶 🌵 IV
溶血剂卡 🐒 里 🐺 洋红 🐬 试剂盒
显微镜盖玻片 🐶 和载玻片
步骤1. 小鼠骨 🌼 髓细胞的收 🌹 集 🌼
处死 💮 小鼠。
取出股骨 🦍 和 🐵 小腿骨。
小心地移除两端的 🐈 关 🐺 节 🐴 。
用无菌 💐 溶液冲洗掉骨头 🐞 表面的残留组 💐 织。
使用 🦉 注射器和 26 号针头抽取骨髓。
2. 骨髓 🌾 细 🦋 胞 🐧 培养
将收集到的骨髓细 🐡 胞转移到含有培养基、CSF、IL3 和的培养 FCS 瓶中。
将 🐅 细 🌼 胞培养于 37°C、5% CO2 的培养 🌸 箱中。
每 23 天更换一半培养 🦉 液 🦟 。
3. CFUC 培 🐒 养 🕷
收集 46 天的 🐱 培养液。
悬浮细胞并将 🕊 其接种到含有 CFUC 培养基的培养皿中。
将培养皿培养于 37°C、5% CO2 的培 🦋 养箱中。
4. 卡里洋红 🐛 染色
收 🪴 集 1014 天 🌻 的 🌷 CFUC 菌落。
用肝素和胶 ☘ 原 🌿 酶 IV 消化菌落 🐟 。
用 🦊 溶血剂溶解红细胞。
根据卡里洋红试 💮 剂 🌲 盒说明进行染色 🐛 。
5. 显微 🕊 镜观察 🌷
将 🕷 染色好的 🦄 细胞液滴到载玻片上。
盖 🐡 上盖玻片并用 🐵 显微镜观察。
记录染色体数量和 🌾 形态 🦉 异常。
注意事项使 🐟 用无菌技术进行整个操作。
使用高浓度的 CSF 和 🐬 IL3 来刺激骨髓细胞的增殖 🐅 。
仔细监测 CFUC 培养物并按时更换培 🕸 养液。
使用新 🌹 鲜制 🌹 备的 🦋 试剂。
3、小鼠骨 🐴 髓造血干细胞形成各种血细胞
骨 🦉 髓造血 ☘ 干细胞 (HSCs)
小鼠骨髓中的造血干细胞是多能干细胞能，够产生成熟的血细胞。这，些细胞在维持血液系统的正常功能中起着至关重要 🌿 的作用包括 🕸 ：
红细胞 🦈 红（血球 🐞 ）：负责氧气的运输。
白细胞：提供免疫力，对抗 🕸 感染和 🐴 疾病 🍀 。
血小 🐘 板：在血液凝固中起 🦢 作 🍁 用。
HSCs 的 🌳 分化
HSCs 分 🌾 化成各种血细胞的过程称为造血。它。涉及一系 🐛 列受多种信号通路和转录因子的 🍁 调节
祖细胞：HSCs 分 🐛 化成共同祖 💮 细胞，这些祖细胞进一步分化为骨髓祖细胞和淋巴祖细胞。
骨髓祖细胞 (MPCs)：MPCs 再分化为粒细胞单 🐵 核祖细胞、巨核细胞祖细胞和红细胞祖细胞。
成熟血细胞：祖细胞最终分化 🌴 为 🌳 成熟的血细胞，例如中性粒细胞、巨、噬细胞红细胞和血小板 🐟 。
造血调控造血是一个高 🍁 度受控 🌺 的过程受，各，种因素的影响包括：
激素：例如促红细胞 🦈 生成素 🪴 （EPO）和促 🦅 血小板生成素（TPO）。
细胞因子：例 🌳 如 🦋 白细胞介素（IL）和集落刺激因 🌺 子（CSF）。
微环境：骨髓中的基质细胞和血管系 🌵 统提供造血所需的信号 🪴 和营养。
HSCs 在 🐼 再生医学中的重要性
HSCs 在 🌾 再生医学 🐅 中具有潜在的应用 🐡 ，包括：
骨髓移植：用于治疗白血病、淋巴瘤 🐶 等血液系统疾病。
干细 🐋 胞疗法：用于修复受损组织或器官。
研究疾 🦍 病 🐒 机制：了解血液系统疾病的病因和寻找治疗方法。
4、小鼠髓 🐬 系白血病干细胞治 🦆 疗费用
费用因具体情况而 💐 异，包括：
治疗 🌺 中心：不同中心费用不同。
治 🐳 疗阶段：早期阶段 🐺 的费用低于晚期 🐋 阶段。
治疗方案：标准治疗方案费用低于实验性 🐅 方案。
患 🐶 者健康状况：合 🐞 并症和并 🐋 发症会增加费用。
地理位置：不 🐞 同 🐈 国家和地区 💐 的费用不同。
一 🐡 般费用 🐛 范 🦉 围：
早期阶 🐦 段：100,000250,000 美元 🦢
晚期阶 🐼 段 🐶 ：250,000500,000 美元
实验性方 🌳 案：> 500,000 美元
支 🦋 付 🌸 方式 🐺 ：
私人 🐛 保险：一些保险计划涵盖治疗费用。
公共计划：医疗补助和医疗保险等计划可能涵 🐬 盖部分费 🦁 用。
自掏腰 🐎 包：患者可能需要自掏腰包支付大量费用。
提示：与治疗中心沟通以获 🌿 取详 🌼 细费用估算。
探索所有支付方案，包括保险、政 🪴 府援助和筹款。
考虑交通、住宿和其他与治疗相 🦋 关的费用 🐈 。
征求多位医生的建议，以了解治疗方案和费用的选 🐵 择。
