小鼠骨髓干细胞标准(从小鼠中 🐒 取骨髓干细胞)
- 作者: 陈浚萧
- 来源: 投稿
- 2025-07-01
1、小鼠骨髓干细胞 🐺 标准
小鼠骨髓干细胞(BMSC)标准 🦁
定义:具有自我更新、分、化成多种细胞类型并形成骨软骨和脂肪组织 🕊 的能力的异质性多能细胞群。
来源:小鼠 🌹 骨髓
表征:表面 🐝 标记:
Sca1(Ly6A/E)
cKit(CD117)
CD45(低 🐠 表 🐋 达 🐋 )
CD34(低表 🦆 达 🐬 )
Flk1(低 🦈 表 🦅 达 🐎 )
体内 🌼 形成菌 🌲 落的能力:
形成成CFUF(纤 🐵 维细胞前体 🦁 菌落 🦍 )和成CFUO(骨)祖细胞菌落
多种分 💐 化潜能 🌻 :
体外诱导分化为成 🐅 骨细胞、软骨细胞和脂肪 🐴 细胞
体内移植到 🌵 免疫缺陷小鼠中,分化为这三种细胞类型
自我 🌷 更新 🐶 能力 🌴 :
长期培养中 🪴 保持分化潜能和表面标记
单细胞克隆形成新 🌷 菌落
分离和 🐎 培养:
分离:从小鼠骨髓中通过密度梯 🦊 度离心或流式细胞仪分选。
培养:通常在富 🐘 含血清 🐶 、生长因子和抗生素的 DMEM 培养基中培养。
培养基应每 23 天更 🌴 换一次。
应用:再生 🐕 医学和组 🐈 织工程 🐞
研究骨 🌻 和软骨疾病的机制
开发新 🐈 的 🪴 治 🌺 疗方法
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2、从小鼠中取 💮 骨髓 🦉 干细胞
步骤:1. 准 🐬 备小鼠 🐺 :
麻 💐 醉小鼠。
消 🌷 毒小 🐵 鼠手术部位 🐟 。
2. 暴露股 🐛 骨 🌷 :
在小 🐶 鼠后腿内侧做一个纵向切口。
用止血 🌴 钳 🦅 将肌肉小心拉开,露出股骨。
3. 采集 🐕 骨髓:
使用无菌针 🐴 头和注射器从股骨中抽取骨髓。
将收集到的骨髓转移到含抗凝剂的培养基 🐴 中。
4. 离心 🐼 分 🌷 离 🐞 :
将骨髓培养基离心将骨髓 🕷 ,细胞与血浆分离。
骨 🐈 髓细胞将沉淀在 🐟 管底。
5. 采 🐠 集干细胞:
小心吸 🐎 出上 🐎 清液,只留下 🐳 骨髓细胞。
骨髓 🐘 细胞包含 🐒 各种细胞类型包,括骨髓干细胞。
提示:在 🌾 整个过程中保持无菌 🍀 操作。
使用锋利的针头以尽量减少小鼠 🐯 的损伤。
抽取骨髓时 🐼 施加轻微的负压。
使用合适 🌲 的抗凝 🐠 剂防止骨髓细胞凝结。
后 🌸 续步 💮 骤:
分离和纯化骨髓 🌿 干细胞 🐴 (例如,通过流式细胞仪分选)。
可将骨髓干 🐬 细胞用于 🌷 各种研究和治疗 🐞 目的。